共生小球藻对绿草履虫盐耐受性及同工酶的影响

为探索共生小球藻对宿主绿草履虫细胞生理和代谢过程的影响,比较了含共生藻绿草履虫（CCP）、无共生藻绿草履虫（CFP）和恢复型绿履草虫（RCCP）对NaCl 或Pb(NO₃)^₂的耐受性,分析了三者ATP酶同工酶等12种同工酶的活性和组分.其中CCP和RCCP氯化钠耐受性相似,且均不同于CFP;CFP与RCCP在硝酸铅耐受性及同工酶构成和酶活性上有较多相似性.RCCP的同工酶活性和组分的特征介于CCP与CFP两者之间.CCP中同工酶组分减少和酶活性降低的现象提示,绿草履虫-小球藻共生系统中,小球藻的共生作用可能会促使宿主酶系的退化.     

光培养和暗培养绿草履虫中同工酶的比较研究

作者应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析比较了光培养绿草履虫和暗培养绿草履虫中酯酶,酸性磷酸酶,苹果酸脱氢酶和乳酸脱氢酶四种同工酶的组分及含量的变化,除了对乳酸脱氢酶未出酶蛋白条带外,其它三种酶的电泳图谱都显示暗培养草履虫的同工酶级成条带多,含量高,作者由所得结果推测小球藻共生体可能改变了宿主细胞基因的表达。     

纳米氧化锌对绿草履虫的毒性效应研究

纳米氧化锌(ZnONPs)被广泛应用于医药材料等领域,但不适当的排放会给水生生态环境带来安全隐患.本研究用ZnO NPs对单细胞真核生物绿草履虫(Paramecium bursaria)的急性和慢性毒理进行测试,结合电镜技术、荧光技术以及酶活力测定、DHE荧光探针技术对ZnO NPs的致毒机制进行探索.结果显示ZnO ...     

乙酰甲胺磷对尾草履虫和绿草履虫的急性毒性作用

以两种草履虫作为受试生物,比较研究了乙酰甲胺磷胁迫下的急性毒性作用.随着药物浓度增高,乙酰甲胺磷对两种草履虫的毒性增大,且呈明显的剂量效应关系;试验测定尾草履虫和绿草履虫1 h和12 h半致死浓度LC50分别为:11.972,3.191 1,10.928和2.901 1 mg/L,其中LC50 95%的可信限分别为:10.894～13.113 mg/L,2.895 7～3.512 1 mg/L,9.905 5～13.113 mg/L 和2.646 5～3.163 9 mg/L.回归分析了死亡概率单位与浓度对数之间存在着线性关系.草履虫可以成为乙酰甲胺磷敏感的毒性评价生物,绿草履虫作为环境污染的安全评价生物其敏感度更高.     

甲醛气体对草履虫的毒害作用

针对甲醛气体浓度相对高的特殊环境，以草履虫为实验材料，利用草履虫体表纤毛与人呼吸道纤毛结构相同的特点，给草履虫以三种不同浓度甲醛的刺激，观察草履虫的反映．试图以此说明甲醛气体对人体呼吸道的毒害作用有不容忽视的结果．     

小球藻—芽孢杆菌共生体系处理污水的研究

为提高微藻处理污水的效率,将具有污水处理能力的小球藻,与从垃圾渗滤液中分离的两株芽孢杆菌SL1和SL2,分别构建小球藻-芽孢杆菌的藻菌共生体系:小球藻-芽孢杆菌SL1和小球藻-芽孢杆菌SL2,并将其应用于垃圾渗滤液配制污水的处理.结果显示,小球藻能够适应于所配制的高营养盐污水;芽孢杆菌SL2可以促进小球藻生长;无菌的小...     

共生小球藻的分离培养和特性及其对宿主袋形草履虫生长的影响

本文作者从采自哈尔滨的袋形草履虫体内分离出共生小球藻进行人工培养,观察其在虫体内外的形态生长特性。同时作者将袋形草履虫共生体置于不同条件下培养,了解到虫体与小球藻之间的相互关系,以及这种虫藻共生关系在自然界生存适应的意义。     

舌蝇共生菌的种系发生及其与宿主在进化上的关系

分析了３个亚属８个种舌蝇的初级内共生菌的１６Ｓ ｒＤＮＡ序列，发现这些初级共生菌属于原细菌的γ－分支并组成其独特的谱系。从３个亚属５个种舌蝇中分离出来的次级共生菌的１６Ｓ ｒＤＮＡ序列几乎完全一致，这些来源不同的细菌是非常相似的，种系发生分析表明它们属于原细菌γ－分支的肠杆菌科，证明不同种舌蝇中的次级内共生菌是舌蝇在种系分化以后独立获得的共生关系。     

pH值对草履虫种群增长的影响

用群体累积培养法研究了pH值对草履虫(Paramecium caudatum)种群增长的影响。在酸性较强(pH为3.0和4. 0)的环境下草履虫均死亡。pH为4.0-10.0时草履虫均能正常生长。方差分析结果表明pH值对草履虫的密度和种群增长率均无显著影响(P>0.05)。草履虫对酸的耐受范围在5.0-7.0之间;而在弱碱性环境下,pH在8.0时草履虫的密度和种群增长率较大,并随着pH的增大而减小。     

Pb、Cu对草履虫的毒性作用

通过研究20℃培养条件下Cu、Pb单一元素对草履虫(Parameciumcaudatum)种群毒性影响,结果表明:Cu2+24h对草履虫的半致死浓度为0.0826mg/L,Pb2+24h对草履虫的半致死浓度为3.9907mg/L。说明Cu、Pb单一元素对草履虫都具有毒害作用,且Cu元素对草履虫的毒害作用大于Pb。     

293T细胞转染表达ARG1及其对砷代谢的影响

研究含有ARGI基因的真核表达载体PcDNA3.1-IE-ARG1转染真核细胞后,在细胞中的表达及对细胞砷代谢的影响。由脂质体介导将PcDNA3.1-IE-ARG1转染入293T中,用real-timePCR方法检测ARG1基因的表达,用原子吸收分光光度法测定24h砷染毒后细胞内砷含量及细胞排砷量。重组质粒成功转入293T细胞中且表达良好;与转染前细胞比较,转染重组质粒的细胞在不同浓度砷染毒下细胞内砷含量明显降低(P0.05),并且细胞的排砷量也高于转染前的;此外,转染表达ARGI基因的细胞在砷染毒48h后其内GSH及GST的含量高于转染前细胞。这些表明,ARG1基因在真核细胞中相对高表达后在砷代谢排出中发挥了一定的作用。     

单链莫奈林基因表达载体的构建及其分泌表达

根据甜蛋白莫奈林的氨基酸序列，选择酵母偏爱密码子，化学合成单链莫奈林(Single-Chain Monellin，SCM)基因片段，并拼接成全基因．基因的DNA序列分析表明，合成的单链莫奈林基因与设计的一致．该基因插入于毕赤氏酵母整合型质粒pPIC9K中置于AOXI启动子的控制下，并通过电转化技术将重组质粒pPIC9K／SCM导入Pichia pastoris，在含有G418的YEPD平板上筛选整合型的多拷贝的转化子．转化子在BMMY培养基中经甲醇诱导表达，用SDS-PAGE检测发酵液，表明SCM的分泌表达蛋白可达发酵液蛋白含量的90％．     

分子记忆对基因表达过程中的能量消耗影响

一方面,分子记忆广泛存在于基因表达过程中;另一方面,由热动力学的观点,基因表达过程必然消耗能量.这引起一个未探索的问题:分子记忆如何影响基因表达的能量消耗.由此,通过分析一个代表性的、带记忆的基因表达模型,结果发现:分子记忆越强,基因表达消耗越多能量;极小势和能量消耗之间存在反比例关系,这表明基因表达越稳定,需要消耗的能量越多.这些结果表明分子记忆是一个不可忽略的因素,它能有意义地影响基因表达过程中的能量消耗.     

小球藻Chlorella variabilis NC64A二酰甘油酰基转移酶基因的克隆表达与功能研究

为了揭示二酰甘油酰基转移酶(DGAT)在小球藻油脂合成过程中的作用, 对单细胞小球藻Chlorell avariabilis NC64A 的二酰甘油酰基转移酶进行原核克隆表达及功能初步研究。结果表明, 其编码序列为894bp, 编码 297 个氨基酸, 表达蛋白的表观分子量为 33 kDa, pI 9.48。保守结构域分析表明, 该蛋白属于Lysophospholipid acyltransferases (LPLATs)超家族, 具有二酰甘油酰基转移酶活性, 序列位点H68, L71, F76, R94, I97 和GAA (144?146)组成特定的酰基受体结合口袋, 能够结合酰基?酰基载体蛋白(ACP)或者酰基辅酶A上的酰基, 催化三酰甘油合成的最后一步。表达蛋白与SsPDAT 和AtPDAT 的序列相似性分别为32%和24%, 表明该蛋白可能具有磷脂酰甘油酰基转移酶(PDAT)活性, 能利用磷脂上的酰基合成三酰甘油。因此, 采用薄层层析方法以L-α-磷脂酰胆碱和 1,2-二油酰-sn-甘油为底物, 检测到其确实具有PDAT 活性, 表明限氮条件下NC64A 中DGAT 的PDAT 活性可能促进了膜脂降解耦合三酰甘油的合成。     

血管内皮抑素的基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

血管内皮抑素不仅能特异性地抑制血管内皮生长，而且对血管形成和肿瘤生长也具有强烈的抑制作用。利用PCR法从人胎肝cDNA文库中克隆了人血管内皮抑素的编码序列，构建了重组质粒pRSendo，并在E.coli中表达，SDS－PAGE表明其表达产物为包涵体，此外，还对血管内皮抑素做了初步的纯化。     

人甲状旁腺素的基因表达及活性的初步研究

从人甲状旁腺瘤组织中分离到ｍＲＮＡ,逆转成ｃＤＮＡ后,设计带有突变碱基的引物,通过聚合酶链式反应,扩增ｈＰＴＨ基因,使Ｎ端前５氨基酸的碱基富含腺嘌呤核苷（Ａ）．将该基因克隆到表达载体ＰＥＴＩＣ上,转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）表达,实验证实ｈＰＴＨ的表达量占菌体蛋白总量的１１％;细胞粗步处理产物经腺苷环化酶的生物鉴定实验证实,重组ｈＰＴＨ具有生物活性,粗产物５００倍稀释后,ｈＰＴＨ的放免活性为２０６．５ｎｇ／Ｌ,为对照的４１５倍     

山楂叶总黄酮防治鹌鹑动脉粥样硬化

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是心脑血管疾病患者致死、致残的重要原因,通常血脂升高,特别是胆固醇、低密度脂蛋白及甘油三酯水平升高是发生AS的物质基础。而且高胆固醇血症是造成AS的一个独立而重要的危险因素。山楂叶中所含的黄酮类成分,对心血管系统有明显的药理作用。但山楂叶总黄酮(HLF)对鹌鹑实验性动脉粥样硬化的影响却未见报道。本实验建立了鹌鹑AS模型,通过鹌鹑血脂代谢相关指标的测定与分析,研究了HLF对动物血脂和血管病变的影响。以期为研究由于高血脂引起的AS病变的防治提供实验依据。     

热激诱导表达Hd3a的水稻转基因研究

Hd3a(Heading date 3a)基因是光周期诱导水稻开花过程中的一个关键调控基因,它在短日条件下表达并促进水稻开花.通过根癌农杆菌介导的方法将热激诱导表达的Hd3a基因转化到水稻品种日本晴中.热激处理转基因植株后,检测结果表明,叶片中转基因Hd3a的表达水平比热激前显著提高,随后又下降到热激前的水平,说明转基因Hd3a在水稻中可以被热激诱导瞬间的表达.长日条件下热激转基因水稻可成功诱导其抽穗,而同样处理的野生型植株不能抽穗,表明Hd3a的瞬间表达可诱导水稻开花,且其开花的早晚与热激处理的强度有关.     

pEGFP-IFI16表达载体构建及其表达对Hep-2细胞增殖的影响

RT-PCR扩增的IFI16基因连接到pUCm-T载体并测序鉴定,经测序正确的IFI16基因再连接到pEGFP-C1载体构建pEGFP-IFI16重组质粒,重组质粒pEGFP-IFI16转染Hep-2细胞后用荧光显微镜及半定量RT-PCR分析其表达情况,并用流式细胞仪测定细胞生长曲线分析其表达对Hep-2细胞增殖的影响.结果显示pEGFP-IFI16重组质粒构建正确,转染Hep-2细胞后荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,半定量RT-PCR结果显示转染后Hep-2细胞IFI16基因条带亮度明显升高,细胞生长曲线测定结果显示转染后Hep-2细胞从第二天起其增殖速度变慢、至第三天时其增殖速度明显慢于对照细胞的增殖速度.说明成功构建了能在Hep-2细胞中表达EGFP-IFI16融合蛋白的pEGFP-IFI16重组质粒,pEGFP-IFI16重组质粒体表达能抑制Hep-2细胞的增殖.