外加植物生长调节剂和钙调素对白芷悬浮培养细胞增殖效应的关系

利用３ＨＴｄＲ标记ＤＮＡ合成的方法研究了外加植物生长调节剂和钙调素对白芷悬浮培养细胞增殖的影响．ＭＳ培养基中有和无植物生长调节剂时,钙调素对细胞增殖的促进效应分别为４１％和４３％．结果表明外加钙调素对细胞增殖的效应与培养介质中的激素浓度可能无关     

东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养，选择生长旺盛，紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究，确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

红豆杉细胞悬浮培养及动力学研究

对红豆杉细胞在５Ｌ通气机械搅拌式反应器中的培养过程及动力学进行了研究．经２４ｄ培养，细胞生物量增加３倍，紫杉醇含量可达细胞干重的１．０３５×１０－３．建立了描述细胞生长过程的模型，采用分段多项式函数逼近关联ｕ与ｕｍ的函数Ｆ（ｓ），建立了描述产物合成的动力学方程，采用多项式函数逼近关联产物合成速率与细胞生长速率的函数，确定了部分动力学参数     

植物生物反应器细胞悬浮培养研究进展

利用生物反应器进行植物细胞悬浮培养可以缩短植物细胞的生长周期，但进行大规模植物细胞悬浮培养会受到植物自身特点和生物技术的限制。通过与微生物相比较，笔详细介绍了植物细胞悬浮培养的特点，分析了用于植物细胞悬浮培养的反应器类型及其特点和适用范围，并提出以植物快速繁育为主要目标的植物生物反应器的研究方向。     

生物量对黄花蒿悬浮培养细胞生长的影响

黄花蒿细胞悬浮培养过程中，分别以１０、３０、６０、８０ｇ／Ｌ的接种量进行细胞生长的对比实验．在所述培养条件下的最适起始细胞浓度为鲜重６０ｇ／Ｌ培养基．起始培养的细胞浓度直接影响细胞的生长周期增殖倍数．起始浓度越高，细胞生长周期越短，但细胞的增殖倍数越小．起始细胞浓度对黄花蒿悬浮培养细胞对数生长期的比生长速率影响不大．     

丰抗8号小麦悬浮细胞系的建立及遗传转化的初步研究

以丰抗８号小麦的幼胚为起始材料,建立了胚性悬浮细胞系．幼胚的取材时期、培养基的成份和选择继代的方法有明显的影响．取开花后１２～１４ｄ的幼胚、增加无机盐离子和还原态氮的用量、挑选鲜黄致密及松脆类型的愈伤组织能显著地抑制空瘪型、长条型、弯弓形等不良细胞类型出现的频率,促进细胞向圆球型方向分裂生长．通过３个月的选择继代培养,获得了理想的松散状胚性愈伤组织;再经过ＭＳ２Ｌ和ＡＡ液体培养,约２个月后,建立起分散性好、颗粒小、增殖快的小麦悬浮细胞系．以新建立的胚性悬浮系为材料,进行基因枪转化,获得了ＧＵＳ报告基因的短暂表达,平均短暂表达频率为１７．１％．就如何筛选转基因小麦进行了讨论．     

伊贝母细胞悬浮培养的研究

研究了伊贝母细胞悬浮培养过程中接种量、培养方式和激素浓度对细胞生长的影响；测得细胞生长周期为１９～２４ｄ；分析了培养液的ｐＨ、蔗糖浓度、电导率和Ｄｏ变化的原因。鉴定了悬浮培养细胞中含有生物碱，其总生物碱和西贝素含量均高于栽培鳞茎。     

不同光照对丹参悬浮细胞的生长和生理效应

以丹参幼嫩叶片为材料诱导和筛选愈伤组织,进行细胞悬浮培养.初步探讨了在光照和黑暗条件下,悬浮培养的丹参细胞生长和生理生化特性.结果表明：不同光照条件下,丹参悬浮培养细胞的生长周期均为30 d,细胞增殖率曲线呈“S”形;可溶性蛋白质含量、POD活性、SOD活性均在不同时间出现两个峰值,其变化趋势与细胞的生长势呈正相关.光照有利于丹参细胞悬浮培养,最佳继代培养时间为18 d到21 d,最佳收获期可延迟一周.     

酵母诱导子对肉苁蓉细胞悬浮培养影响的研究

目的:以酵母诱导子对肉苁蓉细胞悬浮培养及其抗氧化活性成分苯乙醇苷的合成动力学的影响进行研究.方法:从肉苁蓉种子诱导出愈伤组织,在MS培养基上进行细胞悬浮培养.首先考察肉苁蓉细胞生长和苯乙醇苷合成的动力学,在此基础上就酵母诱导子对细胞生长和苯乙醇苷合成的影响进行研究.结果:肉苁蓉悬浮细胞培养经过三天的延滞期后进入对数生长期,21天后细胞生长进入稳定期,最大生物量和苯乙醇苷产量分别达到8.03g DW/L和97 mg/L.在对数生长期后期,即培养的第18天加入0.8 mL/瓶浓度的酵母诱导子,诱导三天的效果最好,苯乙醇苷的最高产量为237.7 mg/L,为对照的239%.结论:合适浓度的酵母诱导子不但能够有效提高肉苁蓉细胞悬浮培养液中的苯乙醇苷含量,同时对细胞生长也具有促进作用.     

白芷悬浮培养细胞外21KD钙调素结合蛋白的鉴定及纯化

利用生物素－ＣａＭ凝胶覆盖技术，在白芷悬浮培养细胞外检测一个分子量为２１ＫＤ的钙调素结合蛋白（ＣａＭｂｐ），并用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤柱，ＣＭ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ阳离子交换柱层析将其纯化。     

白芷细胞外CaM结合位点的扫描电镜定位研究

利用胶体金标记的具有生物活性的钙调素（Ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ,ＣａＭ）,对白芷愈伤组织培养细胞胞外钙调素结合位点进行了扫描电镜定位,发现白芷愈伤组织培养细胞表面有不同密度的金颗粒,证明其细胞表面存在着ＣａＭ结合位点．     

西洋参悬浮细胞培养条件的研究

通过试验论述了不同愈伤组织年龄和接种量对细胞悬浮培养的影响，从而得出最佳接种年龄及其最佳接种量；分析了培养方式和转达对细胞悬浮培养影响的原因，确定了有利于细胞生长的培养方式及转速；阐述了在美国ＶｉｒＴｉｓ公司生产的ＯＭＮＩ－ＣＵＬＴＵＲＥＢＥＮＣＨ－ＴＯＰ－２Ｌ发酵罐中，进行西洋参细胞发酵培养的结果。描述了西洋参细胞在发酵罐中的生长曲线、培养液中Ｄｏ变化曲线和培养过程中ｐＨ的变化曲线，为西洋参细胞发酵培养条件最佳化的研究提供了有关数据。     

高生物产量川芎细胞悬浮培养条件优化

在基本培养基为MS的基础上,研究激素浓度、接种量等因素对川芎悬浮细胞生长的影响,建立川芎细胞悬浮培养体系.实验结果表明:川芎悬浮细胞同步化继代培养液生长16 d左右,对数生长中后期时,按照1∶4(V/V)悬浮液,新鲜培养液,以MS+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 2 mg·L-1+30 g·L-1蔗糖培养基可获得较高产量的川芎悬浮细胞,湿重达到182.6 g·L-1,干重达到39.2 g·L-1.     

泛素连接酶Nedd4调控人前列腺癌细胞的增殖与凋亡

为了研究泛素连接酶Nedd4对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响,利用小RNA干扰技术,通过慢病毒包装,侵染前列腺癌细胞DU145,达到下调Nedd4表达的目的.MTT检测表明,下调Nedd4表达可以抑制DU145细胞的增殖;DAPI染色发现,下调Nedd4表达的DU145细胞对星形孢菌素诱导的细胞凋亡更加敏感.这些结果都说明,下调Nedd4的表达不仅可以抑制DU145肿瘤细胞增殖,而且可以促进细胞凋亡.     

动物体液中的胞外钙调素结合蛋白（快报）

利用以生物素标记钙调素为探针的凝胶覆盖技术检测动物体液中胞外钙调素结合蛋白（ＣａＭＢＰ）。结果，人的唾液中检测到至少３种分子量分别为１４ｋＤ，２４ｋＤ和５２ｋＤ的ＣａＭＢＰｓ。其中，５２ｋＤ蛋白与ＣａＭ的结合依赖于Ｃａ２＋的存在，而２４ｋＤ和１４ｋＤ蛋白则不依赖于Ｃａ２＋。在鸡血清里，检测到以９４ｋＤ，４４／４５ｋＤ蛋白为主的４～５种胞外ＣａＭＢＰｓ，所有的这些蛋白与ＣａＭ的结合都依赖于Ｃａ２－。此外，在牛奶中也检出胞外ＣａＭＢＰｓ。以上结果，证明了在动物中普遍存在胞外ＣａＭＢＰｓ，为胞外钙调素的作用机理提供了新线索。     

电导率法监测红豆杉细胞的生长

对红豆杉细胞在 2 5 0mL和 2L摇瓶及 1 0L反应器中的生长情况进行了研究 .应用电导率法监测红豆杉细胞的生长 ,得出在红豆杉细胞悬浮培养的细胞生物量与培养液电导率变化的相关性 .     

BDE-209对人正常肝L-02细胞生长和凋亡的影响

采用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)和Hoechst 33342/PI等, 分析十溴联苯醚(BDE-209)对人正常肝L-02细胞增殖和凋亡的影响。结果显示, 在不同浓度水平(0~70 μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后, 细胞增殖抑制率随着BDE-209浓度的升高而升高。经SPSS-Probit-Logit法计算, 得出 BDE-209对人正常肝L-02细胞24小时的IC₅₀为127.08 ±24.93 μg/mL。在不同浓度水平(0~15 μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后, 与对照组相比, 各剂量组细胞未出现明显的细胞形态变化, 仅在15 μg/mL剂量组观察到细胞减少的现象。凋亡染色后, 荧光显微镜检发现, 随着BDE-209浓度升高, 亮蓝、淡粉染色细胞数量增大, 人正常肝L-02细胞的凋亡率增高。与对照组相比, 各剂量组差异均具有统计学意义。分析结果表明, BDE-209可引起人正常肝L-02细胞增殖受到抑制, 并诱导细胞凋亡率增加。     

Ce4+诱导的花生悬浮细胞程序性死亡

应用超薄切片透射电镜观察和DNAladder检测技术,对添加不同浓度Ce4 胁迫诱导的花生悬浮细胞进行观测.结果表明,花生悬浮细胞经1 0mmol/LCe4 胁迫诱导培养7d,细胞凋亡率达57 6%;发生凋亡的细胞呈现典型的细胞程序性死亡特征:核仁消失,染色质凝缩、趋边化;线粒体嵴模糊不清,基质电子密度减少,出现大小不一的空泡,有的线粒体缢缩,或破裂,甚至解体;液泡有的破裂,有的相互融合,有的与内质网连接在一起;内质网槽库膨大,并出现自噬泡;DNA特异性降解,产生大小约200bp及其倍数的片断,电泳形成梯状条带.而对照组细胞核DNA完整,呈大片段,细胞器发达,细胞完整.证明Ce4 能诱导花生悬浮细胞发生程序性死亡.     

香荚兰细胞悬浮培养产生香兰素的研究

研究了香荚兰细胞悬浮培养的生长周期、可溶性糖浓度、ｐＨ值变化及植物生长调节剂对细胞生长与香兰素产生的影响．发现细胞悬浮培养生长周期以１４ｄ为宜，ＮＡＡ比２，４－Ｄ更适合细胞生长及香兰素形成．