地衣芽孢杆菌A.4041耐高温α-淀粉酶的纯化及性质

地衣芽孢杆菌A.4041（Bacillus，licheniformisA．4041）耐高温α-淀粉酶，经硫铁沉淀和垂直板制备凝胶电泳纯化，得到三种电泳均一的组分，α－Ⅰ，α－Ⅱ和α－Ⅲ．其相对质量分数分别为14.7％，32.2％和52.9％；等电点为5．2，5．4和5．5；相对分子质量为48000，55000和60000．酶作用于可溶性淀粉的米氏常数分别为4.5mg／mL，3．4mg／mL和2．6mg／mL．最适作用温度皆为90℃；最适pH为6.0～6.5；稳定pH范围皆为4～11．5在温度高于70℃，保温30min条件下，三组分的活力开始下降，但α－Ⅱ和α－Ⅲ在100℃，保温30min时仍分别保持15％和20％的残余活力，表明该酶的热稳定性良好．Ca2+，Mg2+，K+对酶明显激活；Cu2+，Fe3+，Zn2+，Al3+，EDTA、甲醛、戊二醛对酶强烈抑制．     

黄花倒水莲（Polygala fallax）多糖含量的测定

目的建立黄花倒水莲多糖含量的测定方法．方法以葡萄糖为对照品,采用葸酮-硫酸法在625nm处测定多糖含量．结果葡萄糖对照品溶液在O．02mg／mL-0．12mg／mL范围内呈良好曲线关系,线性回归方程为：A=11．8926C-0．1363,RL=O．9986,平均加样回收率为100．4％,RSD为1．69％．结论该方法操作方便、快速、重现性好,可用于黄花倒水莲多糖含量的测定．     

铁皮石斛原胚体液体悬浮培养条件

以铁皮石斛种子诱导的原胚体为材料，对液体悬浮培养条件下影响铁皮石斛原胚体增殖和多糖成份累积的因素进行了研究．结果表明，铁皮石斛原胚体在1／2MS＋1．0mg／LNAA，每20mL接种2g，蔗糖浓度3％或含10％香蕉提取物上清液的液体培养基中增殖最佳，可溶性多糖成分累积相对较高．     

抗菌肾蕨多糖的提取与分离

采用3种方法提取肾蕨多糖，其中综合法提取率为5．4％，可溶性多糖经DEAE-纤雏素52柱层析进一步纯化，得到1种中性糖和1种酸性糖，各占91．5％和8．5％．利用纸片法进行了抑菌实验，结果表明：肾蕨多糖显示了不同程度的抑制动植物病原菌的活性，对肠炎病病原菌、黑曲霉与稻瘟病病原菌的最低菌浓度为7．5mg／mL．     

青藏龙胆花中多糖含量的测定

用苯酚-硫酸比色法首次对龙胆花中多糖含量进行测定，测定波长490nm，多糖换算因素f=5．07。从0．002mg／ml-0．02ms／ml呈良好的线性关系，r=0．9998。回收率在97．4％-102．3％之间，精密度RSD％=1．16％。     

桑黄菌质多糖体外抑瘤及抗环磷酰胺致突变的作用

采用MTT法研究桑黄固态发酵菌质多糖（PISPS）对肝癌细胞（HepG-2）、乳腺癌细胞（MCF-7）生长的抑制作用，测定出多糖对细胞生长的最高抑制率为59．18％、55．39%，半数抑制浓度为196.9、162．5μg／mL，且随药物浓度的增加抑制率有增大的趋势，与正常组比较作用较为显著（P〈0．05）；选用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验，对多糖的抗环磷酰胺（CP）致突变作用进行评价，结果表明桑黄菌质多糖使环磷酰胺诱发的细胞微核率和精子畸形率明显降低（P〈0．01）．     

红曲多糖的过氧化氢法脱色工艺研究

为了优化红曲多糖的过氧化氢法脱色工艺,在单因素实验的基础上,选择过氧化氢加入量、脱色时间和脱色温度为自变量、多糖脱色率为响应值,应用DesignExpert软件,采用响应曲面法,研究了各自变量及其交互作用对多糖脱色率的影响．利用响应面分析方法拟合得到了二次多项式回归方程的预测模型,并确定了红曲多糖过氧化氢法脱色的最佳条件：4mL多糖（8mg／mL）溶液中3％过氧化氢溶液的加入量为3．9mL,脱色时间为127min,脱色温度为65．6℃．该条件下红曲多糖脱色率为86．24％．     

尖顶羊肚菌胞外多糖提取物延缓衰老作用的实验研究

检测了尖顶羊肚菌胞外多糖提取物对超氧阴离子、羟基自由基及ABTS自由基的抑制作用，评价体外抗氧化活性，用其灌胃衰老模型小鼠，观察其对小鼠大脑超氧化物歧化酶活性、脂褐素和丙二醛含量的影响。结果表明:2mg/mL 的尖顶羊肚菌胞外多糖提取物对超氧阴离子的抑制率为43.06%，1mg/mL的尖顶羊肚菌胞外多糖提取物对羟基自由基的抑制率为72.40%， 0.1mg/mL的尖顶羊肚菌胞外多糖提取物对ABTS自由基的抑制率为77.43%；50 mg/kg?d 的尖顶羊肚菌胞外多糖提取物能使雄性、雌性小鼠脑SOD活性分别提高20.70%、21.13%， LF含量分别降低35.14%、46.93%，MDA含量分别减少15.10%、15.61%。表明尖顶羊肚菌胞外多糖提取物具有良好的抗氧化和延缓衰老作用，对雌性小鼠延缓衰老效果略优于对雄性小鼠.延缓衰老作用，其延缓衰老的效果具有性别的差异，对雌性小鼠延缓衰老效果略优于对雄性小鼠.     

α—银环蛇毒素对中枢烟碱诱发小鼠惊厥效应的影响

１００μｇ／ｋｇα－银五蛇毒素（α－Ｂｕｎｇａｒｏｔｏｘｉｎ，α－ＢＧＴ）对大鼠脑 室内注射烟碱５０μｇ／ｋｇ引起的惊厥反应的抑制率为４０％，ｄ－筒箭毒ＥＤ５０为１２．７μｇ／ｋｇ，六烃季胺ＥＤ６５０为２２８．２μｇ／ｋｇ，在人工呼吸条件下，以烟碱引起的脑皮层是图去经为指标，１３０μｇ／ｋｇα－ＢＧＴ烟碱效应的抑制率可达６０％，烟碱引起脑皮层电图低频区域的变化受到α－ＢＧＴ的明显影响。     

壳聚糖固定化α-乙酰乳酸脱羧酶的研究

采用壳聚糖作为载体，戊二醛作交联剂制备固定化α-乙酰乳酸脱羧酶（ALDC），优化了固定化条件。实验结果：活力1380U／g，蛋白载量98．30mg／g，比活力14．04U／mg，活性回收率37，l％，固定化α-乙酰乳酸脱羧酶最适温度30℃，最适pH5．5。     

开口箭均一多糖 TCP-C1-1的结构分析及其生物活性

该文从开口箭根茎部位提取分离开口箭多糖TCP-C1-1，确定其结构并对其生物活性进行研究.实验采用水提醇沉法从开口箭根茎部分离提取多糖，通过Sevage法对80%醇沉部位TCP-C进行纯化，采用DEAE-52 纤维素离子交换树脂和葡聚糖凝胶Sephadex G-200 从TCP-C中进行分离纯化得到多糖TCP-C1-1，采用高效凝胶色谱，TLC薄层层析，红外光谱核磁共振氢谱碳谱等技术对多糖TCP-C1-1结构进行分析.结果分析，从开口箭中分离纯化得到 TCP-C1-1 多糖为果糖组成的均一多糖，连接方式其为β-(2→1)连接，相对分子质量为1.52×104.TCP-C1-1具有良好的生物活性，在浓度为2 mg·mL－1时，其自由基清除率可以达到63.3%.在浓度为6.5 mg·mL－1时，其对α-糖苷酶的抑制率可以达到78.6%.在浓度为1.5 μg·mL－1时，其可以明显促进小鼠单核巨噬细胞 RAW 264.7 的增殖(p＜0.05)，并能明显抑制LPS诱导小鼠单核巨噬细胞 RAW 264.7细胞释放出的 NO.TCP-C1-1为首次从开口箭中分离得到的天然来源的菊粉类果聚糖，为初步研究为开口箭多糖成分的开发提供了一定参考.     

基因工程血管抑素3A蛋白的分离纯化

在8mol／mL尿素溶液中,以二硫苏糖醇(DTT)为还原剂,对基因工程血管抑素3A包涵体进行溶解实验。结果发现：1．5h后溶解的上清液蛋白浓度达26．2mg／mL。SDS-PAGE电泳扫描结果显示,3A蛋白经过Sephadex G75分离后PAGE电泳纯达到100％,该步收率达85．82％,相对分子质量为10ku。采用分步稀释法对其进行复性,所获复性3A蛋白经MTT法检测表明：3A蛋白浓度为0．1μg／mL时,对内皮细胞的生长抑制率为93．4％。     

尖顶羊肚菌胞外多糖提取物抗氧化作用的研究

用尖顶羊肚菌胞外多糖提取物检测了对超氧阴离子、羟基自由基及ABTS自由基的抑制作用,用其灌胃衰老模型小鼠,观察其对小鼠大脑超氧化物歧化酶活性(SOD)、脂褐素(LF)和丙二醛(MDA)含量的影响.结果表明:2 mg/mL多糖提取物对超氧阴离子的抑制率为43.06%,1 mg/mL多糖提取物对羟基自由基的抑制率为72.4...     

几种枳壳乙醇提取物对酪氨酸酶抑制作用比较

研究了6种中药枳壳乙醇提取物对酪氨酸酶活力的影响．结果表明：6种中药枳壳乙醇提取物对酪氨酸酶活力均有显的抑制作用，除了绿衣枳壳外，其它5种中药枳壳的提取物随着含量的增大，酶活力呈指数下降．测定导致酶活力下降50％的6种中药枳壳提取物含量(JC50)分别为：0．92mg／mL(绿衣枳壳)、0．96mg／mL(陕西枳壳)、1．30mg／mL(红河橙枳壳)、0．44mg／mL(湖南枳壳)、0．41mg／mL(四川枳壳)、和0．70mg／mL(江西枳壳)，上述6种中药枳壳提取物对酪氨酸酶的抑制作用表现为可逆过程．抑制类型均为混合型，分别测定各种枳壳提取物对游离酶抑制抑制常数(K1)和酶-底物络合物抑制常数(Kis)，并加以比较。     

用化学发光法研究谷胱甘肽对羟自由基氧化鸟嘌呤的保护作用

利用鸟嘌呤-过氧化氢-钴（Ⅱ）化学发光体系，结合流动注射技术研究了生物活性物质谷胱甘肽（GSH）对羟自由基氧化鸟嘌呤的保护作用．实验结果表明，GSH明显抑制鸟嘌呤的化学发光，且抑制率与GSH浓度成量效关系，达到50％抑制率的GSH浓度为6．5mg／L．该方法为进一步研究DNA的抗氧化损伤机制提供了有效的研究手段．     

金线莲多糖对α-葡萄糖苷酶活性及糖尿病小鼠血糖的影响

研究了金线莲多糖体外抑制α-葡萄糖苷酶活性及其对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠血糖的影响.结果表明:金线莲多糖体外能抑制α-葡萄糖苷酶的活性,半抑制浓度值(IC50)为78.66μg/mL;对小鼠餐后血糖表现出较好的控制作用,血糖抑制率为(53.65±13.65)%;连续给予糖尿病小鼠金线莲多糖(300mg/kgbw)14d后,小鼠血糖值较模型组显著降低(P0.05).实验结果表明金线莲多糖具有显著的降血糖功效,其作用机制与影响糖代谢酶的活性,抑制糖异生有关.     

有益微生物在暗尾东方鲀纯养殖中应用的研究

研究结果表明噬菌蛭弧菌和光合细菌结合使用对暗尾东方鲀养殖环境具有明显的改善作用，并能有效提高暗尾东方鲀的成活率，对暗尾东方鲀也有一定的促生长作用。25d后实验组比对照组池塘中的细菌总数少2个数量级，70d后实验组比对照组池塘中的细菌总数少3个数量级；25d后对照组COD为6．45mg／L，使用噬菌蛭弧菌浓度为3、5、10mL／m^3及光合细菌皆为5mL／m^3，实验组的COD分别为4．66、4．46、4．38mg／L；25d后对照组NH3-N为0．53mg／L，使用噬菌蛭弧菌浓度为3、5、10mL／m^3及光合细菌皆为5mL／m^3，实验组的NH3-N分别为0．38、0.35、0．34mg／L；90d后对照组NH3-N为0．52mg／L，使用噬菌蛭弧菌浓度为3、5、10mL／m^3及光合细菌皆为5mL／m^3，实验组的NH3-N分别为0．25、0．23、0．22mg／L；25d后对照组硫化物为0．018mg／L，使用噬菌蛭弧菌浓度为3、5、10mL／m^3及光合细菌皆为5mL／m^3，实验组的NH3-N分别为0．014、0．012、0．010mg／L，90d后对照组硫化物为0．018mg／L，使用噬菌蛭弧菌浓度为3、5、10mL／m’及光合细菌皆为5mL／m’，实验组的硫化物分别为0．009、0．008、0．007mg／L。使用噬菌蛭弧菌浓度为3、5、10mL／m^3及光合细菌皆为5mL／m^3．实验组暗尾东方鲀的成活率分别比对照组提高3．3％、7．6％、7．4％：使用噬菌蛭弧菌浓度为3、5、10mL／m^3及光合细菌皆为5mL／m^3，实验组暗尾东方鲀分别比对照组平均净增长12、17、15g。     

唐古特大黄黄酮类化合物的纯化

实验以HZSl6树脂分离纯化R-M-B黄酮，工艺条件为：唐古特大黄（R-M-B）黄酮溶液上样浓度为1mg／mL左右时，树脂对R-M-B黄酮的吸附量较大，为2．33mg／mL，用体积分数为70％乙醇进行洗脱，解析率达95．1％，干操产物中黄酮纯度为85．3％，总黄酮回收率为75％，产物的收率为1．06％，     

短序落葵薯根多糖提取工艺及其生物活性

通过正交试验研究短序落葵薯根多糖水提过程中提取温度、提取时间和料液比对多糖得率的影响,采用苯酚-硫酸法对多糖进行含量测定,选出较为理想的提取条件,即加20倍水,在100℃下浸提4h,得率15.72%.短序落葵薯根多糖能有效清除活性氧,对·OH,O2-,DPPH·的半清除率IC50分别为2.89,1.99和1.89mg/mL;对脂质过氧化的半抑制率为0.038mg/mL;在还原力的测定中,1mg/mL多糖在700nm下吸光值为0.696 7.     

紫外分光光度法测定N,N-二乙基二叔丁基亚磷酰胺酯的含量

采用N，N-二乙基二叔丁基亚磷酰胺酯(DBPA)与HI的裂介反应，用紫外光谱法测定样品DBPA的含量。RSD为0．52％线性范围0-0．498mg／mL，回收率为98％～102％。