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1.
一种改进的昆虫基因组DNA的提取方法 总被引:28,自引:2,他引:28
就昆虫总DNA的提取,介绍了一种简便、快速的提取方法,此方法既可对新鲜标本进行DNA提取、也可对冷冻标本、干标本、酒精泡制标本进行DNA提取,均能得到较完整的大分子DNA片段,并且得率较高.改进的昆虫总DNA提取方法简便、快速,对设备和试剂的要求都不高. 相似文献
2.
两种动物基因组DNA提取方法的比较 总被引:3,自引:0,他引:3
分别用酚抽提法和盐洗法提取鼠、鲤、鲍三种动物基因组DNA。利用分光光度计测定其OD260与OD280的吸光值,计算比率估计核酸的纯度,并利用琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段在凝胶中的位置,鉴定DNA.最终确定了一种简便、快捷、经济并适用于大多数动物基因组DNA提取的方法. 相似文献
3.
昆虫全基因组DNA的保存及提取 总被引:7,自引:0,他引:7
以蚂蚁、天牛、蝗虫等昆虫为实验材料,建立了75%酒精常温浸泡密封保存和福尔马林常温浸泡密封保存昆虫样品2~4周后进行全基因组DNA提取的方法。基因组DNA经紫外分光光度法(260 nm、280 nm)、琼脂糖凝胶电泳、PCR检测,结果表明:从两种方法保存的样品中均能提取到纯净完整的基因组DNA,适用于分子生物学实验。 相似文献
4.
拟步甲昆虫基因组DNA提取的比较研究 总被引:10,自引:0,他引:10
对拟步甲科8种昆虫的新鲜标本及无水乙醇浸泡标本,分别用SDS-蛋白酶K消化法和乙酸钾抽提法进行基因组总DNA的提取.经5次重复实验,结果表明,用两种方法均能从新鲜标本中获得较完整的DNA,且DNA得率较高;而对于无水乙醇保存的标本,提取出的DNA用琼脂糖凝胶电泳检测不出DNA条带,说明标本在保存过程中DNA可能发生了变化,致使提取出的DNA量太少或未分离出DNA.通过对比实验,分析原因,阐明了两种方法的优缺点,并提出了该类昆虫用于DNA提取的标本的保存方法. 相似文献
5.
青檀基因组DNA提取方法的优化 总被引:1,自引:0,他引:1
以青檀(Pteroceltis tatarinowii Maxim.)的叶片为材料,采用改良高盐低pH值法、改良SDS法、改良CTAB法和试剂盒法4种不同方法提取其基因组DNA,并进行电泳分析、质量检测及ISSR引物扩增检测.结果表明,改良CTAB法优于其它方法,提取的DNA质量较好,纯度较高,能满足进一步的实验要求. 相似文献
6.
火炭母富含有多酚、多糖等次生代谢产物.这些次生代谢产物对火炭母基因组DNA提取的质量与产量有较大影响.以火炭母的成熟叶片,幼嫩叶片、幼嫩茎尖为实验材料,采用改良SDS法和CTAB法,对火炭母进行基因组DNA提取,并通过琼脂糖凝胶电泳检测其完整性,紫外分光光度计法测定其浓度和纯度,对提取效果进行比较.以期得到提取火炭母基因组DNA的最佳方法. 相似文献
7.
稻蝗属基因组DNA提取方法 总被引:3,自引:0,他引:3
运用一种改进的方法对稻蝗属新鲜标本、酒精浸泡标本及干标本进行基因组DNA提取,样品经检测,谱带基本呈线形,无拖尾,OD(260/280nm)值66.7%在1.6~1.8之间。 相似文献
8.
适于RAPD分析的三种基因组DNA提取方法比较 总被引:7,自引:0,他引:7
通过对 3种基因组DNA提取方法的实验比较 ,找到了一种既能够满足RAPD实验要求 ,又简便快捷、经济的基因组DNA提取方法 ,经RAPD试验检测与电泳结果分析表明 :DNA扩增效果良好 相似文献
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摘要: 目的 比较采用 3 种不同 DNA 提取方法提取豚鼠血液基因组 DNA 之间的差异。方法 分别用新鲜抗凝血 NaI 手提法、血凝块手提法和试剂盒 DNA 提取法提取 20 只豚鼠血液基因组 DNA,用分光光度计测定、琼脂糖凝胶 电泳、PCR 扩增等方法对提取的 DNA 片段的完整性、浓度、纯度和用于 PCR 扩增的效果等方面进行比较研究。结 果 新鲜抗凝血 NaI 手提法提取的 DNA 完整性、浓度和纯度均为最高; 血凝块法提取的 DNA 浓度和抗凝血提取的 DNA 浓度接近但纯度最低,有一定程度的断裂和降解; 试剂盒法提取的 DNA 浓度最低,纯度和完整性处于中间,但 三种方法提取的 DNA 都可用于 PCR 扩增反应。结论 3 种方法都可以提取基因组 DNA 并且所提取的 DNA 均能 满足后续 PCR 扩增实验的要求,但每种方法各有利弊,可根据具体的条件选择适宜的方法。 相似文献
10.
稻蝗属基因组DNA提取方法 总被引:11,自引:0,他引:11
运用一种改进的方法对稻蝗属新鲜标本、酒精浸泡标本及干标本进行基因组 D N A 提取.样品经检测,谱带基本呈线形,无拖尾, O D(260/280 nm )值667% 在16~18 之间. 相似文献
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A simple and effective method for total RNA isolation of appressoria in Magnaporthe oryzae 下载免费PDF全文
Appressorium formation is an important event in establishing a successful interaction between the rice blast fungus, Magnaporthe oryzae, and its host plant, rice. An understanding of molecular events occurring in appressorium differentiation will give new strategies to control rice blast. A quick and reliable method to extract total RNA from appressorium is essential for studying gene expression during appressorium formation and its mechanism. We found that duplicate film is an efficient substratum for appressorium formation, even when inoculated with high density conidia. When inoculated with conidia at 1 × 106 ml^-1, the percentages of conidium germination and appressorium formation were (97.98±0.67)% and (97.88±0.45)%, respectively. We applied Trizol before appressorium collection for total RNA isolation, and as much as 113.6 lag total RNA was isolated from the mature appressoria at 24 h after inoculation. Functional analysis of two genes, MNH6 and MgATG1, isolated from the cDNA subtractive library, revealed that the quantity of RNA was good enough to construct a cDNA (complementary DNA) library or a cDNA subtractive library. This method may be also applicable for the appressorium RNA isolation of other pathogenic fungi in which conidia differentiate into appressoria in the early stages of host infection. 相似文献
12.
基于双层墙隔声和多孔吸收原理,结合储粮害虫活动声的特征,设计了一种体积为6m^3的隔声室.该隔声室利用胶合板作为双层墙壁材料,两墙壁间距离为0.08cm,外墙壁均匀穿孔,孔径为1mm,间距为1.5cm,并在支撑物上加垫较硬吸声材料组成准双重穿孔隔声结构.实验表明,在125~2000Hz的频带范围内,隔声室能均匀隔离环境噪声,平均隔声量为22dB,可满足储粮害虫活动声的频率范围和声压级要求. 相似文献
13.
苔藓植物总DNA提取方法和条件的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
通过CTAB法和高盐低pH法对几种苔藓植物组织DNA的提取进行了比较,结果表明高盐低pH法操作简单、快捷,无需DNA的纯化步骤。且提取DNA的含量和纯度都很高,经过紫外吸收法检测,A^260A^280的比值在1.7—2.0之间。同时实验也研究了提取材料、β-巯基乙醇以及处理方法对DNA的影响,结果表明实验材料对DNA的含量和纯度的影响不大,而在提取缓冲液中加入l%β-巯基乙醇可以有效的抑制酚类物质使DNA褐变,在提取过程中增加回收步骤可以提高DNA产量。这些结果为今后进一步开展苔藓植物的分子生物学研究奠定了基础。 相似文献
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15.
对太白红杉总DNA提取方法进行了探讨,并对其不同部位和器官、不同处理方式材料进行了提取实验研究.通过琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶处理等方法对所提取的DNA样品进行检测.结果表明,改良后的CTAB法,对于太白红杉总DNA的提取是一种良好的简单易行的方法,无论是烘干后的材料还是新鲜材料提取的总DNA中基本没有蛋白质及酚类污染.该方法可在短时间内获得大量的DNA样品,并可根据需要对样品进行适当操作. 相似文献
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一种简易的植物核酸提取方法─—从干叶和新鲜叶中快速提取RNA和DNA 总被引:8,自引:0,他引:8
本文介绍了一种植物核酸提取的简易方法.该法只需在常温下按常规的分子生物学操作条件从已干燥的和新鲜的植物叶中快速提取总RNA和DNA.所获得的RNA和DNA能顺利用于下一步的PCR、测序及小分子RNA研究等分子生物学实验. 相似文献
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黑麂粪便DNA的简易提取方法 总被引:1,自引:0,他引:1
收集九龙山自然保护区野外自然条件下的黑麂粪便样品,用无水乙醇保存于-70℃冰箱,经十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)裂解液温浴粪便、酚/氯仿抽提及聚合酶链反应(PCR)纯化试剂盒纯化等步骤提取黑麂粪便DNA,并扩增线粒体DNA细胞色素b基因和2个微卫星位点进行检测;同时提取黑麂肌肉和皮毛样品的DNA作为对照.结果显示,该方法可以从粪便中提取到高质量的黑麂DNA,并可进行有效扩增,为黑麂及其他濒危鹿科动物的非损伤取样提供了一种简易方法. 相似文献
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螽斯总科昆虫基因组DNA的提取和种内雌雄及体色表现型不同个体间RAPD带型变异的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
报道了不同保存材料的基因组DNA提取的材料学研究以及对四种螽斯种内雌雄及体色表现型不同个体间RAPD带型变异研究 .结果表明 ,新鲜材料、冰冻保存材料、80 %~ 1 0 0 %酒精浸泡保存标本及烘干标本均可提取出较好的基因组DNA ,同种内雌雄及体色表现型不同个体采用RAPD技术均能准确检出 相似文献
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不同植物细胞RNA提取的适宜方法各不相同.本实验分析、比较了QIAGEN试剂盒法和西曲溴铵(CTAB)法用于赤潮藻细胞总RNA提取的情况.结果显示,两种方法均可获得高质量的总RNA.比较而言,CTAB法比QIAGEN试剂盒更可取,适合藻细胞RNA的大量提取. 相似文献