家蚕抗核型多角体病毒的研究进展

家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)病是世界养蚕业一种重大的传染疾病,该病引起的蚕茧损失占蚕病引起损失总数的60%以上,长期以来对这种病毒病的防治还没有很好的解决方法.各国研究人员在寻找抗性基因、阐述抗性机制以及通过传统育种或者转基因构建抗Bm NPV家蚕等方面进行了很好的尝试,也取得了一定的成果.本文将最新的家蚕抗Bm NPV的研究结果进行归纳和整理,尝试对其可能的分子机制进行探讨,并对现有的研究结果进行深入挖掘,希望有助于家蚕抗病分子机制的深入研究.     

AcMNPV诱导sf9细胞在核内产生纤维网状基质

来源于昆虫卵巢的sf9体外传代细胞 ,在核内虽存在核纤层却没有哺乳动物细胞核内那样的核基质网络 .当其被NPV感染后核内产生纤维网络结构 .快速冷冻 深度蚀刻电镜图象显示这种网络由 8～ 10nm的均一纤维交织而成 .有一些电子致密的物质与未装配好的病毒衣壳存在于网络结构中或周围 ,说明核内产生的纤维网络结构可能与NPV的复制与装配有关     

全国第一届农林害虫生物防除学术会议

中国植物保护学会和中国昆虫学会于1964午3月10—17日在武汉联合召开了全国第一届农林害虫生物防除会议,出席正式代表52人,列席代表27人,还特邀了湖北省有关专家5人。会议共收到论文126篇,其中天敌昆虫方面88篇,昆虫病原方面38篇。会上,刘崇乐教授作了“廿年来昆虫病理学三大进展”、高尚蔭教授作了“昆虫病毒研究进展”、曹诒孙教授作了“家蚕的僵病、卒倒病与害虫     

用单層組織培养法培养家蚕的各种組織

为了研究家蚕脓病的防治問題,必須将脓病病毒接种到家蚕的身体中。因此利用組織培养法使家蚕的組織在体外生长,可以解决下面两个問題:(一)家蚕的飼养在武汉地区只能限于春季,如能用細胞传代法将家蚕各种組織細胞在体外生长及传代,則可将病毒接种到組織上,終年可做实驗。(二)可在組織培养上篩选抗脓病病毒物質。     

棉铃虫核多角体病毒新疆株DNA的限制性内切酶酶解图谱

我们以最常用的两种限制性内切酶分析了新疆株棉铃虫NPV的脱氧核糖核酸(DNA),本文报告此项研究结果.基本上采用MdCarthy 等的方法,从感染新疆株NPV 致死的棉铃虫尸体中分离提纯     

亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒全长可读框的表达及其产物免疫原性分析

将亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)全长约为6.9 kb的可读框(ORF)克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中, 构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-ORF. pVL-ORF与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞, 经空斑筛选后成功获得携带有FMDV全长ORF的重组病毒Bm-ORF. 免疫荧光技术证明, 重组病毒能够正确表达插入的外源基因. 将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫, 双抗体夹心ELISA法和电子显微镜观察证明, 目的基因在蚕体中获得较高水平表达并组装成空衣壳. 用蚕表达产物作抗原制备疫苗免疫牛, 免疫动物均产生了特异性抗体. 免疫后21 d进行病毒攻击保护实验, 获得了2/4的完全保护.     

家蚕细胞质多角体病毒的以双链RNA为模板的RNA复制酶的分离与重组

昆虫的细胞质多角体病毒是双链RNA病毒群中的成员之一。细胞质多角体病毒含有10双条链RNA基因和核酸复制酶。文献[2]已报道了核酸复制酶可以以基因一复制酶的形式分离出来。核酸复制酶含有三种蛋白亚基,表现了较高的RNA多聚酶和转甲基酶活力。     

超声波诱导柞蚕蛹血淋巴产生抗菌物质

自然界中昆虫是一类具有高度适应性和防卫机能的动物,注射细菌于昆虫休内能诱导产生溶菌酶及抗菌蛋白,如鳞翅目的蜡螟(Galleria mellonella)、家蚕(Bombyx mori)、天蚕(Hyalophora cecropia)、柞蚕(Antheraca perngy)、及蓖麻蚕(Samia cynthia ricini),     

柳蚕的研究

柳蚕属于昆虫綱、鳞翅目、蚕蛾科。柳蚕的卵、颗粒大而长圓,外复有雌蛾尾端脫落的棕色短毛。卵在排出后,漸变为灰白色,表面还有較显著的深褐色的細小斑点,但稍混浊,不够鮮明。卵的大小較家蚕的卵約大两倍,形状与家蚕的卵頗相类似。     

虫案神探

<正>他是全球著名侦探,却与人类犯罪无关,任何昆虫的蛛丝马迹都难逃他的法眼。能够胜任这项工作的人,在全世界凤毛麟角,而他就是其中之一——如果黄粉虫、大麦虫、东亚飞蝗、家蚕等昆虫被做成食物摆上餐桌,您敢尝吗?或许不少人会觉得有些反胃,但同样也有人对它们趋之若鹜。华中农业大学举办的一场昆虫宴就吸引了数百名师生前来尝鲜,25千克昆虫被"一扫而空"。活动主办方介绍,举办昆虫宴的目的并非只是为了分享美食,更是希望通过这种方式让更多人了解昆虫、认识昆虫。     

几种昆虫核糖体核酸的碱基组成

由于核糖体是蛋白质合成的部位,所以近年对原核细胞和真核细胞核糖体的研究日益广泛和深入。本文研究家蚕五龄幼虫丝腺和家蚕蛹卵巢中的核糖体核酸(rRNA)以及黄粉(虫甲)老熟幼虫的rRNA的碱基组成,并探讨几种昆虫rRNA碱基组成所呈现的差异。 提取上述家蚕组织和黄粉虫rRNA的方法系参考Kirby(1968)综述的冷酚法制备:     

杆状病毒运载的乙型肝炎病毒表面抗原基因(preS2-S)在家蚕体内的高效表达

利用核型多角体病毒中多角体蛋白基因的强启动基因建立的表达载体系统,被认为是极有潜力的新型表达载体系统。我们组建了插入乙型肝炎病毒表面抗原基因(HBV preS2-S)的重组家蚕核型多角体病毒BmNPVS后,用重组病毒感染家蚕做了进一步的研究。发现在重组病毒感染的5龄蚕的血淋巴中每毫升含HBsAg 7-10μg,每条蚕的蚕体组织中还含     

YAC介导的天蚕丝素基因向家蚕的转移及其在F_2代中的表达

天蚕(Antherae yamamai)是天蚕蛾科柞蚕属的一种大型野生绢丝昆虫,其丝质优良,素有“丝中皇后”的美称.但天蚕和家蚕(Bombyx mori)的亲缘关系较远,为了获取具有天蚕丝质性状的家蚕转化体,利用传统的遗传育种方法是行不通的,必须借助于基因转移.YAC(Yeast artificial chromosome)作为一种大容量的基因工程载体,在真核基因转移方面有其独特的优越性.天蚕和家蚕丝质基因的主要歧异存在于核心区,这种歧异反映在蛋白质水平上就表现为     

聚肌胞核苷酸及2′,5′-寡腺苷酸诱导家蚕对细胞质多角体病毒抑制作用的研究

家蚕中肠型脓病是蚕业生产的主要病害之一,其病原为细胞质多角体病毒(CPV),添食或注射聚肌胞核苷酸(Poly I:C)或注射2′,5′-寡腺苷酸(2′,5′-P_3A_3)能提高家蚕对CPV的抵抗力,均使蚕的发病指数降低40—50％。同时发现Poly I:C能诱导家蚕产生一些与抗病毒活性有关的蛋白质。     

RNA干扰途径调控南方水稻黑条矮缩病毒在介体白背飞虱体内的持久侵染

南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)由介体白背飞虱以持久增殖型方式传播,但有关病毒在介体内高效增殖的机制仍不明确.RNA干扰(RNAi)是昆虫保守的抗病毒免疫途径.为了探索SRBSDV在介体白背飞虱体内的持久增殖是否受到RNAi抗病毒免疫途径的调控,本研究采用小分子RNA深度测序发现SRBSDV侵染白背飞虱培养细胞后诱导产生病毒来源的主要长度为21和22 nt的小分子RNA,暗示病毒侵染可激活RNAi反应.在白背飞虱及其培养细胞中通过dsR NA处理干扰RNAi途径中的关键组分Dicer2和Argonaute2基因表达后,SRBSDV的侵染率和积累量显著提高,带毒昆虫的存活率下降、寿命减短.因此,RNAi途径具有调控SRBSDV在介体白背飞虱体内的持久侵染、控制植物病毒在介体昆虫内过度积累从而避免病毒对昆虫造成不利影响的作用.     

杆状病毒P49蛋白的Caspase切割位点的鉴定

海灰翅夜蛾核型多角体病毒(SlNPV)的p49基因, 可抑制病毒感染引起的昆虫细胞Sf 9的凋亡. 用杆状病毒Bac-to-Bac表达系统表达的P49蛋白可抑制Caspase的活性. 通过氨基酸序列测定发现, P49蛋白的91 ~ 95位的氨基酸序列是⁹¹TVTDG⁹⁵. P49蛋白在体外可被人及家蚕Caspase切割, 切割后均产生约10和40 kD的2个片段. 经定点诱变得到的P49蛋白94位氨基酸突变体不能被人及家蚕Caspase切割, 同时也失去对Caspase的抑制功能. 而91位突变体蛋白仍可被Caspase切割, 并保留了对Caspase 抑制的部分活性. P49蛋白不仅作用于下游的效应Caspase, 也可作用于上游的启始Caspase, 它是一个广谱的Caspase抑制剂.     

蚊子不会传播艾滋病

在非洲涉及“艾滋”病的最基本问题可能是“艾滋”病病毒是否会通过蚊子及其它吸血昆虫来传播。幸运的很,回答是否定。由于已有许多文章谈及了这个内容,有必要对这个问题作进一步的探讨。从理论上讲,蚊子和其它吸血昆虫可有生物性的或机械性的两种方式传播引起患“艾滋”病的病毒——HIV(人类免疫缺陷症病毒)。     

海灰翅夜蛾核型多角体病毒P49蛋白的表达及其抑制细胞凋亡的机制

一个新克隆的海灰翅夜蛾核型多角体病毒（SINPV）的p49基因可抑制病毒感染引起的昆虫细胞Sf9的凋亡。用杆状病毒表达系统表达的P49蛋白的氨基酸序列与推导的氨基酸序列致,证明p49基因编码序列经克隆后能够正确表达。体内标记显示,p49基因在感染早期及晚期均可表达,以多角体基因启动子驱动p49基因的表达只是在晚期,但表达量明显高于wtSINPV合成的P49蛋白。研究结果证实,SINPV的p49基因像其他杆状病毒的凋亡抑制基因（p35)一样也是一个早期基因,但在晚期也可表达,与多角体基因启动子比较,p49基因的启动子是一个较弱的启动子。P49蛋白在体外可被人Caspase及家蚕Caspase所切割,切割后均产生约10和40ku的2个片段。P49蛋白又可明显抑制人Caspase-及家蚕Caspase对其特异底物的切割,证明P49的凋亡抑制与下游Caspase有关。     

棉铃虫滞育激素cDNA的克隆和序列测定

滞育激素是诱导昆虫滞育的神经肽。运用ｃＤＮＡ末端快速扩增法,对棉铃虫滞育激素的ｃＤＮＡ进行了克隆,序列分析表明它是由２５个氨基酸组成的一种新型的滞育激素分子,它和家蚕、玉米夜蛾的滞育激素在核苷酸和氨基酸水平上有高度的同源性,并且也同属ＦＸＰＲＬ神经肽家族。