基于代谢组学技术研究泽泻对高脂血症大鼠防治的生物化学作用机制

利用代谢组学方法鉴定泽泻对高脂饲料诱导的高脂血症治疗的尿液生物标示物和阐明生物化学作用机制。超高压液相色谱和质谱联用测定对照组、高脂血症模型组及泽泻提取物治疗组尿液,采用偏最小二乘判别分析法研究对照组、高脂血症模型组及泽泻提取物治疗组之间的代谢物谱差异,鉴定了14个生物标示物,高脂血症模型组高脂饲料上调了大鼠尿液硬脂酸酰胺、油酸酰胺、3-甲基尿苷、十六烷酰胺、吲哚-3-甲酸和肌酐,同时下调了二十四碳六烯酸、3-氧-甲基多巴、吲哚-3-甲酸葡糖苷酸、多巴胺、尿酸、苯丙氨酸、左旋肉碱和甲基肌苷。泽泻提取物逆转了这些异常上调和下调的生物标示物。泽泻提取物改善了由高脂饲料造成的异常的脂肪酸代谢、氨基酸代谢和嘌呤代谢。代谢组学技术能够应用于高脂血症及其泽泻对其治疗的生物化学作用研究。     

代谢组学技术及其应用的研究进展

代谢组学是一种研究生物体内所有小分子代谢物的系统生物学方法,它利用气相色谱质谱联用（GC—MS）,液相色谱质谱联用（LC—MS）,核磁共振波谱（NMR）等先进的仪器分析技术来检测各种生物样品中代谢物组的信息并结合模式识别等分析计算方法对所得代谢组学数据进行处理,最后综合解析这些数据以用于评价药物疗效、检测药物毒性、诊断疾病、分析疾病状态。代谢组学自提出以来发展十分迅速,目前已在药学、毒理学、疾病研究和诊断等领域得到广泛应用。本文主要对代谢组学的概念,研究方法及其应用进行综述,最后就代谢组学的发展趋势作一讨论。     

基于UPLC-代谢组学技术研究泽泻结合有氧运动对高脂血症大鼠的改善作用

基于UPLC-代谢组学技术和预防性给样法研究泽泻提取物结合有氧运动对高脂血的改善作用。用高脂饲料喂饲大鼠4周,同时进行4周的泽泻提取物(AR)、有氧运动、AR结合有氧运动联合干预。第4周末处死大鼠,获得血清,采用UPLC方法测定大鼠血清,研究不同治疗组的治疗效果。测定血清TC,TG,HDL-C,LDL-C,SOD,GSH-Px,CAT和MDA的含量。代谢组学方法与生化指标的结果证明4周时间高脂血症模型成功制作,代谢组学结果显示不仅AR结合有氧运动组对高脂血症的有一定的治疗作用,而且二者联合的治疗效果优于单一AR组或有氧运动组。生化指标显示AR和有氧运动均可显著降低大鼠血清TC,TG和LDL-C含量;AR提取物结合有氧运动组大鼠血清SOD,GSH-Px,CAT显著升高,同时MDA的水平下降。AR提取物结合有氧运动可治疗高脂血症大鼠血脂异常。代谢组学可以作为判断药物或有氧运动改善疾病程度及效果的一个新方法。     

基于LC-TOF-MS与HILIC和RPLC联用的自发性高血压大鼠血浆代谢组学研究

目的 利用液质联用系统(LC-TOF-MS)对自发性高血压大鼠(SHR)实验组和京都种Wistar(WKY,Wistar Kyoto)大鼠对照组的血浆进行分析,利用代谢组学方法探寻SHR的特征性生物标志物及代谢途径。方法 收集SHR和WKY大鼠(各12只)的血浆样本,利用反相色谱(RPLC)和亲水相互作用色谱(HILIC)分离血浆中的内源性代谢物,利用偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)法进行数据分析。结果 在HILIC和RPLC模式下SHR实验组和WKY大鼠对照组之间观察到了良好的分离趋势。鉴定出了包括组氨酸、脯氨酸、尿酸、焦谷氨酸、乙酰肉碱、棕榈酰肉碱、二氢鞘氨醇、3-脱氢鞘氨醇等17个潜在的SHR生物标志物,主要受干扰的代谢途径是氨基酸代谢、肉碱穿梭系统和鞘脂代谢。结论 受到影响的生物标志物和代谢途径可为理解高血压的代谢机制提供依据。     

代谢足迹技术及在代谢组学中的应用

系统地介绍了一种用于分析生物细胞和组织特异性的新战略——代谢足迹技术以及它在酵母细胞和人体组织中代谢分析的应用．代谢足迹技术是利用直接注射质谱方法,在分析系统中以培养基为介质,监控细胞从生长培养基中消耗营养物以及分泌代谢物至培养基的全部过程．也就是说。这是一种用高通量方法检测由细胞和组织分泌的代谢产物或从环境中吸收代谢物的定性和半定量的通用分析方法．     

北五味子与人参共煎剂对老年大鼠尿液代谢组学的影响

目的探讨北五味子与人参共煎剂对老年大鼠尿液代谢产物的影响.方法运用基于高分离快速液相色谱-四级杆-飞行时间质谱技术(RRLC-Q-TOF-MS)的尿液代谢组学方法研究24月龄大鼠在北五味子与人参共煎剂给药前后的尿液样本,通过主成分分析等方法对尿液中的代谢产物进行降维筛选,比较给药前后的差异代谢产物,并根据差异代谢产物的精确分子质量和在串联质谱中的离子碎裂特征进行鉴定.结果在北五味子与人参共煎剂干预后,老年大鼠的尿液中共鉴定了5个差异代谢物,经过对差异代谢产物相关的代谢通路进行分析,发现与能量代谢、脂类物质代谢和脑衰老相关的代谢产物发生变化.结论北五味子与人参共煎剂通过干扰能量代谢、脂类物质代谢和神经递质的途径而发挥抗疲劳、降脂、抗氧化和延缓脑衰老的作用.     

基于气质联用代谢组学技术的玉屏风散抗疲劳作用研究

玉屏风散为古代经典名方,临床用于小儿慢性咳嗽、慢性肾炎等治疗,具抗炎、抗氧化活性、抗疲劳作用。应用气相色谱-质谱联用(gas chromatography-mass spectrometer, GC-MS)代谢组学方法考察玉屏风散对小鼠负重力竭游泳模型的抗疲劳作用及机制解释。将小鼠随机分为5组(正常组、模型组、玉屏风散低、中、高3个剂量实验组),每组6只。连续灌胃14 d,采用GC-MS技术分析各组小鼠血清中代谢物,进行多元统计分析获取差异性代谢物信息,构建代谢通路对抗疲劳作用进行解释。结果表明：玉屏风散高剂量组的小鼠负重力竭游泳时间显著长于模型组;给药组小鼠代谢轮廓趋近于正常组,表现一定抗疲劳作用。确定了血清中18种差异代谢物与负重力竭游泳模型有关,涉及的3条主要代谢通路为：亚油酸代谢,甘油代谢以及磷酸肌醇代谢。推测玉屏风散可能通过调节脂质代谢对负重力竭游泳模型小鼠发挥抗疲劳作用。     

乳腺癌患者血浆和尿液的1H-NMR代谢组学

 为探讨乳腺癌患者血浆、尿液代谢组学变化,建立早期诊断的代谢标志物体系。选取乳腺癌患者45例,健康对照30例,获得血浆1H-NMR谱图,对所得自由衰减信号进行分段积分、数据归一化后用正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）进行模式识别。与健康人群相比,乳腺癌患者血浆中多种氨基酸含量下降,包括亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、丙氨酸、组氨酸、甘氨酸、脂类（LDL）、β-葡萄糖、乳酸、胆碱、肉碱、肌醇显著减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;血浆糖蛋白、丙二酸、乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮显著增多,差异具有统计学意义（P<0.05）。与健康人相比,乳腺癌患者尿液中异亮氨酸、缬氨酸、谷氨酸、组氨酸、二甲胺、马尿酸、甜菜碱、牛磺酸、琥珀酸、柠檬酸、肌酸、肌酸酐减少,差异具有统计学意义（P<0.05）;乳酸增多,差异具有统计学意义（P<0.05）。通过乳腺癌患者的代谢组学的变化,建立可以用于乳腺癌早期诊断的血浆、尿液代谢标志物体系。     

基于液质联用技术对早期高脂血症金黄地鼠肝脏鞘脂的靶向代谢组学研究

目的 对高脂血症金黄地鼠肝匀浆中鞘脂进行相对定量的靶向代谢组学研究.方法 18只SPF级叙利亚金黄地鼠随机分为正常对照组和高脂血症模型组,饲喂6周后进行血液生化检测,取肝脏进行HE染色,观察两组动物血液生化指标和组织病理学变化.基于液质联用技术,采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘法分析(PLS-DA)进行模式识别,对...     

青钱柳叶片总黄酮含量测定及代谢组学分析

以福建安溪桃舟4—11月青钱柳中叶为研究对象,分析不同月份总黄酮含量变化,探索以总黄酮为指标的最佳青钱柳叶片采收月份.结果表明,青钱柳叶片中总黄酮含量较高的月份是4、7、10月,最低的月份是5月,因此以总黄酮为指标的采收月份应以4、7、10月为最佳.通过超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测10月青钱柳老叶、中叶和嫩叶的黄酮类代谢物,结果表明,不同生长阶段叶片的代谢物存在差异,老叶中差异代谢物数量最多,多集中于山奈酚及其糖苷类物质.     

半夏厚朴汤抗抑郁的代谢组学研究

采用高相液相色谱-质谱联用技术和偏最小二乘分析(PLS-DA)方法,观察给予半夏厚朴汤水煎剂后大鼠尿样代谢物组的变化;并对抗抑郁机制进行初步解释。实验研究过程中,给药组灌胃给予半夏厚朴汤水提物,借助高效液相-质谱联用仪(LC-MS)检测尿样,收集数据后,采用PLS-DA方法对大鼠尿样内源性小分子代谢产物进行检测和分类处理。结果:三组大鼠代谢特征有显著差异。根据PLS-DA分析的载荷图和VIP值,进一步筛选对数据分类存在较大影响的离子,鉴别得到12个代谢标记物。结果是相对于模型组的参与能量代谢的柠檬酸,乳酸,2-酮戊二酸含量减少以及马尿酸,肌酐酸水平升高,给药组在一定程度上可以逆转这种异常改变。结合大鼠体重和行为学结果,表明半夏厚朴汤具有抗抑郁样作用。     

高尿酸血症大鼠模型血清代谢组学研究

 通过检测高尿酸血症大鼠血清代谢谱的变化, 探讨代谢组学在高尿酸血症研究中的应用。将20 只清洁级健康SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为高尿酸血症模型组(10 只)和空白对照组(10 只), 每日采用酵母膏(YEP)21 g·kg^-1·d^-1给予喂养, 氧氢酸钾(OA)以200 mg-1·kg^-1·d^-1腹腔注射1 次, 建立高尿酸血症大鼠模型。第28 日收集空白对照组和模型组大鼠血清, 进行¹H-NMR 谱测定和主成分分析。与空白对照组大鼠相比, 模型组大鼠血清中糖蛋白、丙酮酸、丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸显著增加, 而甲酸浓度及极低密度脂蛋白、不饱和脂肪酸、丙酮显著降低。由此得出, 高尿酸血症大鼠血清代谢组学发生明显变化, 血浆代谢组学在一定程度上反映高尿酸血症大鼠的病理生理变化。     

川西獐牙菜醇提物对高脂血症模型小鼠的降血脂作用研究

目的：研究川西獐牙菜醇提物对小鼠高脂血症的影响.方法：将60只雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、高、中、低剂量组,采用脂乳剂及饲料灌胃造模,连续喂养29天,分别测定小鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）含量.结果：喂养29天后,阳性对照组、高、中、低剂量组对高脂模型血清的影响,表现为在TC水平上,分别极显著（P〈0.01）降低了约37%、51%、50%和70%,在TG水平上,分别极显著（P〈0.01）降低了约36%、50%、24%和12%,在HDL水平上,分别提高了约19%、5%、12%和14%,在LDL水平上,分别极显著（P〈0.01）降低了约36%、12%、18%和33%.结论：川西獐牙菜醇提物对小鼠高脂血症有明显的降血脂作用.     

杏仁油对实验性高血脂大鼠抗氧化作用的研究

探讨了野生山杏杏仁油对高血脂大鼠肝、心、肾组织抗氧化活性的作用.杏仁油用超临界法提取,经进一步分离纯化后,喂灌高血脂大鼠1个月,分别测定心、肝、肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果表明,杏仁油可不同程度提高高血脂大鼠肝、心、肾SOD的活性(P<0.05或P<0.01),降低由高血脂引起的组织MDA含量增高效应(P<0.05或P<0.01),说明野山杏杏仁油对高血脂大鼠的肝、心、肾具有抗氧化保护作用.     

盾构掘进法开挖隧道对地表沉降影响的预估

盾构掘进法开挖隧道引起的地表沉降对地面建筑物影响在地下工程施工中越来越受到人们的关注,而这个问题的关键是要对地表沉降进行预估.总结了国内外对盾构掘进法开挖隧道引起地表沉降进行预估的常用计算方法,如Peck横向沉降槽经验公式及修正公式、数值分析法、模型试验法和智能决策理论方法.最后就目前国内外盾构掘进法施工隧道对地表沉降影响研究中存在的问题进行了探讨,并提出了一些实质性的建议.     

大孔吸附树脂分离纯化大黄蒽醌类物质

考察了大黄蒽醌在5种大孔树脂上的静态吸附过程,筛选出效果最佳的树脂(AB-8).研究了大黄蒽醌在AB-8树脂上的动态吸附特性,并确定分离大黄蒽醌的适宜工艺条件.结果表明:AB-8树脂对大黄蒽醌的静态吸附平衡时间为4 h;20℃时吸附过程可用Langmuir吸附等温方程来描述,吸附溶液的适宜pH值为6.0.确定树脂柱的较佳操作条件为:流速1.0 mL.min-1,大黄蒽醌浓度0.001 3 mg.mL-1.     

都可喜治疗血管性痴呆疗效观察

目的 探讨都可喜治疗血管性痴呆的治疗效果.方法 采用简易精神状态检查(MMSE)量表对32例治疗组及30例对照组进行检验研究.结果 治疗组总有效率为87.51%;对照组总有效率为73.33%.治疗组MMSE量表治疗前治疗后积分差优于对照组(P＜0.01).结论 都可喜治疗血管性痴呆安全有效.     

都可喜治疗血管性痴呆疗效观察

目的 探讨都可喜治疗血管性痴呆的治疗效果.方法 采用简易精神状态检查(MMSE)量表对32例治疗组及30例对照组进行检验研究.结果 治疗组总有效率为87.51%;对照组总有效率为73.33%.治疗组MMSE量表治疗前治疗后积分差优于对照组(P＜0.01).结论 都可喜治疗血管性痴呆安全有效.