细胞石蜡包埋切片技术的应用

目的:研究使用蛋清甘油作为支撑物的石蜡包埋制片技术用于基于细胞的形态学检测的可行性.方法:针对人胃癌BGC-823培养细胞、临床送检宫颈TCT检查细胞、胃癌标本残碎细胞液等细胞学材料,运用蛋清甘油作为支撑物进行石蜡包埋制片,进行HE染色及免疫细胞化学染色,并将染色效果与细胞爬片、细胞甩片及细胞涂片染色效果进行对照分析....     

一步法RT—PCR检测石蜡包埋滑膜肉瘤中SYT—SSX融合基因的表达

运用一步法RT－PCR技术检测14例石蜡包埋滑膜肉瘤组织中t(x;18）(p11.2;q11.2）染色体易位所致的融合基因SYT－SSXmRNA的表达,尤文氏肉瘤和恶性黑色素瘤各一例做对照。结果表明,14例滑膜肉瘤中12例有SYT－SSX融合基因的表达（85．7％）,尤文氏肉瘤和恶性黑色素瘤均有阴性。     

从石蜡包埋组织高效提取RNA的优化及Shh的RT-PCR检测

从石蜡包埋组织中提取高质量的RNA是对肿瘤实体组织进行分子生物学研究的重要方法之一．利用人的胃肠道肿瘤材料，通过蛋白酶K消化，经酚-氯仿、异戊醇抽提去蛋白及异丙醇沉淀，优化了1套从石蜡包埋组织中提取RNA的方法，提高了所提取RNA的质量和产量．所得RNA经电泳检测，并进行RT-PCR扩增Shh(sonic hedgehog)信号分子，结果良好．故认为此提取RNA的方法值得推广．     

从石蜡包埋的皮肤组织中提取核酸的两种脱蜡方法比较

探讨从石蜡组织中提取核酸的简便、实用方法,比较两种脱蜡方法对DNA质量的影响.取收集的20例包埋好的银屑病皮损组织,分别用二甲苯和TES溶液脱蜡、酚-氯仿提取,然后检测DNA的浓度及纯度,并用PCR扩增方法检测哪种脱蜡方法对提取DNA更有优势.结果表明,用TES溶液脱蜡提取DNA的D260/D280=1.6～1.8的比例为60%,而二甲苯脱蜡的比例为35%.从实用、快速和经济的角度综合考虑,TES溶液脱蜡、酚-氯仿提取是值得推荐的石蜡组织DNA提取方法.     

聚合酶链反应检测石蜡切片中金黄色葡萄球菌DNA的研究

目的　探讨聚合酶链反应技术 (PCR)在检测石蜡包埋组织中金黄色葡萄球菌DNA的应用及价值。方法　利用PCR技术 ,对 55例福尔马林固定、石蜡包埋小鼠组织中SA DNA进行了检测。结果　 55例石蜡包埋的小鼠组织中均检测到SA DNA ,这与临床病理诊断为金黄色葡萄球菌 (S .aureus)感染相一致。结论　PCR技术可用于检测石蜡包埋组织中的SA DNA片段 ,为鼠S .aureus感染的回顾性分析提供了有效手段     

胆囊癌组织中P21、P53、BCL—2癌基因蛋白的表达及PCNA半定量分析

采用免疫组织化学 Ａ Ｂ Ｃ 法,测定了４０ 例胆囊癌和８ 例胆囊腺瘤性息肉组织中 Ｐ２１ 、 Ｐ５３ 、 Ｂ Ｃ Ｌ－ ２ 癌基因蛋白的表达情况及增殖细胞核抗原的表达强度．结果显示： Ｐ２１ 、 Ｐ５３ 、 Ｂ Ｃ Ｌ－２ 蛋白阳性表达率在胆囊癌组织中分别为５２ ．５ ％ 、５２ ．５ ％ 和７０ ％ ．在胆囊腺瘤性息肉中分别为０ ％ 、０ ％ 和１００ ％ ．提示：检测 Ｐ２１ 、 Ｐ５３ 、 Ｂ Ｃ Ｌ－ ２ 蛋白表达情况对胆囊癌与胆囊腺瘤性息肉的鉴别诊断有一定意义; Ｐ２１ 、 Ｐ５３ 蛋白表达可能是胆囊癌预后不良的重要指标     

传染性非典型肺炎病毒核蛋白的表达与活性检测

用PCR方法，人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因，并构建原核表达载体．在大肠杆菌中进行表达．结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40％以上，主要以可溶形式存在．用SARS患者急性期血清进行蛋白印迹检测，表明可溶形式和包含体形式均有明显活性．包含体形式的重组蛋白经纯化后纯度可达90％以上，活性与纯化前相当，可作为SARS抗体诊断试剂盒的抗原原料．     

分化型甲状腺癌中Cyclin D1,Galectin-3和ki-67的表达及其与侵袭的关系

[目的]检测分化型甲状腺癌患者中Cyclin D1,Galectin-3和ki-67表达,探讨其在分化型甲状腺癌局部侵袭中的临床意义.[方法]收集40例侵袭性分化型甲状腺癌(侵袭组)、30例微小乳头状癌(非侵袭组)和20例结节性甲状腺肿(对照组)患者病例,利用免疫组化技术检测Cyclin D1,Galectin-3和ki-67在甲状腺病理切片中的表达.[结果]在侵袭组、非侵袭组和对照组中Cyclin D1表达的阳性率分别为:100%(40/40),53.3%(16/30)和15%(3/20):Galectin-3表达的阳性率分别为:37.5%(15/40),100%(30/30)和0%(0/20):在侵袭组中ki-67增殖指数大于1%病例占侵袭组总数的50%,在非侵袭组中ki-67增殖指数大于1%病例仅占非侵袭组总数的13.3%.同非侵袭组相比较,侵袭组的Cyclin D阳性率明显增高(P0.01),Galectin-3阳性率明显减低(P0.01),ki-67阳性率升高(P0.01),差异具有统计学意义.[结论]Cyclin D1,Galectin-3和ki-67在侵袭性和非侵袭性分化型甲状腺癌中的表达差异有统计学意义,Cyclin D1和ki-67高表达和Galectin-3低表达是分化型甲状腺癌局部侵袭的分子生物学特征之一.     

原核表达系统中硒代半胱氨酸表达效率的检测

将sel A,sel B和sel C基因分别构建到不同载体上,分别与GFP报告载体系统共表达,检测三者对于Sec表达效率的影响。结果显示sel C使Sec的表达效率提高了40%;而sel A和sel B使Sec的表达效率分别降低了39%和89%。由此得出sel C基因的表达促进了Sec的插入和翻译,而Sel B和Sel A对于Sec的表达具有抑制作用的结论。     

基于SOM的聚类算法在抑郁症药物药效检测中的应用

为了研究不同治疗抑郁症的药物(利血平、开郁安神胶囊)对抑郁症的治疗效果，用SOM和K-Means相结合的方法对用药后的抑郁症大鼠DNA的芯片样本进行聚类。结果表明，将K-Means用于收敛后的SOM网络，不仅较好地解决了SOM在训练样本后边界不清的问题，也将样本的训练结果映射在二维，有利于对聚类结果的呈现。此外，改进的...     

甲状腺癌的高频超声诊断

目的探讨高频超声对甲状腺癌的诊断价值。方法对经病理证实的28例甲状腺癌的超声图像特征进行回顾性分析。结果甲状腺癌多数具有边界不规则、不清晰，单发的实性低回声结节，内部微粒状钙化及血流高速高阻等特征性表现。结论高频超声诊断甲状腺癌敏感性高，其声像图较具特征。     

甲状腺乳头状癌134例临床研究

目的探讨甲状腺乳头状癌（PTC）的术式选择及p53基因表达对患者预后的影响．方法回顾分析134例PTC患者临床资料,根据危险因素、术前和术中病理结果将患者分为两组：低危组102例,行功能性根治术;高危组32例,行扩大根治术联合核素辅助治疗．对照术后标本的免疫组化结果,判断术前分组的可行性;结合术后随访情况进行生存分析．结果术后免疫组化结果：102例低危组中,p53基因的表达呈强阳性者14例（13．7％）;32例高危组中,强阳性者28例（87．5％）,两组比较具有统计学意义（P〈0．01）．随访5a,低危组出现转移者11例（10．7％）,高危组淋巴结转移4例（12．5％）,淋巴结转移率两组比较无统计学意义（P〉0．05）,但高危组有严重并发症出现,两组无死亡病例．结论甲状腺乳头状癌的术前分组对治疗方案的选择具有指导意义,p53基因表达与危险评估相一致,可作为判断PTC恶性程度的参考指标,具有重要临床参考价值．     

食管癌相关癌基因研究进展

食管癌的发生发展涉及多个癌基因改变,本文就近年来研究热点的myc基因、C-erbB-2基因、ras 基因、MTA1 、MDM2 、CyclinD基因在食管癌中发生的变化作了简要阐述,为食管癌的早期诊断、预后评估及基因诊治探索可行途径.     

猴副流感病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为对易感动物以及相关生物材料和生物制品进行猴副流感病毒(SV5)的快速病原检测,根据SV5病毒SH基因序列,设计了1对引物,建立了检测SV5的RT-PCR方法,通过优化确定了RT-PCR体系的最佳工作条件。核酸序列分析显示,所扩增片段与GenBank数据库中报道的SV5病毒株WR-21005序列同源性达到97%,证明该方法特异。敏感性分析显示,该方法可检测的最小RNA浓度为2.1 ng/μL,能检出的最小病毒滴度为3.98CCID50/0.1 mL。初步将该方法运用于猴、地鼠、常用传代细胞和猴源生物制品的检测,在所检测的样品中均未检出猴副流感病毒核酸序列。结果表明,所建立的RT-PCR方法可用于猴副流感病毒(SV5)的诊断和分子流行病学调查。     

结节性甲状腺肿与甲状腺癌的CT图像分析

目的:分析结节性甲状腺肿与甲状腺癌的CT图像特点,提高甲状腺结节诊断率。方法:回顾性分析30例结节性甲状腺肿和14例甲状腺癌的CT图像特点。结果:30例结节性甲状腺肿平扫表现为甲状腺肿大、边界清楚的低密度结节影,多发结节22例,单发结节8例,形态规则28例,不规则形2例,10例钙化,气管受压6例。14例甲状腺癌平扫形态为规则形6例,不规则形8例,边界不清12例,边界清2例,肿瘤侵犯周围器官组织10例,囊性变2例,细颗粒状钙化6例,颈部淋巴结转移6例。结论:CT扫描在诊断结节性甲状腺肿和甲状腺癌具有一定的价值。     

甲状腺乳头状癌中央区食道旁淋巴结清扫的临床意义

目的探讨中央区淋巴结清扫在甲状腺乳头状癌治疗中的临床意义.方法选取128例甲状腺乳头状癌行同侧中央区淋巴结清扫的患者作为观察对象,按照手术方式将其分为健康观察组(65例,行单侧或双侧甲状腺腺叶+峡部切除+中央区淋巴结清扫术)与对照组(63例,行单侧或双侧甲状腺腺叶+峡部切除术),随访2 a,对比两组患者的中央区食道旁淋巴结转移、外侧区淋巴结转移、复发及并发症情况.结果 1)随访期间,两组均未出现死亡病例;观察组随访期内发生中央区淋巴结转移5例,转移率为7.69%;颈侧区淋巴结转移3例,转移率为4.62%;对照组随访期内发生中央区淋巴结转移11例,转移率为17.46%;颈侧区淋巴结转移7例,转移率为11.11%;对照组明显高于观察组,两组比较具有统计学意义(P0.05).2)观察组术后并发症发生率为13.85%,对照组术后并发症发生率为15.38%,两组之间比较无统计学意义(P0.05).结论甲状腺乳头状癌的中央区淋巴结转移率较高,行中央区食道旁淋巴结清扫治疗术后复发率与并发症发生均较低,值得在临床中推广应用.     

选择性电极法用于筛选氟代反应中PTC

本文用选择性电极法，通过准确测定溶剂中的含氟量，考察了不同相转移催化剂存在下对氟化剂的增溶效果，并与部分氟代反应结果相对照，证明这种筛选方法不但切实可行，而且简便、快速、廉价。     

利用RT-PCR法对木槿病叶初步检测

本试验利用不同方法对木槿病叶进行总RNA提取效果比较 ,同时用RT PCR方法 ,用广谱性植物病毒TMV、CMV、PXV和PVY的外被蛋白基因设计的引物对染病木槿的花叶病和皱缩病检测 .结果显示 :磁珠式固态样本总RNA快速分离纯化的方法提取的RNA比较完整 ,而Sangon(上海生工 )Trizol法提取总RNA和BioDev(博大泰克 )高效Trizol试剂提取总RNA相比较较差 ;不同模板浓度对PCR反应产物的影响较大 ;探讨了四种病毒对木槿的感染情况 ,分析得知 ,木槿的花叶病和皱缩病可能不是由于其中的病毒引起的 .本文虽然没有证明了木槿是由何种病毒引起的 ,但是对木本植物病毒的检测工作翻开了新的一页 ,并且对我国更多的木本植物的病毒检测将有更重要的意义 .     

实时定量PCR技术检测前列腺癌微小转移的研究

通过利用TaqMan定量PCR检测前列腺增生和前列腺癌患者外周血中前列腺特异抗原(PSA)和前列腺特异膜抗原(PSMA)的表达量,建立了一种通过检测患者外周血单个核细胞中前列腺特异基因表达水平检测前列腺癌微小转移的方法.实验结果表明,PSA在转移癌、局限癌和增生患者组中与GAPDH的相对表达量分别为(2.63×10-3±3.4×10-4),(2.6×10-4±3.9×10-5)和(2.6×10-5±4.5×10-6),各组间有显著性差异(p＜0.001);PSMA在各组间的相对表达量分别为(6.4×10-3±9.3×10-3),(5.0×10-4±8.3×10-5),(2.4×10-5±7.2×10-6),各组间亦存在着显著性差异(p＜0.001).因此用定量PCR技术检测外周血中PSA和PSMA的表达水平,可区分前列腺转移癌、局限癌和增生患者,该方法可用于前列腺癌的早期诊断.