蝉花提取物通过促进氧化胁迫应答抑制H2O2诱导的HeLa细胞衰老

本实验探究蝉花提取物(CCE)通过促进HeLa细胞的氧化胁迫应答抑制H2O2诱导的细胞衰老.在实验中,使用不同浓度的CCE处理HeLa细胞48h或72h,检测细胞的存活率.然后使用H2O2在HeLa细胞中诱导氧化胁迫,检测CCE处理组和对照组细胞的β 半乳糖苷酶活性和ROS水平的变化.HeLa细胞经CCE处理72h之后,提取RNA,通过实时荧光定量实验检测CAT、SOD1、SOD2、GPX1等抗氧化基因的表达量.结果表明：CCE抑制HeLa细胞的增殖,且呈剂量依赖效应,较低浓度的CCE（≦0.100mg/mL）对细胞生长无明显抑制作用.0.100mg/mL的CCE处理HeLa细胞72h后能够显著地促进CAT和SOD1 等基因的转录,从而降低H2O2产生的过量ROS,抑制细胞衰老.     

植物叶片H_2O_2胁迫应答蛋白质组学分析

植物叶片是感知外界H_2O_2胁迫信号的重要器官.整合分析了水稻(Oryza sativa)、小麦(Triticum aestivum)、二穗短柄草(Brachypodium distachyon)和柑橘(Citrus aurantium)在应对不同程度H_2O_2胁迫时蛋白质表达模式的变化特征.阐明了H_2O_2胁迫应答网络体系中的信号与代谢通路(如:光合作用、糖类与能量代谢、转录调控、蛋白质合成与命运、胁迫防御、信号转导和基础代谢等)的变化及植物叶片应答H_2O_2胁迫的分子调控机制.     

蝉花提取物促进酿酒酵母寿命延长的机制研究

本实验探究蝉花提取物(Cordyceps cicadae extracts,CCE)促进酿酒酵母抵抗H_2O_2诱导的氧化胁迫并延长其时序性寿命的机制.实验使用不同浓度的CCE处理酿酒酵母细胞,检测细胞的时序性寿命.然后通过H_2O_2诱导酿酒酵母细胞氧化胁迫,检测CCE处理组和不加药对照组的抗氧化胁迫能力以及细胞内的活性氧(ROS)水平的变化.酿酒酵母细胞经CCE处理后,通过实时荧光定量实验在mRNA水平检测抗氧化基因SOD2、GPX2、CTT1的表达量.结果显示CCE能够延长酿酒酵母时序性寿命,并且其作用随CCE浓度的增加而增强.此外,在H_2O_2诱导的氧化应激下,CCE预处理的细胞抗氧化胁迫能力增强,细胞内ROS水平显著降低.这些结果表明CCE延长了酿酒酵母的时序性寿命并通过上调CTT1和SOD2从而抵抗H_2O_2诱导的氧化胁迫.     

H_2O_2抑制镍阴极长气孔的研究

本文通过对H_2O_2分解动力学性质的研究与溶液表面张力及稳态极化曲线的测定,探讨了H_2O_2在NiSO_4-Na_2SO_4-NaCl-H_3BO_4体系中的行为以及H_2O_2抑制氢气生成的根本原因,并提出有H_2O_2存在时,氢在镍电极表面放电符合均相平行转化机理。     

水中脉冲高压放电诱导产生H_2O_2和O_3的研究

采用自制的针一筒电极脉冲高压放电装置进行水中高压放电诱导产生H2O2和O3的实验,研究了电极间距,放电电压,放电时间,放电方式曝气条件等因素对诱导产生H2O2和O3的影响,同时对放电过程能耗及其效率进行了研究.结果表明:电极间距和放电时间对产生H2O2和O2的浓度有较大影响,放电电压和放电方式影响不大.曝气条件下进行高压放电时,水中会产生NO2ˉ,NO2ˉ等阴离子,水体系pH降低,电导率增大.放电过程能量有效利用率为88.3%.     

虾青素抑制H2O2诱导的HeLa细胞凋亡

为了阐明虾青素的抗氧化作用与细胞凋亡的关系,探究虾青素预处理对H_2O_2诱导HeLa细胞氧化应激的影响.通过CCK-8、活性氧探针染色、流式细胞术、蛋白质免疫印迹、实时荧光定量pcr等,分别检测细胞存活率和活性氧的积累、细胞凋亡、蛋白含量、基因相对表达量改变.结果表明虾青素预处理组细胞活力较对照组提高了29.54%以上且其可以将H_2O_2诱导的活性氧降低至对照水平,同时提高Nrf2蛋白表达量3倍之多,过氧化氢酶基因相对表达量1.5倍.说明虾青素可以有效缓解H_2O_2诱导的HeLa细胞氧化应激,从而抑制细胞凋亡.     

H_2O_2诱导小麦叶片光合功能衰退的研究

采用不同浓度的H2O2处理小麦,研究H2O2对小麦叶片光合功能的影响.结果表明:1 mmol.L-1H2O2对小麦叶片光合作用基本无影响,10、100、200 mmol.L-1H2O2对小麦离体和连体叶片的光合作用均有不同程度的抑制作用,表现为光合速率、叶绿素含量下降.叶绿体超微结构显示10 mmol.L-1H2O2对其有影响,200 mmol.L-1H2O2处理后基粒明显破坏,类囊体膜无序.核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶加氧酶(Rubisco)大小亚基和羧化活性在20 mmol.L-1H2O2逆境下变化小,100 mmol.L-1H2O2处理,Rubisco大小亚基降解明显,羧化活性微弱.说明H2O2诱导小麦叶片光合功能衰退.     

人参多糖通过抑制ROS水平和凋亡保护H2O2诱导的心肌细胞氧化应激损伤

为探讨人参多糖缓解心肌氧化损伤的功效,利用过氧化氢(H2O2)诱导的H9c2大鼠心肌细胞建立体外心肌氧化损伤模型,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞存活率,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),流式细胞术检测活性氧(ROS)和细胞凋亡,Western Blot法检测细胞凋亡相关蛋白.结果表明：与对照组(Con)比较,H2O2能够使细胞存活率显著下降(P<0.001);与H2O2诱导组(模型组,Mod)比较,6.25 μg/mL人参多糖预防治疗24 h将细胞存活率由(57.47±5.08)%提高到(85.65±4.28)%(P<0.001),说明人参多糖能够对抗H2O2诱导的细胞毒性作用.流式细胞术DCFH-DA染色结果显示：与Con组比较,H2O2显著升高细胞ROS水平;而人参多糖预防治疗24 h后细胞ROS水平降低,提示人参多糖能够抑制H2O2诱导的H9c2细胞活性氧水平升高,并通过降低MDA含量及提高SOD活性缓解氧化应激损伤.同时,人参多糖可通过增加H2O2诱导损伤引起的Bcl-2/Bax比值,降低凋亡相关蛋白表达来缓解氧化应激导致的细胞凋亡.总之,人参多糖通过抑制ROS水平和细胞凋亡保护心肌细胞氧化应激损伤,为阐述人参保护心脏功效机制及产品研发提供了实验依据.     

TBX2基因沉默抑制卵巢癌细胞增殖同时促进细胞衰老发生

卵巢癌已成为致死率最高的妇科恶性肿瘤,缺乏特异性分子靶点是引起其高致死率的重要因素之一.TBX2是发育相关转录因子T-box基因家族成员之一,已证实其在黑色素瘤等多种肿瘤中异常表达.本实验通过免疫组化检测了人良性卵巢囊肿组织与卵巢癌组织中TBX2蛋白表达,并采用CCK8法、克隆形成实验、SA-β-Gal染色等方法,分析了在卵巢癌细胞中敲低TBX2后对细胞增殖和衰老的影响.结果表明TBX2在卵巢癌组织中高表达,同时TBX2基因沉默抑制了卵巢癌细胞增殖和克隆形成,诱导了P21WAF1和P16INK4A表达上调,促进了细胞衰老发生.     

H_2S介导PEG6000胁迫诱导的蚕豆气孔关闭

本文以蚕豆(Vicia faba)为材料,采用药理学方法和分光光度法,测定其气孔开度和叶片内硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)含量以及L-/D-半胱氨酸脱巯基酶活性(L-/D-cysteine desulfhydrase,L-/DCDes)的变化,进一步确定H_2S在聚乙二醇(PEG6000)调控气孔运动信号转导中的作用.结果显示:光下H_2S清除剂次牛磺酸(hypotaurine,HT)、H_2S合成酶抑制剂羧甲氧基胺半盐酸盐(aminooxy acetic acid,AOA)和羟胺(hydroxylamine,NH2OH)以及H_2S合成酶L-/D-半胱氨酸脱巯基酶(L-/D-cysteine desulfhydrase,L-/D-CDes)分解产物丙酮酸钾(potasium pyruvate,C3H3KO3)和氨水(ammonia,NH3)均显著抑制20%PEG6000胁迫诱导的蚕豆气孔关闭;20%PEG6000能显著提高叶片的H_2S含量及L-/D-CDes活性,且HT、AOA、NH2OH和C3H3KO3+NH3均能显著逆转PEG6000所引起的叶片H_2S水平和L-/DCDes活性的升高.结果表明PEG6000胁迫可通过促进叶片内L-/D-CDes活性提高,引起H_2S生成,进而诱导蚕豆气孔关闭.     

雌激素对H_2O_2诱导PC12细胞氧化应激的保护作用研究

为了探讨雌激素对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的影响及其可能机制.用H2O2处理PC12细胞建立氧化应激模型,并加入雌激素预处理作为保护.MTT法检测细胞活力,利用荧光探针对细胞内ROS进行荧光染色检测荧光强度,Hoechst/PI荧光染色,分析细胞凋亡情况,Western blotting检测MAPK(Mitogen-Activated Protein Kinase)的磷酸化水平.结果显示:H2O2作用于PC12细胞后显著降低细胞活力,10-8～10-6mol/L的雌激素预处理后均能部分阻断H2O2对细胞活力的影响.H2O2能显著增强PC12细胞的ROS荧光强度,雌激素可明显减少H2O2处理后PC12细胞内的ROS含量.H2O2激活MAPK,而雌激素抑制了p38的磷酸化,增加了ERK的磷酸化.以上结果表明,雌激素可以拮抗H2O2诱导的氧化应激,抑制p38的磷酸化,增强ERK的磷酸化可能是其发挥保护作用的机制之一.     

MAP激酶介导ABA诱导的H_2O_2产生调节水稻幼根生长

本文利用蛋白激酶抑制剂PD98059和H2O2荧光探针H2DCF-DA,探索MAP类蛋白激酶和H2O2在调节ABA抑制水稻幼根生长中扮演的角色及其可能的作用关系.结果显示,ABA以浓度依赖性抑制水稻幼根生长,明显诱导H2O2在伸长区积累.外源H2O2处理可有效模拟ABA抑制水稻幼根生长,该结果暗示,H2O2可能位于ABA下游,参与调节水稻幼根生长.蛋白激酶抑制剂PD98059处理,明显缓解ABA诱导的H2O2产生和对水稻幼根生长的抑制;并逆转ABA诱导的过氧化氢酶(CAT)活力上升.这些结果表明MAP类蛋白激酶通过调节根中H2O2的产生介导ABA调节的水稻幼根生长.     

H_2N_2O_2热分解的理论研究

采用MOPAC7程序包中的AM1程序 ,研究了H2 N2 O2 的稳定构象 .设计了三种分解的机理 ,通过计算得到每种机理的过渡态的结构和能量 ,进而得到每种机理的活化能 .结果表明 ,H2 N2 O2 的分解主要是通过一个五员环过渡态形成N2 O和H2 O .     

袋鼠皮多肽对H_2O_2诱导人肝细胞LO2氧化损伤的影响

为探索袋鼠皮多肽如何修复受H_2O_2损伤的人肝细胞LO2,通过建立H_2O_2诱导LO2细胞氧化损伤模型,研究袋鼠皮多肽对氧化应激损伤的LO2细胞的修复作用.结果表明:袋鼠皮多肽在0～0.5μg/μL质量浓度范围内不仅对LO2细胞活性没有抑制作用而且显著提高了受损细胞的存活率,改善了细胞的形态;与此同时,显著降低了H2O2诱导的丙二醛和蛋白质羰基含量,减少了活性氧的累积.综上结果可见袋鼠皮多肽能减小细胞的氧化损伤,有望用于新的功能性食品和护肤产品.     

外源H_2O_2对NaCl胁迫下番茄幼苗生长及生理指标的影响

采用水培法研究外源过氧化氢(H_2O_2)对NaCl胁迫下番茄幼苗内源H_2O_2水平、生长及抗逆生理指标的影响。结果表明:NaCl胁迫导致H_2O_2积累、氧化胁迫加剧,显著抑制了番茄幼苗的生长;而外源喷施0. 01 mmol/L H_2O_2和5 mmol/L DMTU均能提高脯氨酸含量,增强抗氧化酶SOD、POD和CAT活性,降低内源H_2O_2水平、电解质渗出率和MDA含量,从而缓解NaCl胁迫对番茄幼苗生长的抑制作用; NaCl胁迫下番茄幼苗叶片施用H_2O_2处理所产生的内源H_2O_2水平高于施用DMTU处理的,这与外源喷施H_2O_2缓解盐胁迫的效果优于喷施DMTU的结果一致,表明外源H_2O_2可通过诱导渗透调节能力及清除活性氧的防御能力、维持一定的内源H_2O_2水平、降低细胞膜脂过氧化程度、保护膜结构的完整性,从而有效缓解NaCl胁迫对番茄幼苗生长的抑制,提高其耐盐性。     

H_2O_2漂白蔗渣浆H_2SO_4预处理的研究

通过试验发现Ｈ２ＳＯ４预处理蔗渣浆能除去浆料中大量灰分，显著减少铁、锰离子含量，同时浆料高锰酸钾值有某些降低，可以为有少量木素溶解或结构发生变化，因而在相同漂白条件下，经Ｈ２ＳＯ４预处理后浆样白度提高６～８度。由于漂前酸的作用，漂白前后浆料多戊糖含量和漂白浆的得率略有减少。     

H_2O_2、K_2S_2O_8光降解有机磷DDVP的研究

以H2 O2 、K2 S2 O8为氧化剂 ,9W汞灯为光源对有机磷DDVP水溶液进行光降解 .结果表明 :H2 O2 、K2 S2 O8对DDVP的光降解具有良好的效果 .探讨了氧化剂浓度、pH值、Cu2 +浓度对DDVP光降解的影响 .提出了在H2 O2 、K2 S2 O8光降解DDVP过程中氧化降解DDVP的活性物种·OH和·自由基的产生和作用机理     

利用Cr(Ⅲ)—鲁米诺—H_2O_2化学发光体系测定H_2O_2的研究

本文建立了利用Cr(Ⅲ)—鲁米诺—H_2O_2体系测定H_2O_2的新方法。方法的检测极限是8×10~(-10)MH_2O_2工作曲线的线性范围是1×10~(-9)-1×10~(-2)MH_2O_2。测定的相对标准偏差小于5％。由于试样溶液和所有试剂溶液中都含有较高浓度的EDTA,排除了大多数金属离子的干扰,所以方法具有一定的选择性。此法试用于自来水中H_2O_2的回收试验,结果较好。     

Ag_9团簇上由H_2和O_2直接合成H_2O_2的密度泛函理论研究

应用密度泛函理论对H_2和O_2在Ag_9团簇上直接合成H_2O_2的可能性进行研究。计算H_2和O_2在Ag_9团簇上的吸附性质以及由H_2和O_2生成H_2O_2的反应机制。结果表明:O_2可以在Ag_9团簇上稳定吸附,但H_2很难与Ag_9团簇作用,只有通过Ag—O键才能发生解离。生成H_2O_2的过程可以分为两个阶段:首先解离两个H_2分子形成第一个H_2O_2分子,其中裂解第二个H_2分子为速度控制步骤,所需活化能为108.7 kJ/mol;再吸附的O_2分子夺取Ag_9团簇上两个H原子形成第二个H_2O_2分子,其中OOH自由基夺取Ag_9团簇上的H原子为速度控制步骤,活化能为124.7 kJ/mol。与文献中Pd、Au和Pd-Au团簇上由H_2和O_2生成H_2O_2的理论研究结果相比,Ag_9团簇具有促进H_2和O_2直接合成H_2O_2的催化活性。     

高浓度CO_2诱导气孔关闭中H_2O_2和NO的关系及其酶源

以拟南芥(Arabidopsis thaliana)野生型、NADPH氧化酶突变体和硝酸还原酶(NR)突变体为材料,借助气孔试验和激光扫描共聚焦显微镜技术,对H_2O_2和NO的酶源以及H_2O_2和NO的关系进行了研究。结果表明:高浓度CO_2关闭了野生型的气孔,该效应在AtrbohF突变体中部分缺失、在AtrbohD/F中完全缺失,但在AtrbohD中未见缺失;同时,高浓度CO_2诱导野生型保卫细胞H_2O_2产生的效应在AtrbohD和AtrbohF中部分降低,但在AtrbohD/F中完全缺失。这些结果显示,AtrbohD和AtrbohF催化产生的H_2O_2参与高浓度CO_2诱导气孔关闭。高浓度CO_2能诱导野生型保卫细胞NO合成和气孔关闭,该效应在Nia1-2和Nia2-5/Nia1-2突变体中完全缺失,但在Nia2-1中未缺失,显示Nia1来源的NO参与高浓度CO_2诱导气孔关闭。高浓度CO_2未诱导AtrbohF和AtrbohD/F保卫细胞NO合成,但诱导Nia1-2和Nia2-5/Nia1-2保卫细胞H_2O_2产生。NO供体SNP显著恢复AtrbohF和AtrbohD/F突变体气孔对高浓度CO_2反应的缺失,但H_2O_2未恢复Nia1-2和Nia2-5/Nia1-2气孔对高浓度CO_2反应的缺失。所以,高浓度CO_2诱导气孔关闭中NO合成依赖于H_2O_2产生。