包囊游仆虫休眠细胞中大核和线粒体DNA的多态性

为了探索纤毛虫休眠细胞中两套遗传系统的作用特征,对包囊游仆虫（Euplotes encysticus）休眠细胞与营养细胞大核DNA和线粒体DNA进行了RAPD比较.结果显示,在所选用的35条随机引物中,包囊游仆虫大核DNA共扩增出220条片段,其中以休眠细胞大核DNA为模板扩增出18条特有片段,以营养细胞大核DNA为模板扩增出44条特有片段,两者存在28%的差异.在所选用的32条随机引物中,线粒体DNA共扩增出154条片段,其中以休眠细胞线粒体DNA为模板扩增出19条特有片段,以营养细胞线粒体DNA为模板扩增出25条特有片段,两者有29%的差异.这些结果表明,包囊游仆虫休眠细胞与营养细胞的大核DNA结构存着一定的差异;两者的线粒体DNA结构也存在差异.因此,包囊游仆虫在休眠细胞形成过程中,大核DNA、线粒体DNA结构可能都发生了一定的变化,并且这些变化可能与休眠细胞形成过程中的形态结构和代谢活动等剧烈变化以及休眠状态下的生理生化变化密切相关.所得结果为揭示纤毛虫细胞结构的分化与细胞遗传物质的作用关系提供了基础资料.     

纤毛虫伪红色双轴虫营养细胞和休眠包囊的超微结构观察

应用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)对腹毛类纤毛虫伪红色双轴虫(Diaxonella pseudorubra)的营养期细胞和休眠包囊进行了超微结构观察.与营养期细胞相比,在包囊形成过程中,细胞皮层纤毛器中纤毛杆被全部吸收,但一部分基体和表膜下的微管保留下来,形成"尾柱虫类包囊".纤毛虫休眠细胞中也存在自噬泡消化现象,其中,自噬泡不仅将失去功能的线粒体等膜性细胞器进行消化,也将细胞内色素颗粒、黏液泡及共生菌等包裹在内,经历消化过程.结果表明,自噬泡消化是休眠细胞生命活动中渡过不良环境条件的基本过程,其消化对象不仅涉及细胞内胞器,还可能涉及细胞内共生体;线粒体、黏液泡、色素颗粒及共生菌等在细胞休眠生命活动中可能是细胞内物质利用和能量的主要来源.     

大尾柱虫粘液泡的超微结构观察

应用扫描电镜和透射电镜术观察到,腹毛目纤毛虫大尾柱虫(Urostyla grandis)含有粘液泡射出胞器.该细胞器呈长椭球形,外围一层略显平滑的膜,内含晶状物质,在营养期纤毛虫细胞质中大量分布.据粘液泡内晶状物质分布的不同密度,可将泡区分为头端、体部和尾端三部分.成熟的粘液泡以头端朝向表膜运动,前端膜与表膜融合,产生一缺口,泡向表膜外发射泡内物质,残留的空泡即与表膜融为一体.在纤毛虫休眠细胞中无粘液泡胞器.据结果认为,大尾柱虫粘液泡的发生可能与内质网有关;该细胞器除含有与其他较低等的纤毛虫粘液泡相似的晶状物质外,其泡的定位、形态不一样;粘液泡对纤毛虫细胞表膜的更新及促进表膜的更新和变化有相关作用,并且在纤毛虫营养细胞至形成包囊过程中粘液泡分泌物对包囊壁结构形成也可能具有物质贡献.     

包囊游仆虫营养细胞和休眠细胞的胞器酶细胞化学

为探索毛基体非吸收型休眠包囊的生命活动特征及其胞器的功能,本文应用电镜酶细胞化学方法检测了包囊游仆虫在不同生理状态下的胞器酶反应活性及其定位：（1）在营养细胞中的食物泡膜位置出现紧密排列的腺苷三磷酸酶反应颗粒,但在休眠细胞中酶反应颗粒则聚集在细胞表膜区;（2）营养期细胞中,酸性磷酸酶反应颗粒分布在处于不同消化时期的食物泡或自噬泡内,在休眠期细胞中酶反应颗粒定位在自噬泡周缘;（3）营养细胞的线粒体内膜有稀疏的琥珀酸脱氢酶反应颗粒,休眠细胞中在分散的线粒体内也有稀疏的酶反应颗粒,但反应活性比前者要弱得多.作者由所得结果推测,大部分情况下休眠细胞的酶反应活性较营养细胞的同种反应弱;不同类休眠细胞的生命活动中,其酶的功能和作用部位可能是不一样的;在休眠细胞中也发生着消化和营养利用的过程,也经历着线粒体的功能作用过程.     

包囊游仆虫无性生殖周期中细胞结构的研究

包囊游仆虫表膜含有质膜和表膜泡。表膜下纵纤维层中其腹面由单根微管纵向排列组成，背面由每三根微管形成“品”字形微管单元，背面银线网是一种真实的嗜银结构，它可能是表膜泡结构间隙中的沉积物；细胞皮层中非纤毛器细胞骨架主要包括束状、网状骨架系统以及其他一些微管束，纤毛器细胞骨架其基体间含有托架及其连接纤维，基体并向细胞质放射出纤维。另外，小根纤维由多根微管在一起组成，基体及有关微管纤维形成具有不同的连接方     

不同生理状态下原生动物草丛土毛虫大核DNA的多态性比较

对草丛土毛虫（Territricha stramenticola）营养细胞大核DNA和休眠包囊大核DNA进行了RAPD比较分析．在所选用的32条随机引物中,2条没有扩增带,其余30条引物一共扩增出134条片段,以营养细胞大核DNA为模板扩增出54条片段,以休眠包囊大核DNA为模板扩增出80条片段,两者有20条共享片段,共享度为30％．结果表明：草丛土毛虫在形成包囊的过程中,大核DNA的结构可能发生了较大的变化,这些变化可能与其在包囊形成过程中的形态结构和代谢活动的改变以及休眠状态下生理活动的改变密切相关．     

包囊游仆虫纤毛器微管在不同生理状态下的分化

应用FLUTAX染色及荧光显微术研究了包囊游仆虫的皮层微管胞器及其形成包囊和脱包囊过程中结构的分化：（1）细胞无性分裂过程中，棘毛基部的毛基体由紧密聚集状态逐渐分离、瓦解和消失；背纤毛基体逐渐膨大，基体内的周围微管散开成梅花形，之后在相应皮层区发生由颗粒组成的条带形原基.（2）细胞形成包囊时，口围带、波动膜和额腹横棘毛等微管胞器经历了部分去分化的过程，伴随着细胞体的凝缩，其纤毛器相互聚集，定位于球形体包囊细胞腹面；背纤毛按原有模式排列，位于包囊细胞背面.（3）脱包囊过程中，细胞吸水膨大，细胞体分化成变形虫状并显示一致的弱荧光，但未见微管胞器的荧光图像；细胞通过包囊壁背面小孔脱囊而出，恢复成为正常形态的纤毛虫；此后，在细胞脱包囊后残留的包囊壁背壁尚保存有部分背纤毛的痕迹.根据所得结果推测,形态发生中，纤毛器微管对新结构的形成可能有物质联系或物质贡献；脱包囊时，细胞成变形虫状，其微管结构可能发生了解聚和再分化的过程.     

纤毛虫阔口游仆虫(Euplotes eurystomus)微管类细胞骨架的超微结构

采用透射电镜术显示腹毛类纤毛虫阔口游仆虫(Euplotes eurystomus)的微管类细胞骨架包括纤毛器微管骨架和非纤毛器微管骨架.结果表明:细胞皮层纤毛器中除纤毛杆、纤毛基体微管外,其基体间连接纤维、基体托架、基体附属微管、纤毛器基部附属微管束以及围棘纤维篮等也是皮层纤毛器微管的重要组成部分,各种微管相互联系、聚...     

眼虫中存在类中间纤维骨架体系

用分级抽提和DGD包埋去包埋技术处理小眼虫(Euglena gracilis),获得了完整的、清晰的细胞纤维网架结构。电镜结果显示纤维的直径在12～14nm,有时呈束状结构,通常以短纤维网络形式存在。免疫印迹证明类中间纤维蛋白的主要成分是一种66kD蛋白。免疫荧光显示类中间纤维蛋白主要分布在各类细胞器的表面,以及细胞表皮的下层。     

红色伪角毛虫无性生殖中大核DNA合成的形态学(简报)

腹毛类纤毛虫(hypotrichciliates)是纤毛门原生动物中一个最为进化的类群.迄今的研究表明.这类纤毛虫细胞除具有腹、背的分化,细胞表面纤毛聚集成发达的口纤毛器和体纤毛器外。其另一个典型特征是,细胞内含有一个至多个致密型大核,细胞周期中大核DNA合成采用复制带(replicationband)的形式进行.在含一枚大核的纤毛虫细胞中,核的两端同时出现复制带,两条带相向移动至融合后消失,完成DNA复制;在含有两枚至多枚大核的绝大多数种类中,各在核的一端出现复制带,并分别向核的另一端移动,当两个至多个大核相互靠拢,带消失,表明DNA复制完成,然后大核融合成一部分.作为较罕见的例子,作者对红色伪角毛虫(Pseudokeronopsisrubra)的观察发现,虽然其具有腹毛类纤毛虫的基本形态,但大核在细胞分裂过程中的行为显著不同于上述的情况,详细了解其核器演化的特征,无疑对深入认识纤毛虫细胞核     

冠突伪尾柱虫休眠与营养细胞线粒体DNA的比较

为研究纤毛虫休眠状态下线粒体的行为特征及功能与纤毛虫形成包裹的关系，采用RAPD 技术对冠突伪尾柱虫休眠与营养细胞线粒体DNA进行了比较。结果表明，在选用的15条随机引物中，有5条引物的扩增产物完全相同，其余10条引物的扩增产物各有差异。15条引物共扩增出84条片段，其中共享片段为28条，共享度为66.7％。这说明休眠细胞线粒体DNA 与营养细胞线粒体在很大程度上是一致的，但仍存在一定差异，据此推测细胞在形成包囊的过程中，某些线粒体DNA结构可能发生了改变，这些改变可能与线粒体在包囊内的行为特征及功能有关。     

视黄酸对胃癌细胞NM—IF系统变化的影响

选择性抽提整装扫描与透射电镜观察显示,人胃腺癌ＭＧｃ８０－３细胞核骨架纤维和中间纤维数量较少、分布不均匀,核纤层为厚薄不一结构,与两类纤维联系不密切．经１０－６ｍｏｌ／ＬＲＡ处理后,细胞核骨架纤维和中间纤维数量增多、结构层次丰富,分布均匀并相互交织成规则网络,两类纤维通过薄层均一的核纤层发生密切联系,形成贯穿整个细胞核质区域的完整体系．表明经ＲＡ诱导处理后ＭＧｃ８０－３细胞的核骨架－中间纤维系统产生了与正常细胞相似的恢复性改变．这种变化是癌细胞恶性表型逆转的重要形态特征和功能表现．     

Redistribution of intermediate filaments during capping of lymphocyte surface molecules

Intermediate filaments (IF) constitute a major cytoplasmic filamentous network of higher eukaryotic cells that is distinct from actin and myosin microfilaments or microtubules. Although structurally similar, these filaments are formed by chemically and antigenically different proteins. Vimentin is the major IF polypeptide of mesenchymal cells and cultured non-mesenchymal cell lines. Recently, we have characterized a monoclonal IgM antibody from a patient with Waldenstr?m's macroglobulinaemia which is directed against vimentin. Using this monoclonal antibody, we have shown by direct immunofluorescence that intermediate filaments of human B and T lymphocytes consist of vimentin. In cells exposed to colcemid, the intermediate filaments retracted into a juxtanuclear aggregate ('coli') characteristic of vimentin filaments. As most components of the cytoskeleton, especially actin and myosin, have been implicated in the capping phenomenon, we investigated the effect of capping of either beta 2-microglobulin or membrane immunoglobulins on the organization of the intermediate filament network. We report that capping of these surface molecules induced the redistribution of vimentin just beneath the cap. When colcemid-treated cells were allowed to cap, the location of the cap always coincided with the coil, suggesting that the anchorage point of intermediate filaments is situated within the uropod.     

天然家蚕抗菌肽对人白细胞及巨噬细胞淋巴瘤细胞骨架系统作用的比较

报道了天然家蚕抗菌肽ＣＭ４对离体Ｕ９３７癌细胞骨架及核骨架损伤作用的扫描电镜观察。随着时间的延长，经天然家蚕抗菌肽ＣＭ４作用后的癌细胞骨架断裂，固缩成团状；癌细胞核骨架断裂，部分凝聚成团，结构不完整。相同剂量的天然家蚕抗菌肽ＣＭ４与正常人白细胞作用后细胞骨架及核骨架未见损伤现象。说明天然抗菌肽与重组抗菌肽的抗癌作用相同。     

刺楯纤虫Aspidisca aculeata的超微结构观察

本工作对刺楯纤虫的皮膜、口器、棘毛、背触毛以及细胞核作了超微结构水平的观察。结果表明，其皮膜银线系所在部位细胞外质呈电子致密的三角形，与周围外质有一定的间隙，此外的表膜呈小孔与外界相通；棘毛基部存在根纤维较短，伸入胞质深处；在纤毛器尤其是背触毛窝周围存在有膜囊，其在靠近细胞外质处常释放出内含的电子致密物质，可能对背触毛的支持起重要作用。此外，对口腔口围带（Ｂ－ＡＺＭ），棘毛和背触毛在无性分裂时的发生也作了观察和描述。     

杨树新梢萌发过程中贮藏蛋白质的动态变化

采用凝胶电泳技术(SDS-PAGE)对1年生杨树无性系797杨春季芽萌发阶段皮层、木质部和根系中的蛋白质含量及营养贮藏蛋白质组分进行了测定分析。结果表明:杨树体内(木质部、皮层、根部)蛋白质含量在芽萌发期间处于最低水平;木质部和皮层是杨树越冬期间贮藏蛋白质的主要场所;杨树新梢萌发期间贮藏蛋白质组分变化最明显的是36、32、181、6 kD等蛋白,其中36、32 kD蛋白在萌发前均可以清晰地辨认,叶子展开4周以后逐渐消失,而18、16 kD两种蛋白仅在发叶期间出现,之后完全消失,36、32 kD蛋白是杨树营养贮藏蛋白质的主要类型。     

Direct observation of dendritic actin filament networks nucleated by Arp2/3 complex and WASP/Scar proteins

Most nucleated cells crawl about by extending a pseudopod that is driven by the polymerization of actin filaments in the cytoplasm behind the leading edge of the plasma membrane. These actin filaments are linked into a network by Y-branches, with the pointed end of each filament attached to the side of another filament and the rapidly growing barbed end facing forward. Because Arp2/3 complex nucleates actin polymerization and links the pointed end to the side of another filament in vitro, a dendritic nucleation model has been proposed in which Arp2/3 complex initiates filaments from the sides of older filaments. Here we report, by using a light microscopy assay, many new features of the mechanism. Branching occurs during, rather than after, nucleation by Arp2/3 complex activated by the Wiskott-Aldrich syndrome protein (WASP) or Scar protein; capping protein and profilin act synergistically with Arp2/3 complex to favour branched nucleation; phosphate release from aged actin filaments favours dissociation of Arp2/3 complex from the pointed ends of filaments; and branches created by Arp2/3 complex are relatively rigid. These properties result in the automatic assembly of the branched actin network after activation by proteins of the WASP/Scar family and favour the selective disassembly of proximal regions of the network.     

2种弧菌鞭毛蛋白的分离纯化与鉴定

尝试分离提取2种弧菌的鞭毛蛋白,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳对所提蛋白进行分离纯化,Western免疫印迹检测,电镜鉴定。结果显示：实验已经成功分离提纯了哈维氏弧菌的鞭毛蛋白,获得了溶藻弧菌鞭毛蛋白的初提液。提纯的哈维氏弧菌鞭毛蛋白经SDS-PAGE显示3条清晰蛋白带（相对分子量分别为39.7,41.9和42.7KDa）,透射电镜观察表明该蛋白呈经典的丝状,可以认为哈维氏弧菌的鞭毛丝是由相对分子量分别为39.7,41.9和42.7KDa的3种鞭毛蛋白亚基构成。溶藻弧菌鞭毛蛋白的初提液经SDS-PAGE后显示5-9条蛋白带,其中36.8KDa的蛋白带有强的免疫原性。     

点状制图综合在铁路电子地图中的应用研究

铁路电子地图是铁路信息化的重要组成部分,可为铁路的应急指挥、运营管理、设备维护提供地理信息,能够提高铁路各系统的科学决策水平。制图综合技术是实现铁路专题电子地图的主要技术手段。铁路地理要素以点状分布概括,分布呈现站场密集、沿线分散的特点;因此提出四种制图综合方法,以实现不同情况下的制图综合。铁路节点制图综合方法可通过对铁路节点的取舍,准确地反映铁路各地理要素的空间关系,形成科学合理的电子地图显示。经实验验证,所采用方法满足制图要求,有较好的实用价值。