水稻OsAAA1蛋白的原核表达载体构建及其可溶性表达研究

为使用外源表达载体表达并纯化有活性的水稻ATP酶蛋白Os AAA1,构建了p ET-32a-Os AAA1原核表达载体并进行体外IPTG诱导表达和Ni+柱亲和层析纯化.利用SDS-PAGE和Western Blot检测了目的蛋白.结果表明:将成功构建的p ET-32a-Os AAA1原核表达载体,转化到大肠杆菌Origami菌株后,在70~100 KD之间检测到可溶性目的蛋白带,并优化了诱导表达的较适温度、IPTG诱导浓度和诱导表达时间.故成功构建了p ET-32a-Os AAA1原核表达载体并获得了可溶性Os AAA1目的蛋白,为其后续研究奠定了基础.     

人源fidgetin like-1蛋白AAA结构域的重组表达及酶学性质分

Fidgetin是2000年发现的一个AAA蛋白家族新成员,同源序列分 析表明它与ka-tanin、spastin属于AAA家族的同一亚家族,因此可能 也具有ATP依赖的微管切割活性,ATP的结合和水解应该发生于 fidgetin蛋白中保守的AAA结构域.在大肠杆菌中重组表达的人源 fidgetin like-1(FIGL-1)蛋白的AAA结构域片段(HsFIGL-1-AAA),纯 化后的最终产率为每升5 mg蛋白.与AAA蛋白通常形成六聚体不 同,HsFIGL-1-AAA在溶液中为单体,且其     

人源fidgetin like-1蛋白AAA结构域的重组表达及酶学性质分析

Fidgetin是2000年发现的一个AAA蛋白家族新成员,同源序列分析表明它与ka-tanin、spastin属于AAA家族的同一亚家族,因此可能也具有ATP依赖的微管切割活性,ATP的结合和水解应该发生于fidgetin蛋白中保守的AAA结构域.在大肠杆菌中重组表达的人源fidgetin like-1(FIGL-1)蛋白的AAA结构域片段(HsFIGL-1-AAA),纯化后的最终产率为每升5 mg蛋白.与AAA蛋白通常形成六聚体不同,HsFIGL-1-AAA在溶液中为单体,且其ATPase活性很低,仅为0.0063 s-1.与其他AAA蛋白的序列比对发现,Sensor 2 motif中保守的Arg残基在HsFIGL-1-AAA结构域中为Thr,但该位点的突变T609R并未明显改变该蛋白的ATPase活性.这些结果提示HsFIGL-1可能以一种特殊的方式发挥功能,这为进一步研究fidgetin及其同源蛋白的结构和功能奠定了基础.     

沙苑子对运动性疲劳大鼠血清BCAA、AAA的影响

分析中药沙苑子对运动性疲劳模型大鼠血清支链氨基酸(branched-chain amino acid,BCAA)及芳香族氨基酸(aromatic amino acid,AAA)的影响,为沙苑子作为运动保健品的开发利用提供实验依据.选用SD(Sprague Dawley,SD)雄性大鼠24只,体重190~230 g,随机分为安静对照组、一般训练组、强化训练组、强化加药组(各6只),进行7周递增负荷跑台运动建立运动性疲劳大鼠模型,于第8周始运动即刻后取材,运用氨基酸自动分析仪测定大鼠血清游离氨基酸含量.结果表明,长时间耐力跑台运动应激使大鼠血清BCAA含量有所下降,AAA尤其是游离色氨酸(free-tryptophan,f-Trp)含量上升,沙苑子可抑制BCAA下降、AAA上升趋势;长时间耐力跑台运动使实验大鼠血清f-Trp/BCAA、AAA/BCAA显著增加,运动过程中血中蛋白质代谢增强,BCAA大量分解供能,AAA相对增多,从而使f-Trp/BCAA、AAA/BCAA增高.沙苑子可以抑制f-Trp/BCAA、AAA/BCAA上升,且对强化训练引起的f-Trp/BCAA、AAA/BCAA升高有显著的降低作用.沙...     

用蒙特卡罗模拟评估小野条件下骨介质中AAA算法的精度

用蒙特卡罗模拟评估放射治疗剂量计算使用的各向异性分析算法(Aniso-tropic Analytical Algorithm,AAA)在小野条件下骨介质中的计算精度.建立一包含骨介质的水模体,分别用AAA算法、PBC算法(作为对比)和蒙特卡罗(Monte Carlo,MC)模拟计算2 cm×2 cm到8 cm×8 cm射野条件下该模体中的深度剂量和离轴比,并以MC模拟为标准比较深度剂量,用一维伽马分析对离轴比进行分析.结果显示,与MC模拟的结果相比,AAA算法与PBC算法均高估了骨介质区域的剂量,高估的剂量偏差范围分别为2.16%～2.7%、1.4%～2.03%.AAA算法与PBC算法均低估了(PBC算法2 cm×2 cm射野除外)肺介质后区域的剂量,低估的剂量偏差范围分别为-0.39%～-1.19%、-0.13%～-0.4%.AAA算法和PBC算法分别略高估了射野内边缘和外边缘的剂量.一维伽马分析显示AAA算法和PBC算法(以MC模拟结果为基准)在2 cm×2 cm到8 cm×8 cm射野,通过率分别为100%、100%1、00%、86%,100%、100%、72%、64%.总之,AAA算法在骨介质中剂量计算的结果略高于MC模拟的结果,与PBC算法相比,计算精度没有显示出明显的优势.     

Diameter协议对RADIUS协议安全缺陷的改善

RADIUS协议是目前最流行的AAA(授权,认证,计费)协议,但协议本身存在明显的安全缺陷。Diameter协议是IETF的AAA工作组正在致力制定的基于RADIUS的新一代协议。文章分析了RADIUS协议内在的安全缺陷,并介绍了Diameter协议对RADIUS协议在安全方面的改善。     

基于AAA的移动IP安全机制的研究

研究了基于AAA的移动IP安全机制,针对移动IP通信过程当中面临的安全问题,通过分析IETF提出的基于AAA的移动IP模型,提出了一种改进方案。该方案可以提高移动IP注册的效率,增加移动IP认证注册过程中的安全性,同时也能提高移动IP注册完成以后通信过程的安全性。     

采用RADIUS协议的AAA系统的研究

AAA是认证、授权、计费系统的简称,用来完成对用户身份合法性的鉴别、权限的分配、话单的采集、费用的结算等功能。其核心模块Radius服务器与网络接入服务器之间的通信协议采用RADIUS协议。通过对RADIUS协议层次结构、软件结构特点、工作原理及认证计费流程的详细分析,验证了AAA系统采用RADIUS协议的可行性。     

AAA活性污泥法工艺研究

文章在对从AAA工艺多年运行结果进行综合分析的基础上,探讨了该工艺运行的最佳工况参数范围。     

采用RADIUS协议的AAA系统的研究

AAA是认证、授权、计费系统的简称,用来完成对用户身份合法性的鉴别、权限的分配、话单的采集、费用的结算等功能.其核心模块Radius服务器与网络接入服务器之间的通信协议采用RADIUS协议.通过对RADI-US协议层次结构、软件结构特点、工作原理及认证计费流程的详细分析,验证了AAA系统采用RADIUS协议的可行性.     

VoIP RADIUS AAA服务器的设计

VoIP(Voice over IP,网络电话)和PSTN相比,因其技术优势和时代特征,必将成为未来通信的主要手段.VoIPAAA服务器是整个IP电话走向运营的基础,是VoIP服务提供商(ITSP)成功开展商业业务的关键所在.本文主要讨论了基于H.323协议体系的VoIP系统的RADIUS AAA服务器的系统结构设计,并给出了部分关键模块的实现方法.     

搞好高校基建项目审计的几点认识

分析了目前高校基建审计中存在的问题和困难,提出了强化制度建设,规范基建管理和审计监督,加强基建审计队伍建设,对基建工程实施全过程监控等合理化建议来规范基建审计,以保证基建经费的有效使用,提高资金使用效益。     

DNA stretching by bacterial initiators promotes replication origin opening

Many replication initiators form higher-order oligomers that process host replication origins to promote replisome formation. In addition to dedicated duplex-DNA-binding domains, cellular initiators possess AAA+ (ATPases associated with various cellular activities) elements that drive functions ranging from protein assembly to origin recognition. In bacteria, the AAA+ domain of the initiator DnaA has been proposed to assist in single-stranded DNA formation during origin melting. Here we show crystallographically and in solution that the ATP-dependent assembly of Aquifex aeolicus DnaA into a spiral oligomer creates a continuous surface that allows successive AAA+ domains to bind and extend single-stranded DNA segments. The mechanism of binding is unexpectedly similar to that of RecA, a homologous recombination factor, but it differs in that DnaA promotes a nucleic acid conformation that prevents pairing of a complementary strand. These findings, combined with strand-displacement assays, indicate that DnaA opens replication origins by a direct ATP-dependent stretching mechanism. Comparative studies reveal notable commonalities between the approach used by DnaA to engage DNA substrates and other, nucleic-acid-dependent, AAA+ systems.     

大型基础设施项目群组决策的模糊评价

考虑到大型基础设施项目对社会文化、区域经济和生态环境等产生的影响，综合应用模糊评估原理和层次分析方法，建立了群组决策的综合模糊层次分析模型，给出了对项目方案定性化和定量化的层次结构评价模式和综合评价方法，为评价大型基础设施项目方案提供了有效的手段．可用于对某一具体基础设施项目的等级评定，也可以对基础设施项目多个方案进行综合评价．     

Chaperone-like activity of the AAA domain of the yeast Yme1 AAA protease

The AAA domain, a conserved Walker-type ATPase module, is a feature of members of the AAA family of proteins, which are involved in many cellular processes, including vesicular transport, organelle biogenesis, microtubule rearrangement and protein degradation. The function of the AAA domain, however, has not been explained. Membrane-anchored AAA proteases of prokaryotic and eukaryotic cells comprise a subfamily of AAA proteins that have metal-dependent peptidase activity and mediate the degradation of non-assembled membrane proteins. Inactivation of an orthologue of this protease family in humans causes neurodegeneration in hereditary spastic paraplegia. Here we investigate the AAA domain of the yeast protein Yme1, a subunit of the iota-AAA protease located in the inner membrane of mitochondria. We show that Yme1 senses the folding state of solvent-exposed domains and specifically degrades unfolded membrane proteins. Substrate recognition and binding are mediated by the amino-terminal region of the AAA domain. The purified AAA domain of Yme1 binds unfolded polypeptides and suppresses their aggregation. Our results indicate that the AAA domain of Ymel has a chaperone-like activity and suggest that the AAA domains of other AAA proteins may have a similar function.     

邢台市旅游业发展策略研究

对邢台市旅游业发展过程中存在的问题如资源开发与形象建设、市场开发、基础设施建设、产业结构、管理体制等方面进行了系统分析,并提出了一些切实可行的发展策略.     

绿色基础设施雨污管理规划研究进展

传统雨水和污水管理基础设施的弊端在高速城市化进程下日益显现,绿色基础设施已被认为是更具可持续性的、理想的替代设施.从目标制定、设施类型选择、所选设施数量及规模确定、选址和绿色基础设施网络优化5个方面对绿色基础设施规划于雨水和污水管理领域的已有研究进行了总结,分析不足和未来研究方向.鉴于难以量化绿色基础设施收益限制了相关规划研究的发展,指出通过跨学科、多部门合作,建立水文生态耦合模型探究水文过程和生态过程交互机制是支持绿色基础设施提供水文、生态和社会综合效益的量化研究的可行途径.阐述了分别从设施尺度和网络尺度进行完整的绿色基础设施规划研究的必要性,明晰了景观格局优化是在设施尺度研究的基础上进行绿色基础设施网络优化以保障并提升绿色基础设施功能的技术路线,指出对绿色基础设施的规划研究应逐渐由雨污管理功能延伸至社会生态系统中兼顾生态环境和社会经济视角的多项生态系统服务的提供.