蓝隐藻色素蛋白复合物的分离和分析

分别采用等电点聚焦（IEF）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）方法分离蓝隐藻（Chromonas placoidea）类囊体膜色素蛋白复合物．经IEF分离得到5条带，依迁移距离从小到大命名为带Ⅰ（黄绿色，叶绿素蛋白复合物）、带Ⅱ（桔红色，类胡萝卜素-蛋白复合物）、带Ⅲ-Ⅴ（蓝色，隐藻藻蓝蛋白），其等电点分别为pH4．5、4．7、5．2、5．4和5．9．经PAGE分离最多得到4条色素蛋白带，分别为PSI中心复合物CPI和PSI复合物颗粒CPIa以及2个特异的藻蓝蛋白（PC）-Ch 1 a／c-捕光蛋白复合物．值得注意的是，给予580、460和435nm的激发光，捕光复合物都可发射680-682nm Chl a的荧光．这一结果表明，蓝隐藻中藻胆蛋白与捕光叶绿素蛋白的是紧密结合存在的，并且具有能量传递关系．     

蓝隐藻的培养及色素-蛋白复合物分离

探索了蓝隐藻的实验室自行培养条件;改进了完整类囊体膜的制备方法,获得了状态较为理想的类囊体膜,其Chla/c比值可稳定在4左右.此外,建立并优化了色素-蛋白复合物的增溶以及蔗糖密度梯度离心分离的条件,得到了4种活性的色素-蛋白复合物,经光氧化活性测定,初步判定为捕光复合物Ⅰ、捕光复合物Ⅱ以及PSⅡ颗粒和PSⅠ颗粒.实验结果为今后进一步研究蓝隐藻光合系统结构奠定了基础.     

HPLC及LC-ESI-MS分离鉴定B-藻红蛋白的亚基(英文)

摘要:为了分析B-藻红蛋白的三种亚基,采用反相HPLC并通过二极管阵列/紫外可见光检测器和荧光检测器,以及LC-电喷雾/MS质谱检测器进行在线检测与鉴定.结果表明,根据在线检测的光谱特征,α,β和3个明显的γ亚基都能成功地被C4柱分离,且α和β亚基均在555 nm处有最大吸收峰,而γ亚基在493nm和555nm处有最大吸收峰.并结合质谱信息,可鉴别出α和β亚基,它们的相对分子质量分别为18977和20330.说明结合上述几种检测技术可为B-藻红蛋白的亚基鉴定提供可靠的结果.     

Rose bengal处理对植物类囊体膜和PSⅡ颗粒活性的影响

研究了Rose bengal处理对菠菜类囊体膜及PSⅡ颗粒的叶绿素荧光发射光谱、蛋白质内源荧光发射光谱及DCIP光还原活性的影响. 结果表明:单线态氧可改变类囊体膜的结构,并且可破坏PSⅡ反应中心及LHCⅡ中叶绿素分子的结合状态,引起类囊体膜PSⅡ天线系统中的叶绿素捕光效率下降,还可引起光合电子传递能力下降和类囊体膜蛋白构象的改变.     

蓝隐藻PC645两种β亚基的分离及空间结构差异性

为了确认蓝隐藻(Chroomonas placoidea T13)藻蓝蛋白PC645中新发现的β亚基的空间结构差异性,以纯化的C.placoidea PC645为材料,经6 mol/L尿素变性后,摸索了两次DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析法,大规模分离得到了β₁亚基和两种β₂亚基洗脱样品。吸收光谱表明所得的这三种β亚基洗脱组分均保持着活性状态。圆二色谱(CD)显示,β₁亚基与两种β₂亚基的可见光区CD谱相近,但远紫外区和近紫外区光谱存在不同,这说明两种β亚基具有相同的色基组成,但其蛋白质的二、三级空间结构存在差异,其中β₁亚基中α-螺旋的比例高于β₂。上述结果不仅进一步确定了新的β亚基的存在,也为重新认识特异的隐藻藻胆蛋白的亚基组成和组装方式提供了实验依据。     

干出和紫外辐射对坛紫菜光合作用的影响

以坛紫菜叶状体为材料,研究了干出和阳光紫外辐射(UVR)对其光合作用的影响.长时间干出和阳光UVR不能进一步诱导藻体合成紫外吸收物质,而且UVR对干出藻体的叶绿素α和类胡萝卜素合成有抑制作用.UVR显著抑制干出状态下藻体光系统Ⅱ(PS Ⅱ)的有效光化学效率和藻体的光合固碳速率,而且对光合活性的抑制作用随失水率的增大而增强.     

热胁对海洋红藻及绿藻叶绿素荧光的影响

目的 :研究热胁对红藻带形蜈蚣藻和绿藻孔石莼叶绿素荧光的影响 ,探讨其作用机制 .方法 :采用叶绿素荧光动力学和荧光光谱的方法 ,测定 4 0℃下海藻叶绿素荧光随处理时间的变化 .结果 :带形蜈蚣藻的叶绿素荧光动力学曲线随受热时间呈规律性的变化 ,荧光强度先下降后上升 ,并有荧光的骤升现象 ,在达到最大值后 ,荧光就逐步跌落且不可逆转 .此时藻体的荧光光谱发生了显著变化 ,藻红蛋白的发射峰升高而藻蓝蛋白的发射峰下降 ,表明激发能从前者向后者的传递受阻 .孔石莼的荧光动力学曲线没有骤升现象 ,且受热过程中 ,藻体的荧光光谱没有显著变化 .结论 :热胁对两种海藻的作用机制不全相同 .     

干出和紫外辐射对坛紫菜光合作用的影响

以坛紫菜叶状体为材料,研究了干出和阳光紫外辐射（UVR）对其光合作用的影响．长时间干出和阳光UVR不能进一步诱导藻体合成紫外吸收物质,而且UVR对干出藻体的叶绿素a和类胡萝卜素合成有抑制作用．UVR显著抑制干出状态下藻体光系统Ⅱ（PSⅡ）的有效光化学效率和藻体的光合固碳速率,而且对光合活性的抑制作用随失水率的增大而增强．     

蓝隐藻PC645的存在状态及其聚集态复合物的分离

以蓝隐藻(Chroomonas placoidea)为材料,探索细胞中PC645的天然存在状态,以及聚合态PC645存在条件与细胞破碎和离心分离时盐浓度及pH变化的关系.吸收和荧光光谱分析显示,除了小分子的PC645异二聚体之外,在高密度蔗糖梯度区还发现有PC-叶绿素-蛋白复合物与大分子藻蓝蛋白复合物的混合条带,说明隐...     

PSII核心复合物超快动力学研究

应用时间分辨荧光光谱技术，研究了高等植物光系统Ⅱ（PSⅡ）核心复合物中能量传递超快动力学。对实验测得的荧光衰减曲线，进行数据处理，解得荧光衰减的3个时间常数分别为3.9,20.4,930.5ps，各组分荧光占总荧光的百分比分别为1.0%,12.7%,86.3%。对由全局分析得以的荧光强度随波长变化曲线运用高斯多峰解叠运算，解得3个峰值波长分别为671.03,684.74,696.16nm。通过分析，给出了激发能在PSⅡ核心复合物中超快传递的动力学信息及相应的能级关系图。