嗜热四膜虫对数生长模型的研究

以单细胞原生动物为材料,研究其细胞结构和功能相关性,这在很早以前就已引起人们的关注,原生动物既是一个细胞,又是一个完整的动物,它们在经历了漫长的生命进化过程后,其细胞质结构发生了复杂分化,这种结构的复杂性往往是绝大多数的高等动物细胞所无法个企及的.原生动物细胞不仅具有容易培养,取材容易之优点,而且,人们还易于从形态学、形态发生学、生物化学及分子遗传学等方面同时对其进行综合性的研究和分析[2,3].因此,作为一种良好的研究系统,原生动物细胞已越来越受到人们的重视.单细胞原生动物嗜热四膜虫作为一个独立的生命体具有培养容易,增殖快,可以得到无菌细胞系及可以大量培养得到对数生长期细胞等特点,并具有象多细胞高真核生物一样完善的营养,生殖系统.所以已越来越被生物界视为研究细胞分子遗传学,进化生物学及分子生物学的极好实验模型[6].     

甘蓝(Brassica oleracea L.)叶片蛋白提取方法的比较

分别用直接提取法、丙酮沉淀法和丙酮三氯乙酸结合沉淀法提取甘蓝叶片蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果表明,丙酮沉淀法较适合甘蓝叶片蛋白质的提取.本文对影响SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的关键步骤进行了探讨,对凝胶的不同染色方法进行了比较,确立了一套适用于甘蓝叶片蛋白提取、定量、凝胶制备、电泳、染色以及脱色的方法.采用改良后的丙酮沉淀法提取的甘蓝叶片蛋白SDS-PAGE电泳结果显示,其条带清晰,数量多,分辨率高.     

上海四膜虫细胞膜和纤毛的蛋白质研究

以丰富有机培养基恒温无菌培养的上海四膜虫（ＴｅｔｒａｈｙｍｅｎａｓｈａｎｇｈａｉｅｎｓｉｓＳｌ）为实验材料,分别收集对数生长期和衰老期的四膜虫,用Ｎｏｚａｗａ等人［１］法制备细胞膜和纤毛样品,并按Ｌａｅｍｍｌｉ［２］法进行凝胶电泳,并扫描分析,还采用４％～２５％梯度凝胶电泳．结果为：（１）对数期的膜和纤毛样品的蛋白带,在相同的峰面积０．２ｍｍ２以上计算分别为３７和４０条,相应地比衰老期的膜和纤毛样品的蛋白带４７和４５条要少;（２）两种生理状态的纤毛样品在高分子区域蛋白带比膜样品多,并具有膜样品没有的３６０×１０３,３５５×１０３,３４５×１０３,３４０×１０３和３３０×１０３的蛋白带,而缺少膜含有的２５０×１０３,２００×１０３和１８０×１０３等蛋白带;（３）两种生理状态的纤毛和膜样品内部有明显的差别,即使具有相同的蛋白带,其含量也有显著不同．这些差别对于研究细胞衰老的分子机理有重要意义．     

牛至精油对嗜热四膜虫基因表达的影响

牛至精油(Oregano Essential Oil, OEO)具有抗菌、杀菌、抑制寄生虫生长等功效.为了解牛至精油影响细胞生长的分子调控过程,对牛至精油作用下0 h和24 h的嗜热四膜虫的基因表达情况进行分析.高通量转录组测序结果表明,对照组即未加入牛至精油24 h与0 h的样本数据,比较分析后鉴定到了6 297个差异表达基因(包括下调4 232个、上调2 065个),而实验组即加入牛至精油24 h与0 h的样本数据,比较分析后鉴定到7 596个差异表达基因(包括下调6 254个、上调1 342个).通过与对照组差异表达基因的比较发现,实验组特异上调和下调差异表达基因分别有257个和2 329个.GO功能富集发现,特异上调差异表达基因无功能富集,特异下调差异表达基因功能主要富集在RNA加工、蛋白质分解代谢、细胞定位和信号转导等过程.KEGG通路分析发现,特异下调差异表达基因主要涉及细胞自噬及细胞周期等通路.而这些过程或通路上基因表达水平的下调可能会抑制细胞的生长.对通路中7个下调的差异表达基因和3个无明显差异表达变化的基因进行实时荧光定量PCR检测,实验结果和转录组测序数据结果的相关...     

黄河兰州市区段水体对嗜热四膜虫种群生长的影响

在黄河兰州市区段采集水样，利用嗜热四膜虫（Tetrahymena thermophila）BFs的生长曲线和世代时闯作为指标来评价水质．结果表明，这5个样点的水对四膜虫的生长有不同程度的抑制作用，世代时间分别为：7.062，7.610，7.686，7.820，8.038h，与对照6.802h存在明显的差异．在α=0.05及α=0.01水平下进行了Duncan检验，比较了各样点的差别，最后采用欧氏距离-最近相邻法得聚类龙骨图．从四膜虫的种群生长曲线和世代时闻变化可反映出水质污染状况以及各样点污染的差异性，能够快速评价水质．     

KAx-3细胞和AK127细胞发育期间细胞骨架蛋白组分比较研究

采用生化抽提骨架蛋白和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等方法比较盘基网柄菌AK127细胞和KAx-3细胞骨架蛋白的结果显示,发育各时期的KAX-3和AK127细胞骨架蛋白在含量和组分方面存在一定的差异.在整个发育阶段两种类型细胞共有的蛋白组分是103.4kD、49.6kD、44.2kD、30.8kD、19.8kD和13.5kD条带,其中44.2kD和30.8kD是最稳定的细胞骨架成分,并不因AK127细胞缺失gp150分子而有所改变.它们与其他骨架蛋白组分一起为细胞提供有力的支持,保证发育的顺利进行.差别最为明显的蛋白条带是87.2kD、 68.2kD和40.7kD蛋白,由于同时期的突变型细胞不能显示这些蛋白条带;说明这些条带是发育所需的蛋白.值得注意的是突变型细胞也出现一条特征性的21.1kD的蛋白条带.分析认为这些变化一方面与盘基网柄菌发育过程有关,另一方面与突变细胞缺乏gp150分子有密切关系.     

游仆虫皮层细胞骨架立体结构的研究

游仆虫整个皮层细胞骨架由纤维篮组成,其中,口皮层骨架包括口围带小膜托架及其上方附着纤维和下方的深部纤维,以及波动膜托架;腹皮层骨架包括表膜下纵纤维层及其上方纤维网,棘手基部纤维及其向周围伸展的放射纤维,以及下方的深部纤维层;背皮层骨架包括表膜下纵纤维层及其上方的纤维网;口皮层骨架和有腹皮层骨架之间的纤维结构发生过渡状态的交互式联系;此外,作者在此基础上,并根据现有的资料,总结了现有的资料,总结了游     

姜黄素对嗜热四膜虫的氧化应激、凋亡诱导及线粒体损伤作用

以嗜热四膜虫为模式生物从氧化应激、凋亡及线粒体损伤作用探讨姜黄素的毒性效应,为姜黄素用药及生态安全提供依据.急性毒性实验:姜黄素(0.625、1.25、2.5 μg/mL)作用四膜虫2 h,通过快速细胞分析仪计数细胞,光学显微镜观察细胞形态变化;氧化应激:荧光酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平及乳酸脱氢酶活性(LDH...     

细胞应激条件下嗜热四膜虫线粒体膜电位变化研究

单细胞线虫纲原生动物四膜虫（Tetrahymena）,在H2O2的诱导下可发生凋亡样死亡.另外,最新研究表明细胞中活性氧簇（ROS）的积累可有效地诱导细胞自噬途径的发生.通过流式细胞技术和荧光显微技术,检测了经饥饿和ROS诱导剂处理后,线粒体内膜电位变化及细胞内ROS的积累.此外,应用两种抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸（NAC）和过氧化氢酶（Catalase）分别对四膜虫细胞进行处理,检测了在氧化应激条件下的抗氧化作用效果.结果表明,Oligomycin和Menadione可有效抑制线粒体膜电位的维持,从而导致细胞内ROS积累.同时,H2O2处理和饥饿处理可以导致嗜热四膜虫细胞线粒体膜电位丧失以及细胞质ROS积累.另外,N-acetylcystine和Catalase可有效地降低四膜虫细胞内ROS的积累,以及保持四膜虫细胞线粒体内膜电位,维持通透性.     

四膜虫锌指结构蛋白Zfp1影响离子胁迫下金属硫蛋白基因的表达

金属硫蛋白对细胞的环境应激起到重要的调节作用,在重金属离子胁迫下上调表达。然而其具体的表达调节机制并不清楚。本研究从嗜热四膜虫克隆了锌指蛋白基因ZFP1（TTHERM-01002770）,ZFP1基因无内含子,全长2 160bp,编码719aa。构建了ZFP1敲除载体pN-ZFP1,通过同源重组的方法敲除ZFP1基因获得ZFP1敲除的突变细胞。ΔZFP1对Cu2+和Cd2+的EC50值分别为53.0μmol/L和25.3μmol/L,低于野生型细胞83.1μmol/L和32.8μmol/L.Cu2+胁迫下,ΔZFP1突变细胞中MTT2、MTT3、MTT4和MTT5的转录水平降低,MTT1转录水平上调;Cd2+诱导下,MTT4转录水平降低,MTT1、MTT2、MTT3和MTT5的转录水平上调,敲除ZFP1基因影响了细胞对Cu2+和Cd2+的耐受性,ZFP1的缺失导致Cu2+和Cd2+诱导下金属硫蛋白基因转录水平变化。结果表明Zfp1参与了金属离子胁迫下嗜热四膜虫金属硫蛋白基因的表达水平。     

纤毛虫皮层细胞骨架的研究进展

纤毛虫皮层的研究对探讨细胞的发育、分化、结构模式及其遗传控制有着极其重大的生物学意义,纤毛虫细胞皮层中含有非常丰富的细胞骨架成分,它们在结构上表现出来的特殊性有利于更深地探索皮层分化和皮层模式的控制机理,本综述了有关纤毛虫皮层细胞骨架的结构和形态发生方面的研究及皮层细胞骨架蛋白质构成的生化和分子生物学研究进展。     

三个种牡丹雄性发育的比较研究

用常规石蜡切片法研究了牡丹三个种七个品种的雄蕊发育过程,结果表明3个种极为相似,大部分差别表现在数量特征上,说明种的特征在这一阶段的组织和细胞水平尚未明显反映出来,但就牡丹各种及品种在不同发育期所表现出的结构特征的微小差异以及发育节律的分化在物种形成、亲缘关系及育种实践方面的意义进行了讨论.     

社会主义初级阶段人的全面发展论略

从对马克思主义关于人的全面发展思想的本质内涵分析入手，着重揭示了我国社会主义初级阶段促进人的全面发展的重大意义及现实途径。     

斑马鱼早期胚胎发育形态学观察

以斑马鱼(zebmfish)胚胎为实验材料,进行活体观察和系列切片,观察斑马鱼的早期胚胎发育过程,探索了其发育机制。     

文献资源共享的分阶段性及其目标与任务

提出了将文献资源共享分为准备阶段、区域资源共享网络建设阶段和国家资源共享网络建设阶段,并提出了每一阶段的目标与任务。     

黄瓜离体雌核发育早期的特异蛋白研究

通过改进的IEF-SDS-PAGE技术研究了黄瓜雌核发育早期的特异蛋白质表达,并发现了11个特异多肽点,其中3个(A 1~A 3)可能是开启分裂基因表达的一类反式作用因子,起到抑制该基因表达作用.8个(B 1~B 8)可能是启动雌配子分裂密切相关的基因表达产物,以上特异蛋白在多次重复中均显示出良好的重复性,因此认为,这些特异蛋白可能对黄瓜雌核发育早期的启动起重要作用.     

麻雀拉氏等孢球虫（Isospora lacazesi）的内生殖期虫体考察

首次记述福建家麻雀Ｐａｓｓｅｒｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃｕｓ天然感染拉氏等孢球虫的内生殖期虫体。组织切片和涂片示明该虫的内生殖期有两型的无性世代和有性世代，无性和有性世代的虫体主要寄生家麻雀小肠的空肠中部和回肠的绒毛上皮细胞内，它们不寄生于心、肝、肺、肾和脾等器官组织细胞中．     

影响南瓜种子蛋白溶出率几种因素的初步探讨

探讨了料液比、pH值、温度、时间以及介质等因素对南瓜种子蛋白质溶出率的影响 .结果表明 :蛋白质的溶出率受pH值、介质的影响较大 ,其次为料液比、浸提温度和浸提时间 .初步确定南瓜种子蛋白质提取的较佳条件为 :料液比 1∶1 0 0 ,pH值 1 2 0的碱性条件下 ,37℃浸提 1 0h .     

不同生育期菊花叶片生理指标的比较研究

对田间栽培的秋菊早花品种“唐宇金秋”和晚花品种“祥云”不同生育期叶片中可溶性糖含量、SOD活性、相对电导率等生理生化指标变化进行了测定．结果表明：“祥云”与“唐宇金秋”可溶性糖含量的变化趋势基本一致,“祥云”糖含量高于“唐字金秋”,但“唐宇金秋”淀粉含量在各个时期均高于“祥云”;从绿蕾期到末花期“祥云”的SOD活性始终高于“唐宇金秋”,中花期“祥云”叶片中SOD活性较“唐宇金秋”高24．1％;两个品种脯氨酸含量呈上升趋势,“祥云”明显高于“唐宇金秋”,如末花期“祥云”较“唐宇金秋”高175．9％．整个测定时期“祥云”和“唐宇金秋”叶片的相对电导率均呈上升状态,各个时期“祥云”高于“唐宇金秋”．晚花品种“祥云”在开花过程中叶片具有较高的SOD活性与脯氨酸含量,可能是其花期较晚且具有较强抗性的主要原因．