酶制剂在玉米秸秆双菌种固态发酵生产微生物油脂中的应用

以玉米秸秆为原料,利用纤维素酶和康宁木霉将玉米秸秆转化为可发酵糖,皮状丝孢酵母利用可发酵糖生产微生物油脂。采用正交试验,分别通过检测发酵物中还原糖含量和油脂产量,确定微生物油脂生产的最佳条件。研究结果表明：利用纤维素酶和康宁木霉处理玉米秸秆,在纤维素酶添加量为0.15％,康宁木霉接种量为10％,处理温度为26℃,处理时间为6 d的条件下,可获得还原糖含量为4.852 g/L的玉米秸秆降解物。利用皮状丝孢和酵母发酵玉米秸秆降解物生产微生物油脂,在皮状丝孢酵母接种量为9％,培养温度为26℃,培养时间为7 d的条件下,每100 g发酵产物中,可获得微生物油脂3.321 g。     

苹果渣发酵生产饲料蛋白的菌种选育

利用自制的半导体激光辐射器对果酒酵母(Cider utilis)、康宁木霉(Trichoderma reesi)两菌种进行诱变，选育出了适合苹果渣发酵生产饲料蛋白的更优突变株，并在此基础上研究两菌种的协同关系，获得了最佳接种混合比：4：1。通过对比实验的测定分析，选育菌种的发酵产物中粗蛋白和真蛋白的含量比原菌种提高了12．60％和17．69％，证实了选育方法的正确可行。     

玉米芯生产单细胞蛋白发酵工艺条件的优化

纤维素原料是全球产量极大而又没有得到充分利用的糖类资源，据估计全球年产超过１０００亿吨，占地球生物量的８０％．我国各种秸秆年总积量为７亿多吨，是未来化工和生物技术产业的物质基础．其中我国玉米芯量估计每年有１０００万吨［１］，由于直接利用半纤维素和木糖...     

微生物发酵果渣蛋白饲料研究 Ⅰ.菌种选育及理化性质测定

经土壤分离、纯化、筛选到2株耐高酸、高渗透压、高含水量生长环境、菌体蛋白含量40%以上的菌株,经鉴定为产朊假丝酵母(1号)、黑曲霉(2号)。通过混合发酵果渣结果表明,果渣中果胶、高酸高糖被转化,蛋白质含量大大提高。该菌株适合应用于大生产。     

里氏木霉和酵母菌混合发酵玉米秸杆的研究

对里氏木霉和酵母菌混合发酵秸杆提高其粗蛋白含量的发酵工艺进行了研究。结果表明其发酵最优工艺条件 :以尿素作为氮源 ,里氏木霉接种 2 4 h后接种假丝酵母 ,接种量比例为 1∶ 4 (酵母∶里氏木霉 ) ,于 p H3.0 ,30℃下培养 4 d。粗蛋白含量可达 30 .5 5 % ,粗纤维转化率可达 33.5 %。     

大豆蛋白废水生产单细胞蛋白的菌种选择及其培养条件

针对大豆蛋白生产废水的水质特性,选择了产朊假丝酵母(Candida utilis)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)、白地霉(Geotrichum candidum link)、解脂假丝酵母解脂变种(Candida lipolytica)和扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fiburiger)等5种工业生产酵母,作为以大豆蛋白废水生产单细胞蛋白(Single Cell Protein,SCP)的菌种,并通过摇瓶培养实验,对其培养生长条件进行了研究。结果表明,白地霉的最佳培养条件为C/N37(马铃薯-葡萄糖培养基),pH6.5,25℃,180r/min;产朊假丝酵母为C/N5(麦氏琼脂培养基),pH6,25℃,180r/min;热带假丝酵母为C/N37(马铃薯-葡萄糖培养基),pH5.5,25℃,210r/min;解脂假丝酵母为C/N37(马铃薯-葡萄糖培养基),pH5.5,25℃,180r/min;扣囊拟内孢霉为C/N37(马铃薯-葡萄糖培养基),pH6,25℃,180r/min。5种酵母菌基本都适合生长在含糖量较高,pH偏酸性,温度在25℃左右的环境当中,比较适合利用大豆蛋白废水生产SCP,为菌种的复配提供了依据,为实现利用大豆蛋白废水生产SCP奠定了基础。     

工业发酵废液生产单细胞蛋白的研究

从工业发酵生产柠檬酸，土霉素无毒有机废水中分别筛选出合适的酵母菌株Ｌｃ１，９，１１，Ｋｙ１１，利用这种无毒有机废水发酵生产单细胞蛋白，其中Ｋｙ１１产率可达１．１１％，粗蛋白含量可达４６．５％，不仅可获得单细胞蛋白，而且改善了此类废水的水质。     

固态发酵淀粉质原料生产单细胞蛋白

采用YUZ-500型圆盘式固态发酵器,选 SC_(85)、ST_(851)和SU_(64)菌株,以固态发酵技术,将淀粉质原料转化成单细胞蛋白(SCP).其产品含粗蛋白40％以上,蛋白质净增25％,其中氨基酸含量占总蛋白质的82.5％蛋氨酸含量占氨基酸总量4.33％,尚含有多种酶、维生素及微量元素.将产品对肉食鸡、肉兔、罗菲鱼的增重和产蛋鸡的产蛋率进行饲喂试验,结果与鱼粉组对比,无显著性差异,表明该产品可替代鱼粉,动物安全性评价试验结果证明该产品实属无毒,安全可靠。     

黄芩药渣固态发酵生产单细胞蛋白

对黄芩药渣的成分进行分析,采用稀硫酸时黄芩药渣进行预处理,并测定还原糖的含量;以黄芩药渣为原料,利用扣囊拟内孢霉固态发酵生成单细胞蛋白,确立了固态发酵培养基的最佳配比及pH值．正交试验结果表明,最佳发酵条件为：发酵温度30℃,接种量15%,含水量55%,培养时间24 h．在上述的条件下发酵后,药渣中粗蛋白的质量分数由8．99%提高到24．80%．     

利用秸秆类纤维废料生产微生物饲料的研究

以酸化、碱化以后再膨化处理的玉米秸秆为主要原料,接种木霉菌和酵母菌,进行混合发酵生产单细胞蛋白。在优化条件下,产品蛋白质含量达到31.82%,较原料提高49.69%,纤维素和木质素降解率达56.88%,产品纤维素酶活达105U/g。     

沼液和香蕉秆压榨汁生产单细胞蛋白菌株的筛选

由于全球蛋白质缺乏,单细胞蛋白(Single cell protein,SCP)作为一种安全的食品添加剂和饲料,越来越受到人们的重视。尽管SCP大规模生产历史已有近百年,但是对各种优良生产菌株、潜在底物以及最优发酵条件的研究仍然是世界各国研究的热点。基于此,本研究以沼液和香蕉秆压榨汁为研究对象,对能利用其生长的菌株进行筛选,为进一步的单细胞蛋白生产提供参考。实验结果表明:酵母菌、芽孢杆菌都能利用沼液和香蕉秆压榨汁生长,但香蕉秆压榨汁不易保存,因此不宜作为发酵底物;热带假丝酵母Candida tropicalis在沼液中的生长能力强于酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae Y49和毕赤酵母Pichia pastoris GS115;芽孢杆菌在沼液中的生长无规律,且易染杂菌,不适合实际生产应用。因此,沼液作为热带假丝酵母单细胞蛋白生产的培养基,不仅能为单细胞蛋白的生产提供原料,也有利于沼液的妥善处理,实现经济效益和环境效益的双赢。     

单细胞蛋白固态发酵系统的总氮平衡与功效评价

对ＳＳＦ法生产ＳＣＰ系统中的生物量，总糖、总氮等因素进行了动态分析。揭示了反应过程中总氮平衡的基本性质。讨论了同化作用，转化作用、分解作用等３种氮代谢反应方式以及物料收率降低引起蛋白含量升高的浓缩效应。同时分析了蛋白净增量和蛋白含量之间的相互关系。表明蛋白净增量是评价系统功效的合理指标。     

玉米秸杆型多效酶制剂产生菌的选育

从不同地域土样中筛选可发酵生产木聚糖酶、β－葡聚糖酶和纤维素酶的菌株,以使该菌株产生可将玉米秸秆中的非淀粉类抗营养物质转化为可被单胃禽畜利用的简单物质的多酶制剂,利用这些酶制剂歙玉米秸杆成为非常好的饲料粮替代物,以缓解近年来对玉米饲料需求的压力。     

产中性蛋白酶工程菌的构建及其发酵条件的初步优化

为构建1株产中性蛋白酶的工程菌株并对其发酵条件进行优化,以中性蛋白酶工业生产菌株枯草芽孢杆菌AS1.398的基因组为模板,采用PCR技术扩增获得中性蛋白酶基因npr,与高拷贝质粒pWB980连接并转入蛋白酶缺陷型菌株枯草芽孢杆菌WB600中得到重组工程菌WB600/pWB980-npr.在初筛平板上工程菌蛋白酶活力明显高于工业生产菌AS1.398,工程菌发酵活力可达1,398.3,U/mL.通过对其发酵工艺进一步优化,在接种量5%、装液量100,mL/500,mL、摇床转速180,r/min、温度34,℃的条件下发酵48,h,发酵液的酶活力可达2,487.5,U/mL,比优化前提高了78%.     

高效降解秸秆纤维素菌株的筛选鉴定及产酶条件优化

从堆沤秸秆土壤中筛选到一株高产纤维素酶菌株YA-14,经菌株形态特性分析和18SrRNA基因序列分析,确定其为烟曲霉(Aspergillus Fumigatus).通过单因素及正交试验,研究了多种因素对菌株产酶效果的影响,确定最佳产酶条件为碳氮比2:1,初始pH值为5,Mg2+ 浓度为0.4 mg/mL,接种量为1.0...     

发酵水稻秸秆产酸复合菌群的筛选与评价

 为开发秸秆发酵生产有机挥发酸的微生物种子资源和研究材料,以牛粪、猪粪堆肥、玉米地土壤、腐木以及猪粪堆肥和腐木混合物为接种物,通过传代富集培养,选育到发酵水稻秸秆产酸性能相对稳定的5个复合菌群,即FM_c、FM_d、FM_s、FM_w和FM_(d+w).经测试,FM_w具有最高的秸秆降解能力,其秸秆降解率可达46.4%;菌群FM_(d+w)发酵秸秆的总酸和丁酸比产率最高,分别为0.64和0.48g/g;发酵秸秆产乙酸能力以菌群FM_d最为突出,其乙酸比产率为0.35g/g.5个复合菌群均缺乏酸性纤维素酶活性,极大限制了秸秆降解率和产酸率,需要进一步的耐酸驯化和培养条件优化.     

正交实验优化RGD-蛛丝蛋白基因工程菌高密度发酵条件

通过正交实验对RGD-蛛丝蛋白基因工程菌高密度发酵条件进行优化.选择pH、温度、诱导剂、前体物甘氨酸/丙氨酸4因素,分别在3个水平上进行考察.当菌体密度OD600 nm为35左右时,添加IPTG诱导5 h,确定了发酵诱导条件为前体物甘氨酸/丙氨酸质量浓度为0.5%,诱导剂IPTG浓度为0.4 mmol/L,pH为7.0,温度为37℃.工程菌密度OD600 nm 可达到53.1,目的蛋白比例可达到24.3%,每L发酵液菌体经纯化可得到410 mg的目的蛋白.     

发酵生产蛋白饲料中培养基原料配比的实验研究

实验以玉米秸秆粉和麦麸为主要原料，通过康氏木霉和酿酒酵母两株菌混合发酵生产了富含单细胞蛋白质的饲料，对加水比、物料比、氮源添加量等因素进行研究，通过正交实验方法，确定最佳培养基配方。结果表明，玉米秸秆粉与麸皮1：1混合，3．5％（NH4）2SO4，原料：水为1：4pH5．5，接种量10％，30℃，培养周期5d。发酵终产物粗蛋白含量20．05％，比发酵前提高了60．4％；粗纤维含量为11．01％，降低了61．96％。     

产朊假丝酵母细胞和细胞壁对铜离子吸附能力观察

通过比较产朊假丝酵母细胞与分离纯化的细胞壁对铜离子吸附能力差异,探讨了细胞壁在酵母吸附重金属离子过程中的作用。结果表明,细胞壁吸附的铜离子量通常是细胞吸附量的50% 以上。说明细胞壁是酵母吸附重金属离子的主要部位。