截短侧耳素的HPLC测定

建立了HPLC法测定截短侧耳素的含量,采用Agilent Extend C8色谱柱,流动相为乙腈-甲醇-0.02 mol.L-1的磷酸二氢钾缓冲液(35∶10∶55,体积比),流速为1.00 mL.min-1,检测波长为205 nm。截短侧耳素质量浓度在40~2 400μg.mL-1范围内线性关系良好(r2=0.999 9),定量限为0.08μg,检测限为0.04μg。     

截短侧耳素产生菌原生质体的制备条件优化及再生

以截短侧耳素产生菌Clitopilus pinsitus为材料,通过单因素和正交实验,研究菌龄、酶系、酶浓度、酶解时间、温度及稳渗剂对C.pinsitus原生质体制备和再生的影响。实验结果表明,制备原生质体的最佳条件为:5d菌龄,0.4mol/L甘露醇稳渗剂,2.0%蜗牛酶和2.0%纤维素酶混合酶,25℃酶解1.5h,原生质体产量5.9×107个/m L,其再生率为1.2‰。实验为截短侧耳素高产菌株原生质体诱变育种奠定基础。     

纤维素酶产生菌的分离和鉴定

利用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，从齐市糖厂弃渣塘的土样中，分离到了一株纤维素分解能力很强的真菌（ＱＣＦ３），根据形态特征，可鉴定为绿色木霉。     

粘菌素发酵培养基及发酵条件的改进

对粘菌素发酵培养基进行了改进,采用A物 B物组合代替原配方中优质小麦胚芽粉,并用正交试验设计方法确定了最佳培养基配方。经60吨发酵罐连续15批验证,平均发酵效价由原配方的183546u/ml提高至203422u/ml,升幅达10.83%,原辅料消耗降低10%以上,产品质量全部合格。同时又通过对原发酵工艺条件的优化改进,发酵水平也稍有提高,并将此新的工艺应用到大生产中,也取得一定的经济效益。     

庆大霉素产生菌的紫外线诱变育种及发酵条件的研究

以庆大霉素产生菌ＪＹ１－１２为出发菌株，经紫外线照射，选育出性能优良菌株ＪＹ３－５，经正交试验确定了其最佳发酵培养基，研究了最佳发酵温及初始ＰＨ值，使其摇瓶效价提高３４．３％；３０ｍ＾３罐放大试验，比出发菌株效价提高１８．６％。     

红霉素产生菌的诱变及培养基优化研究

以红色糖多孢菌08L作为出发菌株进行诱变,选育高产菌株。结果表明,诱变得到的UL5菌株发酵水平比出发菌株提高12.6%。再通过培养基优化,其组成为淀粉3%,糊精3%,葡萄糖2%,黄豆饼粉3%,玉米浆1%,硫酸铵0.15%,碳酸钙0.6%,磷酸二氢钾0.02%的条件下,UL5菌株在诱变的基础上,发酵水平再提高15.2%。     

山葵墨入病拮抗菌的筛选鉴定及发酵条件的优化

从山葵种植土中分离筛选获得一株山葵墨入菌(Phoma wasabiae Yokogi)的强拮抗菌株B12.对其进行形态特征、培养特征、生理生化特征与16S rDNA 序列分析,初步将其鉴定为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis). 通过单因子实验和均匀设计研究发现该菌的最佳培养条件和摇瓶发酵配方为: 起始pH 7.0、30 ℃、180 r/mim、摇瓶培养3 d , 牛肉膏1.5%、蛋白胨0.9%、可溶性淀粉0.6%. 其抑菌率提高28.88%.     

侧耳菌产生木质纤维素酶及其降解植物生物质的研究

对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶能力强且产酶速度较快的侧耳 sp 2 (Pleurotussp 2 )进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析 .结果表明 ,该菌株在低氮高碳高无机盐培养基中的锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶、漆酶和半纤维素酶等 4种酶的活性最高 .其中 ,锰过氧化物酶的活性峰值出现时间仅为 6 d,比其他 3种酶活性峰值期早 6 d. Pleurotus sp 2是目前已知的在液体培养条件下产锰过氧化物酶较高的菌株之一 .当该菌株培养在含有低氮无碳高无机盐液体培养基的麦草粉中时 ,锰过氧化物酶和漆酶的活性峰值均出现在第 10天 ,而半纤维素酶的活性在 4 0 d时达到峰值 .此外 ,该菌株使麦草生物质失重可达 17.6 % ,可望能成为生物制浆中原料预处理的候选菌株     

野生侧耳分子鉴定及生物栽培转化技术的研究

野生菌栽培具有重要的经济价值。本文报道了分离培养野生侧耳属菌株PO1,并进行生物栽培转化的实验结果。以真菌试剂盒提取的PO1基因组DNA为模板,PCR扩增获得了大小为636 bp的ITS序列（GenBank No.MT261808.1）。运用ClustalX和MEGA软件的NJ法构建了侧耳属代表种的系统发育树,结果显示,PO1与NCBI中其他54株侧耳菌株亲缘关系较为密切,相似性达99.04%以上。明确野生侧耳为糙皮侧耳菌株分类后,总结出一套侧耳室内生物栽培转化技术与管理体系,栽培转化的糙皮侧耳PO2头潮菇和二潮菇产量高、口感好,经济效益佳,转化率高达158%,达到实验室侧耳高产栽培的目的,为大棚栽培管理技术提供了重要参考依据。     

丝状真菌发酵产油脂培养基及发酵条件的优化研究

实验以丝状真菌为出发菌株,采用玉米水解液为培养基质进行深层发酵培养,探索了不同糖度、氮源、温度、pH值和发酵时间等参数对丝状真菌产油脂的影响。实验确定最佳工艺参数为：玉米水解液13°Bx,2．4％NaNO3为氮源,3％玉米浆,pH值为5．5,26℃下发酵培养61h,油脂得率13．69％,菌体生物量19．45g／L。微生物油脂中主要含有16碳和18碳系脂肪酸,利用气相色谱法分析微生物油脂的脂肪酸组成如下：棕榈酸（17．16％）,棕榈油酸（1．63％）,硬脂酸（1．87％）,油酸（58．37％）,γ-亚麻酸（12．44％）,α-亚麻酸（6．22％）。     

赖氨酸发酵的培养基成分改进

盐酸豆饼水解液是造成赖氨酸发酵重现性不好的主要原因之一。试图用相对廉价稳定的蛋白胨作为氮源,替换盐酸豆饼水解液。通过对蛋白胨用量的考察,确定了去掉盐酸豆饼水解液后,种子培养基中加入1%的蛋白胨,发酵培养基中加入0.7%的蛋白胨,赖氨酸发酵单位比对照增加7%以上,从而保证学生实验结果的重现和稳定。     

两性霉素B生产菌培养基成分及发酵条件

 两性霉素B是多烯类广谱抗真菌抗生素,已广泛应用于深部真菌感染。以结节链霉菌Streptomyces nodosus ZJB15076为出发菌种,对其发酵生产两性霉素B的培养基成分进行了优化,确定了较优的碳源和氮源及最适浓度：质量分数为葡萄糖4.5%、牛肉膏4%;在此基础上继续进行发酵条件的研究,确定了较优的发酵条件：发酵初始pH值为7.0,培养温度为28℃,装液量为40 mL/250 mL,接种量（体积分数）为2%。分析了在摇瓶内添加玻璃珠对两性霉素B产量的影响,研究结果表明,添加玻璃珠后能显著改善菌丝聚集情况并显著提高两性霉素B的产量,产量与对照组相比提高了341.1%,达到4563.2 mg/L。     

微生物批式流加发酵动力系统及参数辨识

微生物批式流加发酵生产1,3-丙二醇是一种重要的生产方式,但是目前研究只考虑了细胞外5种物质浓度的变化,没有考虑代谢机理、细胞内物质浓度的变化及重要的中间产物。本文将细胞内甘油、3-羟基丙醛和1,3-丙二醇三种物质的浓度变化考虑在内,假设甘油跨膜运输情形为主动运输和被动扩散,1,3-丙二醇的跨膜运输情形为主动运输和被动扩散,建立了微生物批式流加发酵动力系统。以实验值与计算值的误差平方和作为性能指标建立参数辨识模型,并用改进的粒子群算法求解模型中参数。结果表明,改进后模型平均相对误差比现有文献略有降低,说明了模型的有效性。     

一株产漆酶真菌的筛选、鉴定及发酵研究

采用愈创木酚显色法筛得一株产漆酶周期较短的丝状真菌．通过形态学观察和分子生物学序列分析,鉴定其为棘孢木霉(Trichodermaasperellum),并对所获菌株进行了发酵条件优化．通过单因素试验和正交试验获得该菌的最佳发酵条件为：蔗糖25 g/L、麸皮汁80 g/L、酒石酸铵10 g/L 和豆粕18 g/L,KH2 PO42, MgSO4?7H2 O 0．6,CaCl2?2H2 O 0．8,Cu2＋0．25(1 mM),pH 5．5~6．5,其漆酶最高酶活水平为571．32 U/L．     

葡聚糖酶高产菌株的分离鉴定及其培养基优化的研究

进行高产分解葡聚糖酶的优良菌株的分离、鉴定及其培养基的优化.经过对土壤样品的分离、诱变筛选和一系列的形态、生理生化试验后,获得一株葡聚糖酶活力为97μ/ml的菌株并鉴定为枯草芽孢杆菌属.其在摇瓶发酵的优化培养基为葡萄糖4%,磷酸氢二铵0.03%,磷酸二氢钾0.15%,硫酸镁0.1%,其它适量无机离子及生长因子.     

一类非线性动态系统的参数辨识和状态估计

为了对青霉素发酵过程采用计算机控制，提出了一种适合于一类非线性动态系统参 数辨识的方法。同时，根据在线获取的可测信息（二氧化碳释放率），利用随机状态估 计原理，实时估计了青霉素发酵过程中不可测的状态变量（菌体浓度、基质浓度、产 物浓度）。对实验室和生产现场提供的几批数据进行了计算机仿真，结果表明：文中所 提供的技术方案对青霉素生产过程实现状态监控是可行的。     

茶渣发酵菌株的筛选、鉴定及生物学分析

提取茶多酚后的废茶渣中富含茶蛋白和茶纤维,研究通过室内高温固态发酵废茶渣,旨在从中筛选废茶渣发酵微生物,并进行鉴定和相关生物学分析。结果表明,研究共筛选到废茶渣发酵微生物4株,C-1,C-2, C-3,C-4,经DNA提取,ITS扩增测序,NCBI数据库比对,4株菌株分别属于米曲霉,烟曲霉,镰刀菌,毛霉菌。生长曲线实验表明：毛霉菌在含有茶渣滤液的PDA平板上生长最快。     

纳豆菌I液体发酵生产纳豆激酶最佳培养基的筛选

利用纳豆菌I液体发酵生产纳豆激酶。对影响生产纳豆激酶的培养基的成分——碳源、氮源、碳氮比以及4种盐浓度进行了筛选。结果表明:当蔗糖3%,蛋白胨2%,KH2PO40.1%,K2HPO40.25%,MgSO40.05%,CaCl20.01%时纳豆菌I产酶效果最佳。     

吡咯喹啉醌生产菌的发酵条件优化

对一株产吡咯喹啉醌(PQQ)假单胞杆菌Pseudomonas 0813的发酵条件进行了优化,通过单因素试验确定碳源、氮源及无机盐成分,之后用正交试验法优化各成分配比,考察了发酵温度、初始pH值和转速对该菌产PQQ的影响。结果表明,最优的培养基配方为：酵母粉5g/mL、蛋白胨1g/mL、KH₂PO₄ 0.5g/mL;最适的发酵条件为：发酵温度30℃、初始pH 6.5、发酵转速150r/min。在此条件下,Pseudomonas0813菌株在250mL体系摇瓶发酵中的PQQ产量为448mg/L,在1.5L体系发酵罐扩大培养后的最高产量可达 695.mg/L,这是目前报道未经优化或基因改造菌株的较高产量。