KAx-3细胞和AK127细胞发育期间细胞骨架蛋白组分比较研究

采用生化抽提骨架蛋白和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法比较盘基网柄菌AK127细胞和KAx-3细胞骨架蛋白的结果显示，发育各时期的KAX-3和AK127细胞骨架蛋白在含量和组分方面存在一定的差异.在整个发育阶段两种类型细胞共有的蛋白组分是103.4kD、49.6kD、44.2kD、30.8kD、19.8kD和13.5kD条带，其中44.2kD和30.8kD是最稳定的细胞骨架成分，并不因AK127细胞缺失gp150分子而有所改变.它们与其他骨架蛋白组分一起为细胞提供有力的支持，保证发育的顺利进行.差别最为明显的蛋白条带是87.2kD、 68.2kD和40.7kD蛋白，由于同时期的突变型细胞不能显示这些蛋白条带；说明这些条带是发育所需的蛋白.值得注意的是突变型细胞也出现一条特征性的21.1kD的蛋白条带.分析认为这些变化一方面与盘基网柄菌发育过程有关，另一方面与突变细胞缺乏gp150分子有密切关系.     

抗阿霉素中国仓鼠卵巢上皮细胞的聚合微管蛋白和F…

运用显微光度技术（ＭＰＶＩＩ），研究抗阿霉素（ＡＤＲ）的中国仓鼠卵巢上皮细胞（ＣＨＯ）抗药株（ＲＣＬ）的细胞骨架，同时测定单细胞的ＤＮＡ和聚合微管蛋白相对含量，ＤＮＡ和Ｆ－肌动蛋白相对含量，发现ＲＣＬ聚合微管蛋白含量测定减低，Ｆ－肌动蛋白含量增加都与ＣＨＯ有显著性差异，与ＣＨＯ相比，ＲＣＬ的Ｆ－肌动蛋白除含量增加外，排列较紊乱，并局部解聚，类似于转化细胞的形状，这表明，细胞骨架与多药抗药性有关，但     

杨树新梢萌发过程中贮藏蛋白质的动态变化

采用凝胶电泳技术(SDS-PAGE)对1年生杨树无性系797杨春季芽萌发阶段皮层、木质部和根系中的蛋白质含量及营养贮藏蛋白质组分进行了测定分析。结果表明:杨树体内(木质部、皮层、根部)蛋白质含量在芽萌发期间处于最低水平;木质部和皮层是杨树越冬期间贮藏蛋白质的主要场所;杨树新梢萌发期间贮藏蛋白质组分变化最明显的是36、32、181、6 kD等蛋白,其中36、32 kD蛋白在萌发前均可以清晰地辨认,叶子展开4周以后逐渐消失,而18、16 kD两种蛋白仅在发叶期间出现,之后完全消失,36、32 kD蛋白是杨树营养贮藏蛋白质的主要类型。     

鼠高,低转移性纤维肉瘤中波形纤维蛋白的分析

为探讨肿瘤细胞生物特性与细胞骨架蛋白表达的关系，选用了鼠的高、低转移性纤维肉瘤细胞，采用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳地，对这两株细胞的中等纤维蛋白－波形纤维蛋白进行了分析。结果显示：波形纤维蛋白在高、低转移性纤维肉瘤细胞中，其含量有所不同，并有波形纤维蛋白亚基的变化。     

纤毛虫皮层细胞骨架的研究进展

纤毛虫皮层的研究对探讨细胞的发育、分化、结构模式及其遗传控制有着极其重大的生物学意义,纤毛虫细胞皮层中含有非常丰富的细胞骨架成分,它们在结构上表现出来的特殊性有利于更深地探索皮层分化和皮层模式的控制机理,本综述了有关纤毛虫皮层细胞骨架的结构和形态发生方面的研究及皮层细胞骨架蛋白质构成的生化和分子生物学研究进展。     

抗阿霉素中国仓鼠卵巢上皮细胞的聚合微管蛋白和F－肌动蛋白的含量变化

运用显微光度术（ＭＰＶⅡ），研究抗阿霉素（ＡＤＲ）的中国仓鼠卵巢上皮细胞（ＣＨＯ）抗药株（ＲＣ１）的细胞骨架，同时测定单细胞的ＤＮＡ和聚合微管蛋白相对含量、ＤＮＡ和Ｆ－肌动蛋白相对含量，发现ＲＣｌ聚合微管蛋白含量减低，Ｆ－肌动蛋白含量增加，并都与ＣＨＯ有显著性差异。与ＣＨＯ相比，ＲＣｌ的Ｆ－肌动蛋白除含量增加外，排列较紊乱，并局部解聚，类似于转化细胞的形状。这表明，细胞骨架与多药抗药性有关，但是否直接或间接相关还有待于进一步研究。     

KAx-3和AK127细胞发育期间的骨架蛋白组分比较研究

采用生化抽提骨架蛋白和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法比较盘基网柄菌AK127细胞和KAx-3细胞骨架蛋白的结果显示,各发育时期的KAx-3和AK127细胞骨架蛋白在含量和组分方面存在一定的差异.在整个发育阶段两种类型细胞共有的蛋白组分是103.4 kD、49.6 kD、44.2 kD、30.8 kD、19.8 kD和13.5 kD条带,其中44.2 kD和30.8 kD是最稳定的细胞骨架成分,并不因AK127细胞缺失gp150分子而有所改变.它们与其他骨架蛋白组分一起为细胞提供有力的支持,保证发育的顺利进行.差别最为明显的蛋白条带是87.2 kD、68.2 kD和40.7 kD蛋白,由于同时期的突变型细胞不能显示这些蛋白条带;说明这些条带是发育所需的蛋白.值得注意的是突变型细胞也出现一条特征性的21.1 kD的蛋白条带.分析认为这些变化一方面与盘基网柄菌发育过程有关,另一方面与突变细胞缺乏gp150分子有密切关系.     

豇豆种子萌发进程中蛋白质组分的时空变化

以豇豆品种(早翠和矮虎)为材料,通过SDS-PAGE技术获得3个时期(干种子期、吸胀期、发芽期)和2个部位[胚(胚芽、胚根和胚轴)和子叶]的3种蛋白质组分(水溶、盐溶和碱溶)的电泳图谱.结果表明:品种间条带分布差异最大的时期是干种子期,部位是胚,组分为盐溶蛋白质.在萌发进程中,相对分子质量为60.4KD、55.4KD和49.7KD的3个条带没有时空变化,推测其是豇豆的保守性蛋白或结构蛋白.组分中以水溶蛋白所显条带数居多,但品种间多态性不丰富,早翠有两个特异带,而矮虎仅一个;盐溶蛋白组分所显品种间条带多态性丰富,早翠有107.8KD、18.3KD、15.7KD、14.0KD、12.8KD和11.4KD6个特异带,矮虎有41.0KD、27.3KD和14.4KD3个.故在豇豆种子萌发进程中,各蛋白质组分在品种内和品种间的时序和空间表达上,既显示出一致性又显示出差异性.由于对干种子期胚或子叶盐溶蛋白质组分的电泳分析,既显示品种遗传稳定性又能反映品种特异性,故均适宜于豇豆基因型判别,但基因型遗传关系分析宜以胚为材料,品种纯度检测宜用子叶为材料,不能两者混合取材,吸胀后的种子蛋白质组分分析不能反映基因型差异.     

氮肥用量对啤酒大麦籽粒蛋白质和醇溶蛋白组分含量的影响及其与β-淀粉酶活性的关系

氮肥用量显著影响籽粒蛋白质含量、B醇溶蛋白和C醇溶蛋白组分含量，而对D醇溶蛋白组分含量的影响不显著；随着氮肥用量增加，籽粒蛋白质含量、B醇溶蛋白和C醇溶蛋白组分含量显著增加，D醇溶蛋白组分含量增加相对较少。品种对籽粒蛋白质含量、C和D醇溶蛋白组分含量的影响要比氮肥用量大，而B醇溶蛋白组分含量的差异主要是由氮肥用量的差异引起的。氮肥用量显著影响千粒重和β-淀粉酶活性，而对产量的影响不显著；随着氮肥用量增加，千粒重和β-淀粉酶活性显著增加，而产量的变化相对较小。品种对千粒重和β-淀粉酶活性的影响要比氮肥用量大。本研究中未发现β-淀粉酶活性和籽粒蛋白质含量之间的正相关关系，     

华美游仆虫皮层细胞骨架的超微结构及免疫电镜观察

 应用透射和免疫电镜术,在超微结构水平观察显示,腹毛类纤毛虫华美游仆虫的皮层纤毛器和非纤毛器细胞骨架中,表膜下、细胞质深部的微管或纤维束,以及纤毛器及纤毛器附属微管等均是以α-和 β-微管蛋白为主要成分的微管类结构;中心蛋白定位于纤毛器的基体腔、基体基部近中心端、基体基部近中心端连接及基体中部连接结构中,而在纤毛杆和皮层非纤毛器微管中无中心蛋白成分存在。据此认为,该纤毛虫中,基体部位的蛋白组成机制与纤毛杆及纤毛器附属结构是不同的,非分裂期细胞中定位于基体主体部位的中心蛋白可能与维持相关结构的稳定性有关。     

冠突伪尾柱虫接合生殖DNA,RNA和蛋白质的合成

利用放射自显影术对冠突伪尾柱虫接合生殖期间其体内大分子合成进行研究，结果表明，接合体内除第二次成熟分裂外，其它各次核分裂之前都须进行一次ＤＮＡ合成．在大核原基发育过程中，其ＤＮＡ合成明显分为前后两个阶段．在接合体的老大核内持续进行低度的ＲＮＡ合成，并于接合后体分离时突然终止．４ｄ以后，数枚新的大核才出现活跃的转录．第二次皮膜改组启动之前，细胞内的蛋白质合成速率较低，其后显著增强．早期合成的ＲＮＡ以及蛋白质都参与了大核原基的发育．     

细胞应激条件下嗜热四膜虫线粒体膜电位变化研究

单细胞线虫纲原生动物四膜虫(Tetrahymena),在H2O2的诱导下可发生凋亡样死亡.另外,最新研究表明细胞中活性氧簇(ROS)的积累可有效地诱导细胞自噬途径的发生.通过流式细胞技术和荧光显微技术,检测了经饥饿和ROS诱导剂处理后,线粒体内膜电位变化及细胞内ROS的积累.此外,应用两种抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸(NAC)和过氧化氢酶(Catalase)分别对四膜虫细胞进行处理,检测了在氧化应激条件下的抗氧化作用效果.结果表明,Oligomycin和Menadione可有效抑制线粒体膜电位的维持,从而导致细胞内ROS积累.同时,H2O2处理和饥饿处理可以导致嗜热四膜虫细胞线粒体膜电位丧失以及细胞质ROS积累.另外,N-acetylcystine和Catalase可有效地降低四膜虫细胞内ROS的积累,以及保持四膜虫细胞线粒体内膜电位,维持通透性.     

细胞骨架在植物细胞周期进程中的动态变化及其调控?

细胞周期,即细胞生长与分裂的周期,是生命得以世代繁衍而生生不息的基础.真核细胞有丝分裂周期进程调控的分子机制高度保守.其间,微管和微丝骨架进行有规律的动态变化,顺次组成各种细胞生长和分裂装置,主动参与细胞周期进程的调节.然而,高等植物细胞周期不同时相分别有着与动物细胞不完全相同的、独特的细胞骨架列阵.而这些列阵的产生和维持直接依赖于众多细胞骨架结合蛋白以及上游信号分子的调控.本文重点综述了植物细胞周期进程中微管和微丝骨架的动态变化规律以及参与植物细胞骨架动态和有丝分裂装置组装调控的细胞骨架结合蛋白的最新研究进展,同时对细胞骨架在植物细胞周期进程中研究进行总结和展望.     

Evolutionary Mode of Metallothioneins Inferred from Cd-MT Genes of Tetrahymena

From Tetrahymena thermophila （strain BF5）, the coding region of Cd-MT gene was cloned and sequenced. and identified as MTT1 isoform. A serial duplicate structure is discovered in its amino acid sequence, which separates the coding region into three parts （Part 1：7-61; Part 2：64-118; Part 3：122-162）. The alignments among them and comparison with the corresponding parts of MT1 isoform suggest that MT1 and MTT1 isoforms both come from the same ancient gene that is homologous to Part 1, and Cd-MTs of Tetrahymena are aroused by such ancient gene duplication. The prediction of secondary structures and the analysis of the disulfide-bonding state of cysteine show that there are a lot of differences between MT1 and MTT1 isoforms, which maybe relate to their function mechanism.     

Control of germ cell nuclear behaviour at fertilization by Tetrahymena intermediate filament protein

Intermediate filament protein [relative molecular mass (Mr) 49,000 (49K)] from the ciliated protozoan Tetrahymena has been shown to resemble intermediate filament proteins from mammalian cells in several respects, and to have a possible role in the oral morphogenesis preceding binary fission in Tetrahymena. Here, based on immunofluorescence localization of the 49K protein in Tetrahymena during the early stages of conjugation, we suggest that the protein is involved in some nuclear events, such as the production of four haploid nuclei by prezygotic divisions (meiosis), selection of one of the four meiotic products, formation of the gametic pronucleus by the mitotic division of the selected meiotic product, transfer of the gametic pronucleus across a cell-cell junction, and zygote formation by pronuclear fusion.     

盐胁迫下水稻、番茄蛋白质变化的电泳分析

水稻品种 90 1 7经盐胁迫后 ,分子量约为 45 KD蛋白质减少 ,约为 38KD蛋白质增加 ,同时出现了分子量与调渗蛋白相类似的 2 6 KD蛋白质 ,随着盐胁迫浓度的提高及胁迫时间的加长 ,上述蛋白质谱带变化更为明显 .番茄品种白果强丰经盐胁迫后其真叶中分子量约为1 4KD和 1 7KD蛋白质减少 ,同时诱导出一条分子量约为 2 2 KD的新带 .     

Capping of surface receptors and concomitant cortical tension are generated by conventional myosin

We have investigated the role of cytoskeletal contraction in the capping of surface proteins crosslinked by concanavalin A on mutant Dictyostelium cells lacking conventional myosin. Measurements of cellular deformability to indicate the development of cortical tension show that cells of the wild-type parental strain, AX4, stiffen early during capping and relax back towards the softer resting state as the process is completed. Mutant cells lacking myosin (mhcA-) have a lower resting-state stiffness, and fail to stiffen and to cap crosslinked proteins on binding concanavalin A. Hence conventional myosin is essential both for capping and for the concomitant increase in cell stiffness. Furthermore, depletion of cellular ATP by azide causes a 'rigor' contraction in AX4 cells which makes them stiffen and become spherical. By contrast, the mhcA- cells fail to respond in these ways. These measurements of cortical tension in non-muscle cells can thus be directly correlated with the presence of conventional myosin, demonstrating that contractile tension generated by myosin can drive both a change of cell shape and the capping of crosslinked surface receptors.     

The Par complex directs asymmetric cell division by phosphorylating the cytoskeletal protein Lgl

To generate different cell types, some cells can segregate protein determinants into one of their two daughter cells during mitosis. In Drosophila neuroblasts, the Par protein complex localizes apically and directs localization of the cell fate determinants Prospero and Numb and the adaptor proteins Miranda and Pon to the basal cell cortex, to ensure their segregation into the basal daughter cell. The Par protein complex has a conserved function in establishing cell polarity but how it directs proteins to the opposite side is unknown. We show here that a principal function of this complex is to phosphorylate the cytoskeletal protein Lethal (2) giant larvae (Lgl; also known as L(2)gl). Phosphorylation by Drosophila atypical protein kinase C (aPKC), a member of the Par protein complex, releases Lgl from its association with membranes and the actin cytoskeleton. Genetic and biochemical experiments show that Lgl phosphorylation prevents the localization of cell fate determinants to the apical cell cortex. Lgl promotes cortical localization of Miranda, and we propose that phosphorylation of Lgl by aPKC at the apical neuroblast cortex restricts Lgl activity and Miranda localization to the opposite, basal side of the cell.     

Telomeric repeat from T. thermophila cross hybridizes with human telomeres

The ends (telomeres) of eukaryotic chromosomes must have special features to ensure their stability and complete replication. Studies in yeast, protozoa, slime moulds and flagellates show that telomeres are tandem repeats of simple sequences that have a G-rich and a C-rich strand. Mammalian telomeres have yet to be isolated and characterized, although a DNA fragment within 20 kilobases of the telomeres of the short arms of the human sex chromosomes has been isolated. Recently we showed that a chromosome from the fission yeast Schizosaccharomyces pombe could, in some cases, replicate as an autonomous mini-chromosome in mouse cells. By extrapolation from other systems, we reasoned that mouse telomeres could be added to the S. pombe chromosome ends in the mouse cells. On setting out to test this hypothesis we found to our surprise that the telomeric probe used (containing both the S. pombe and Tetrahymena thermophila repeats) hybridized to a series of discrete fragments in normal mouse DNA and DNA from a wide range of eukaryotes. We show here that the sequences hybridizing to this probe are located at the telomeres of most, if not all, human chromosomes and are similar to the Tetrahymena telomeric-repeat component of the probe.