不同血清型禽霍乱巴氏杆菌免疫的研究Ⅰ.不同方法制备免疫原的免疫保护试验

应用禽多杀性巴氏杆菌C48- 1菌株 (血清型为A∶1 ) ,分别通过接种人工培养基、含动物血液人工培养基、发育禽胚、感染易感鸡等途径 ,获得相应菌培养物后 ,分别制备成灭活免疫原 ,进行了对鸡免疫接种后的感染保护试验。结果初步表明 ,应用接种发育禽胚及感染鸡制备的相应菌培养物 ,其菌体发育及制备免疫原后免疫接种鸡的感染保护效果 ,均优于人工培养基的相应培养物 ,为免疫原的有效制备提供了技术资料及方法     

禽霍乱琼扩抗原和抗血清的制备

将禽多杀性巴氏杆菌 1,3和 4型菌株 ,分别接种于加有绵羊血红素的马丁氏肉汤中进行培养 ,将培养物混合后离心 ,并漂洗沉淀物 ,制成琼扩抗原 ,与NDV ,HAAV ,APIV ,IC ,SP ,MG ,MS和IBDV等抗血清无交叉反应。将 3个血清型细菌培养物等量混合后 ,免疫 6周龄SPF鸡制备禽霍乱抗血清     

新兽药复方畜禽乐防治禽霍乱效果的研究

目前禽霍乱仍是危害我国家禽的主要疾病之一，虽然有效药物很多，由于反复使用，疗效逐渐下降，研制出一药多用、疗效高、无副作用、体内无抗药性的药物是当前的主要任务．１９９１～１９９４年我们承担了吉林省科委“新兽药方８１２－２型制剂（畜禽乐）的研制与应用”，课题通过研制和试验证明该药对人工感染禽霍乱治愈率９３．３％、保护率为１００％，对自然感染禽霍乱治愈率为１００％．     

禽大肠杆菌O18、O78分离株免疫保护机理的研究

以禽原性大肠杆菌Ｏ１８,Ｏ７８分离株制成超声波裂解铝佐剂灭活苗免疫１４日龄鸡,以相同或不同外膜蛋白（ＯＭＰ）型的Ｏ１８,Ｏ７８分离株攻毒,结果以Ｏ７８血清型内相同和不同ＯＭＰ型分离株间能获得最大保护,Ｏ１８血清型内相同ＯＭＰ型分离株间获得最大保护,而不同ＯＭＰ型分离株间不能保护,两个血清型的分离株间不率ＯＭＰ型是否相同,均缺乏保护,以间接ＥＬＩＳＡ试验,间接血凝试验分别测定了试验鸡针对大肠杆菌ＯＭ     

禽病消对禽多杀性巴氏杆菌的体外抑菌试验

本试验应用体外抑菌试验的试管法对复方敌菌净、喹乙醇单方和两药复方(禽病消)对禽多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)进行了测定.单方时复方敌菌净和喹乙醇的MIC分别为48μg/ml和6μg/ml,MBC分别为120μg/ml和15μg/ml,复方制剂(禽病消)中的复方敌菌净和喹乙醇的MIC分别为3.84μg/ml和0.84μg/ml,MBC分别为24μg/ml和3μg/ml,FIC指数为0.16,禽病消对禽多杀性巴氏杆菌的抗菌作用较复方敌菌净、喹乙醇两药单独应用时增强了12.5—32倍,结果说明:复方敌菌冷与喹乙醇联合应用具有明显的协同作用,禽病消组方合理,是防治禽巴氏杆菌病的有效复方新制剂.     

禽多杀性巴氏杆菌X-73株ompH基因的克隆和表达

以禽多杀性巴氏杆菌国际标准株X-73基因组DNA为模板,采用PCR扩增得到编码信号肽除外的成熟外膜蛋白H的ompH基因,将ompH基因克隆至pMAL-p2X表达载体中,构建重组表达质粒pMAL-p2X-ompH,转化大肠杆菌BL21,用SDS-PAGE电泳检测IPTG诱导后的表达蛋白.DNA测序结果表明ompH基因片段大小为1 002 bp,与已报道的ompH基因的核苷酸序列完全相同、而SDS-PAGE结果显示表达分子质量约为78 ku,与预期的融合蛋白MBP-OmpH分子质量相符,表明成功构建出原核表达质粒并实现了目的蛋白表达,为进一步开展禽多杀性巴氏杆菌保护抗原的研究奠定基础.     

禽源沙门氏菌不同检测方法的比较及分型研究

本研究采集同一地区三家规模化蛋鸡场的饲料、肛拭子和病死鸡样品共813份,分别采用本实验室改进的环介导等温扩增技术(LAMP)、普通PCR技术以及美国农业部沙门氏菌分离培养标准(USDA MLG 4.05)进行沙门氏菌检测,并对分离株进行血清型鉴定及ERICPCR分型.结果,三种方法均检出沙门氏菌阳性16份,检出率同为1.97%.其中病死鸡、饲料和肛拭子中检出率分别为11.29%、3.03%和1.02%.16株禽源沙门氏菌中有7种血清型,其中12株沙门氏菌ERIC-PCR分型相似性均小于90%.结果表明,本实验室改进的LAMP方法与PCR方法检出率相同,与USDA MLG 4.05的符合率为100%.16株沙门氏菌血清型多样,分子分型的相似度低.     

基于纳米脂质体的马卡制剂的制备及其性质研究

以大豆磷脂为载体,以葡萄糖液作为分散介质,采用旋转薄膜蒸发法,发展了一种新的马卡纳米制剂制备方法．考察了该方法制备的不同药脂比的马卡纳米制剂的粒径及其Zeta电位,并对马卡的包封率、制备的马卡纳米制剂的胶体溶液物理稳定性以及冻干粉剂有关性质进行了研究．结果表明,不同药脂比的马卡制剂的平均粒径在100～150nin之间,Zeta电位均小于-30mV：通过该方法获得的马卡纳米制剂的包封率高,其胶体溶液具有很好的物理稳定性,30d内,其粒径未发生显著变化,而且冻干粉剂的水再分散性较好．     

乳酸菌制剂对肉鸡生长性能、盲肠菌群和免疫器官的影响

为研究添加不同量的乳酸菌制剂对817肉鸡生长性能、盲肠菌群和免疫器官的影响,选取1日龄817肉鸡720只,随机分为5组,对照组饲喂基础日粮,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组在基础日粮中分别添加100、200、300和400 mg/kg的乳酸菌制剂,试验期49 d,分1～21 d和22～49 d两个阶段。结果显示:(1)1～21 d,在日粮中添加乳酸菌制剂能提高肉鸡日增重和成活率,降低料重比,其中Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组作用显著(P0.05);22～49 d,Ⅱ组肉鸡日增重、料重比和成活率与对照组差异显著(P0.05);试验全期,添加200mg/kg乳酸菌制剂效果最好;(2)与对照组相比,整个试验期各处理组肉鸡盲肠乳酸杆菌、双歧杆菌数量明显提高,大肠埃希菌、沙门氏菌数量明显降低,其中,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组差异显著(P0.05);(3)与对照组相比,21 d时Ⅳ组脾脏指数显著提高(P0.05),42 d时各试验组脾脏指数均显著提高(P0.05);各试验组肉鸡胸腺指数和法氏囊指数有所增加,但差异不显著(P0.05)。综上所述,在本试验条件下,添加200 mg/kg乳酸菌制剂对817肉鸡生长性能促进效果最好,400 mg/kg添加量对肠道菌群平衡及免疫功能促进效果较好。     

副猪嗜血杆菌的不同血清型分析与药敏实验

对闽西地区12个猪场送检的疑似猪传染性副猪嗜血杆菌(HPS)病例,采用改良TSA培养基进行细菌的分离,并对其进行细菌的形态观察、培养特性、生化试验鉴定、血清分型鉴定、药物敏感性分析。结果表明在闽西地区12个送检的猪场中流行副猪嗜血杆菌主要为4型;真空冷冻干燥法可以作为HPS长期保存的方法;药物敏感性分析表明HPS对氨苄西林钠(金头孢)、氟苯尼考(嗜血康)、头孢噻呋钠、环丙沙星等药物极敏感。     

GnRH-a抗原的制备及不同剂量免疫的效果研究

目的:探讨促性腺激素释放激素类似物(GnRH-a)对动物免疫去势的效果和作用机理.方法:以EDC.HCL为偶合剂,将GnRH-a与BSA连接为复合物,再加入弗氏不完全佐剂制成抗原乳剂;给16只兔子分三组注射不同剂量的抗原,用间接ELISA法测定GnRH抗体效价.结果:制备的GnRH-a抗原为乳白色均匀悬液,物理化学性状稳定良好,安全可靠,无任何不良反应;以50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL剂量的抗原乳剂分别对3个实验组动物进行免疫接种,各组动物均在免疫后两周内检测到GnRH-a抗体,并第4周左右达到高峰,ELISA效价分别为1∶800、1∶1600和1∶1600,说明100μg/mL、150μg/mL剂量的抗原产生的抗体效价致相同,故实践可用100μg/mL的剂量.但抗体达到高峰后持续时间短,下降很快.结论:GnRH-a抗原具有良好的免疫原性,为了延续抗体的高峰水平,有必要加强免疫.     

中药制剂对热应激下雏鸡T淋巴细胞转化率和免疫器官指数的影响

为了探讨中药制剂在热应激条件下对雏鸡T淋巴细胞转化率和免疫器官指数的影响,分析其对雏鸡免疫功能的调节作用,选择120只1周龄的海兰褐商品代蛋用雏鸡为研究对象,随机分为4个组,每组30只。其中,1组为对照组,饲喂基础日粮;2,3,4组饲喂添加了中药制剂的基础日粮,其中中药制剂的质量分数分别为0．005,0．010,0．015。于4周龄时采用MTT法测定其外周血T淋巴细胞转化率和法氏囊、脾脏和胸腺的器官指数。结果表明,2,3,4组鸡的T淋巴细胞转化率均明显高于对照组的（P〈0．01）,各实验组间没有明显差异,但有随添加量增加而升高的趋势。2,3,4组鸡的免疫器官指数均高于对照组的,其中,第3组鸡的脾脏器官指数显著高于对照组（P〈0．01）。因此,日粮中添加一定剂量的“热消”对雏鸡的免疫功能有一定的增强作用,能增强雏鸡的抗热应激能力。     

西昌安宁河流域鸭霍乱的流行病学调查与诊治研究

本文报道了西昌安宁河流域鸭霍乱的流行与诊治情况。各品种鸭均能感染,成年鸭和50—70日龄鸭发病居多,主要发病季节为6—9月。发病率为30—60%,死亡率为60—85%,有时高达100%。病原分离鉴定为多杀性巴氏杆菌。复方痢菌净、喹乙醇、庆大霉素、四环素和链霉素高度敏感,疗效良好。青霉素、氯霉素、卡那霉素和土霉素中度敏感。痢特灵、磺胺嘧啶、增效联磺片、磺胺甲基异(口恶)唑及黄连素不敏感。     

不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病的抗性研究

目的探索不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病(Avian leukosis,AL)的抗性差异,为建立AL抗性和易感鸡系提供实验依据。方法选择纯合G1、G5、G6鸡系及杂合G8鸡系雏鸡进行人工感染白血病病毒A亚群(Avian leukosis virus,ALV-A)RAV-1毒株实验,G8系雏鸡(6羽)作为对照。攻毒后对各鸡系的死亡率、病变率、血液中抗体水平以及外周血淋巴细胞的病毒载量等与抗性相关指标进行动态评估与统计学分析,最终确定抗性较强和较弱的鸡系。结果 G5系病变率和死亡率均明显高于其它攻毒鸡系,G1系最低,G6和G8系居中;G1系在攻毒后第5周开始,抗体效价一直高于其它鸡系,而G5系则最低,并且在攻毒后第8周至11周和第15周至18周,G1系的抗体效价显著高于G5系(P0.05);G1系的病毒载量在攻毒后第7周至15周,低于其它鸡系,而G5系自攻毒后第9周至13周,极显著高于G1系(P0.01)。结论 G1系在感染ALV后,死亡率较低,病变轻微,抗体保护力较强,且病毒的增殖较慢,因而其对AL具有较强的抗性,而G5系则相反较为易感。本研究不仅为建立AL抗性较强和较易感的鸡系提供了实验依据,而且对进一步阐明鸡主要组织相容性复合体(Major histocompatablity complex,MHC)多态性与AL抗病性的关系有重要作用。     

抗病毒中药复方制剂对雏鸡免疫功能影响的研究

探讨抗病毒中药对雏鸡免疫功能的影响,为药理作用和临床合理用药提供科学依据.采用水萃取法制备抗病毒中药复方浸膏制剂,将实验动物随机分为阴性对照组、阳性对照组、低剂量中药组、中剂量中药组和高剂量中药组,在免疫接种NDV-Lasota株灭活疫苗的基础之上,以NDV-Ab(鸡新城疫病毒抗体)、CD4+/CD8+T淋巴细胞比值为检测指标,研究中药复方制剂对雏鸡免疫功能的影响.实验结果表明:高剂量中药组在连续给药5d后,能够促进实验雏鸡在疫苗接种后7-14d的NDV-Ab水平急剧上升,14d达到最高(27.8073ng/L),极显著高于阳性对照组的17.8183ng/L(P0.01);3个剂量中药组均能提高实验雏鸡在疫苗接种后7-14d外周血T淋巴细胞CD4+/CD8+比值的作用,14d达到最高,高于阳性对照组(P0.05).结论:抗病毒中药复方制剂具有诱导实验雏鸡体液免疫应答的作用,诱导作用可能与中药剂量及机体的免疫状态有关.     

固体纤维素酶制剂的规模化制备技术研究

我国是一个农业大国,植物纤维资源十分丰富,农作物秸杆每年产量达7亿吨,但秸秆利厢率只占发达国家利用率的35％左右。随着石油资源的短缺,利用可再生的农作物秸秆等生物质资源制备能源燃料和化学品已经成为当前的一个研究热点。农作物秸秆等纤维素原料一般含有纤维索35％～45％,半纤维素20％～30％,木质素15％～25％。     

海洋生物提取物“KEMH”研究：Ⅱ.对实验动物免疫功能的影响

报导“ＫＥＭＨ”对昆明种小鼠免疫功能的影响。结果表明：不同剂量的“ＫＥＭＨ”试验组与环磷酰胺对照组比较，不论在非线性特异性免疫或特异性免疫功能方向，经Ｔ检验所得Ｐ值都显示出明显差异；与正常对照组比较则仅限高剂量组显示高度明显差异，中剂量组略显差异或不显差异，小剂量基本无差异。     

动物微生态制剂鸡肠源芽孢杆菌的分离与鉴定

试验菌种由宁夏固原山区完全自然生长的土种健康产蛋母鸡的盲肠和大肠中分离获得,共分离出8株革兰氏染色阳性杆菌株,对其进行茼落形态观察和描述,及革兰氏染色、芽孢染色和生理生化鉴定,确定4株为芽孢杆菌（Bacillus）,其中3株为枯草芽孢杆菌（B、subtilis）,1株为蜡状芽孢杆菌（B．cereus）,各项鉴定结果均符合相对应的芽孢杆菌属和种的菌落形态,及革兰氏染色、芽孢染色特征和生理生化鉴定标准;另4株初步确定为不产芽抱的革兰氏阳性杆菌．     

不同免疫程序制备17β－雌二醇抗体的效果比较

比较了皮内多点注射和肌肉注射配合静脉注射两种免疫程序制备１７β－雌二醇抗体的效果。证明采用皮内多点注射的免疫程序，比用肌肉注射配合静脉注射的程序更易产生高滴度的抗体。     

根施不同形态硅制剂对小麦白粉病的作用效果研究

本文研究了根施三种不同形态硅制剂对小麦白粉病的作用效果.结果表明,溶胶态的氧化硅溶胶、分子态的正硅酸乙酯和离子态的硅酸钠对小麦白粉病均有一定的作用效果,防治效果分别为1.02%、51.36%、54.08%.