金丝垂柳J1010组织培养技术初步研究

报道了金丝垂柳J1010外植体的消毒方法以及获得无菌组培苗的最适的培养基和激素浓度,试验结果显示：外植体选用水培苗进行消毒;外植体的消毒选用浓度为0．2％的升汞;MS＋BA0．5mg／L＋NAA0．1mg／L为初代培养基。     

采用正交设计快速获得梨无菌外植体的研究

以“雪青”梨为材料 ,采用L9(34)正交设计 ,设外植体 (A)、消毒剂 (B)和消毒时间 (C) 3因素 ,每因素设 3个水平 :A分别为叶片、茎尖和节段 ;B分别为 2 %次氯酸钠、0 1%升汞和 2 %次氯酸钙 ;C分别为 10min ,5min和 5min .外植体经表面消毒后 ,接种在MS琼脂培养基中 ,于 (2 5± 1)℃ ,2 0 0 0lx光照培养 ,15d后统计成活率 .试验结果表明 :最优水平组合为A1B2 C1,A ,B对试验结果的影响达显著水平 (p≤ 0 0 5 ) ,A不同水平间差异显著 (p<0 0 5 ) .     

罗汉果茎段组织培养与植株再生体系的研究

以青皮罗汉果茎段为外植体,探讨了不同消毒剂、消毒时间、不同丝瓜络提取物浓度和不同激素组合对罗汉果茎段组培育苗的影响,以期能够在较短时间内培育出大量优质种苗,加快推广速度,同时也是解决罗汉果病毒病的根本途径。结果表明：以罗汉果茎段作为外植体,其最佳消毒方式是0.05%的高锰酸钾溶液浸泡消毒25 min, 0.1%的升汞消毒8 min, 75%的乙醇消毒30 s,成活率达81%。芽诱导最佳培养基为MS+2.0 mg/L丝瓜络提取物浓度,诱导率达92%;芽增值最佳培养基为MS+1.0 mg/L丝瓜络提取物浓度+0.1 mg/L NAA,增殖系数达2.43;生根培养的最佳培养基为1/2 MS+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA+0.2 mg/L碳粉,生根数在5～9条之间,生根率高达93%;最佳炼苗基质组成为：蛭石∶珍珠岩∶苔藓体积比=2∶1∶1,移栽成活率达100%。     

蓝桉超级苗组培快繁技术体系研究

以蓝桉超级苗茎段为外植体,分别采用正交试验、单因素试验和两因素全因子试验逐一探讨蓝桉外植体消毒、外植体采集时期、腋芽诱导、不定芽增殖和生根培养等组培快繁主要环节中各自的最佳处理,构建蓝桉超级苗组织培养的技术体系.结果表明:外植体联合消毒的最佳处理为75%酒精消毒20 s,3%洁尔灭消毒1 min和0.05%升汞消毒6.5 min;外植体适宜采集时期为10月份,污染率和褐变率均最低,且存活率和萌芽率均最高;腋芽诱导的最佳体系为改良的MS培养基、0.5 mg/L的KT、0.4 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA,可极显著提高腋芽萌发率且诱导效果稳定;不定芽增殖的最佳处理为改良的1/2 MS培养基、0.3 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA,可极显著提高增殖系数,使20 d的增殖系数达2.75;生根培养的最佳处理为改良的1/2 MS培养基、0.2 mg/L的NAA,0.5 mg/L的IBA和0.8 mg/L的ABT,可极显著提高生根率和单株生根数量且结果稳定,使生根率达64.38%,单株生根数量达2.70.     

牛樟的组织培养和植株再生

以牛樟侧枝茎段为外植体,建立了牛樟高效离体再生体系,研究取材季节、消毒方式、不同激素配比等因素对茎段再生的影响。结果表明:牛樟外植体采集最佳季节为春夏两季,此时采集的外植体其污染率与褐化率均较低,且出芽快、出芽率高。依次用1 000倍甲基托布津处理10 min、75%酒精消毒30 s和0.1% HgCl₂消毒8～10 min的消毒方式能明显降低牛樟外植体的污染率,且对外植体伤害较小。MS培养基为牛樟生长最适基本培养基,牛樟外植体诱导的最佳培养基为MS + 6-BA(1.0 mg/L)+ IBA(0.1 mg/L),芽诱导率高且芽体粗壮; 丛芽增殖的最佳培养基为MS + 6-BA(1.5 mg/L)+ IBA(0.1 mg/L),丛芽增殖率高且芽体健壮; 生根培养的最佳培养基为1/2MS + ABT(0.2 mg/L)+ IBA(0.05 mg/L)+ 活性炭(0.5 g/L),30 d后生根率可达100%且根系状态较好。     

兰州百合组织培养及快速繁殖技术研究

【目的】建立适于兰州百合(Lilium davidii var.Unicolor(Hoog)Cotton)的快速无性繁殖技术,为食用兰州百合试管苗规模化生产提供技术参考。【方法】以球根鳞片为外植体,采用不同消毒方法、取材部位、接种方法和植物生长调节剂及其浓度配比,筛选适合的诱导、增殖和生根培养基。【结果】球根鳞片先用75%酒精处理后,用10%的次氯酸钠与0.13%的升汞等体积混合液消毒,再用0.13%升汞消毒为最佳消毒方式;接种选择与鳞茎盘相连的下部鳞片为初代培养的最佳外植体;外植体在MS+6-BA 1.5mg/L+GA30.8mg/L+2,4-D 1.0mg/L的培养基中,能诱导出较多长势健壮的不定芽;在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L的培养基中,增殖倍数达1.25;而生根培养以MS+NAA 0.6mg/L+IBA 0.1mg/L为最佳,生根苗生长良好,生根率达100%。【结论】获得适合兰州百合快速繁殖的培养基配方,建立了兰州百合的快速繁殖技术。     

杜鹃红山茶花药愈伤组织的诱导

杜鹃红山茶花蕾经4℃低温预处理5～15 d后,用不同消毒剂进行表面消毒.以花药为外植体,MS为基本培养基,研究低温预处理下,花蕾表面消毒方法以及2,4-D与KT、NAA浓度组合对杜鹃红山茶花药愈伤组织诱导的影响.结果表明:4℃低温预处理花蕾的最佳时间为5 d,花蕾的最佳消毒方法为75%乙醇浸洗30 s后,用0.1%升汞消毒10 min;诱导花药愈伤组织的适宜培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT和MS+0.5 mg/L2,4-D+0.4 mg/L NAA,于23～25℃暗培养30 d,愈伤组织诱导率分别达34.44%和35.33%.     

八宝景天茎段的组织培养和快速繁殖①

以八宝景天茎段为外植体,以MS为基本培养基,对八宝景天外植体消毒、不定芽诱导、继代增殖和生根培养基进行筛选试验,建立了八宝景天组织培养快繁技术体系。结果表明:75%C_2H_5OH 30s+0.1%HgCl_2 6min为八宝景天茎段消毒的最佳方法;MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1 mg/L为不定芽诱导的最佳培养基;MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L为继代增殖培养的最佳培养基;不定芽诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L或1/2MS+IBA 0.1 mg/L,生根率达100%。     

大别山白头翁组织培养外植体选择与消毒技术优化

以河南大别山野生白头翁(Pulsatilla chinensis)为材料,选用幼叶叶片、中叶叶片、中叶叶柄等3种外植体分别与75％乙醇+2％次氯酸钠、20％过氧化氢+2％次氯酸钠进行两组正交试验,比较各因子对消毒效果的影响,以找出启动培养的最佳外植体与消毒的最佳组合.结果表明:外植体类型是影响消毒效果的最关键因素;刚由...     

文山三七块根的植物组织培养研究

选择云南文山三七块根为外植体,采用全面实验法或正交实验法,研究组织培养过程中外植体最佳表面消毒方案和最佳愈伤组织诱导、分化生芽、生根方案.试验结果表明,三七块根最佳表面灭菌方案为75%乙醇消毒10 s,再用2%次氯酸钠溶液消毒15 min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+KT1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,批pH=5.8;生芽生根培养基可以选择MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+2,4-D0.5 mg/L+NAA1.0mg/L NAA+6-BA1.0mg/L,pH=5.8.     

三种常见植物体外抑菌活性的初步研究

以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌和沙门氏菌为检测菌,考察爵床、仙鹤草和鸡矢藤的水提物的体外抗茼活性。结果表明,以上三种植物水提物对所测病原菌都具有一定的抑菌效果,其中爵床对金黄色葡萄球菌抑菌活性最强,鸡矢藤对沙门氏菌抑菌活性最强,两者的最小抑菌浓度均为0．0625g·mL^-1。而且各植物水提物在酸性环境等条件下不影响其抑菌活性。     

湖北省大别山地区常见野生药用植物资源调查

为研究和开发民族野生药用植物资源,实地调查了湖北省大别山地区常见野生药用植物资源并对其进行了物种鉴定;报道了其中30种药用植物的主要药用经验和资源概况.调查结果表明:夏枯草、龙牙草、鱼腥草、紫苏、费菜以及鸡眼草、截叶铁扫帚、白马骨等资源极其丰富;提出了加强近缘药用植物品质的比较研究、保护优质野生中药材资源以及重点研究开发应用野生中药材等必要性.     

杂交松组织培养中外植体的灭菌方法

在实验室内对来自广西大学林学院苗圃、东门林场苗圃、广西林业局种苗基地的杂交松 (Pinus elliottii× P.caribaea)外植体进行 75 %酒精 10 s+0 .1%升汞 4～ 6 min灭菌试验。其中 ,东门林场苗圃的外植体进一步采用 75 %酒精 10 s+0 .1% Hg Cl2 6 m in结合添加入培养基中的 1.2 %大蒜液的灭菌方法进行试验。结果表明 :广西大学林学苗圃的杂交松外植体 ,采用 75 %酒精 10 s+0 .1%升汞 5～ 6 m in的灭菌方法效果较好。东门林场苗圃以及广西林业局种苗基地的杂交松外植体用 75 %酒精 +0 .1%升汞的灭菌方法效果不理想。东门林场苗圃的枝条用 75 %酒精 10 s+0 .1% Hg Cl2 6 min结合添加入培养基中的 1.2 %大蒜液的灭菌方法效果较好。     

‘南大’蓝莓试管苗快速繁殖体系的建立

以蓝莓南高丛品种‘南大’为外植体,对外植体消毒方法、腋芽诱导、腋芽增殖、试管苗生根等方面确定了其快速繁殖的最佳条件.结果表明:蓝莓‘南大’茎段的最佳消毒方式为75%酒精消毒120 s+0.1%HgCl₂消毒10 min.茎段腋芽诱导最佳培养基为WPM+ZT 1.0 mg·L^-1,腋芽增殖的最佳培养基为WPM+ZT 2.0 mg·L^-1,培养60 d后增殖倍数可达6.0生根的最佳培养基为WPM+IBA 1.0 mg·L^-1 +活性炭0.5 g·L^-1,培养30 d后生根率达到73%.     

蛇足石杉的组织培养初探

针对蛇足石杉资源分散,资源更新周期长,难以大规模开采的情况,初步探讨了蛇足石杉的组织培养技术.以蛇足石杉茎尖为外植体,分别在1/2MS+0.05 μmol/L IBA+1.4 μmol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺、MS+0.05 μmol/L IBA+1.4 μmol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺、1/2MS+2 mg/L谷氨酰胺/无激素、MS+2 mg/L谷氨酰胺/无激素等4种培养基中培养.结果显示:较为适宜的初代培养基为2号培养基,即MS+0.05 μmol/L IBA+1.4μ mol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺.在组织培养工作中,污染问题比较严重,本实验中,采用了以下2种方法对外植体进行消毒：（1）70%酒精浸泡1 min→5% NaOCl浸泡1 min→7%H₂O₂浸泡10 min;（2）0.1%升汞液灭菌3’ →无菌水冲洗5次.结果显示第2种方法比较理想.     

芒萁组培技术体系的优化

【目的】芒萁(Dicranopteris pedate)是尾矿及酸性边坡修复的优良植物。优化芒萁组培技术,提高组培效率,可为困难立地修复提供大量芒萁孢子体。【方法】以芒萁孢子为外植体,研究外植体收集时间、消毒时间与孢子萌发率的关系;通过改变培养基中无机盐浓度、蔗糖浓度及植物生长调节剂类型及浓度,研究孢子萌发、原叶体增殖、孢子体生成3个过程的最佳培养基配方。【结果】春季2—4月采集的芒萁孢子萌发活性最强;孢子诱导萌发最佳处理为DKW+5%(质量分数) NaClO消毒15 s,萌发率97.15%,20 d原叶体可见;原叶体最佳增殖培养基为1/2 MS+蔗糖5 g/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L,30 d质量增殖倍数为7.28;孢子体诱导生成最佳培养基为1/2 MS+蔗糖30 g/L+NAA 1.0 mg/L,第8天孢子体即可产生,生成率53.33%。【结论】芒萁孢子活性与生长区域、生成月份存在关联性,广州地区3月的孢子活性最强;在幼孢子体的瓶苗生成率较低的情况下,研发原叶体绿色球状体(prothallus green globular body, PGGB)高效增殖...     

蛇足石杉外植体表面消毒及内生菌消除方法

为了获得蛇足石杉的无菌材料,使用双氧水、酒精、升汞等消毒剂对外植体进行表面消毒,使用混合抗菌溶液及不同温度的热水浴处理外植体以消除内生菌.结果表明:茎段经预处理后,用47 ℃热水浴处理1 h,再经70 %酒精处理30 s, 0.1 %升汞处理7 min后,能达到较好的表面消毒及内生菌消除的效果;孢子囊和茎尖经预处理后,再经过70%酒精处理30 s,0.1 %升汞处理4 min即可达到较好的表面消毒效果;消毒剂结合温度处理能降低内生菌的污染率;孢子囊和茎尖几乎不含内生菌,是可用于组织培养的较好的外植体.     

仙鹤草挥发油化学成分的气相色谱-质谱分析

据化学计量学分辨方法,提出一个用气相色谱-质谱联用法定性定量分析仙鹤草中挥发油成分的方法。对重叠色谱峰采用直观推导式演进特征投影法进行分辨,从而获得每一组分的纯色谱和质谱,对每一组分纯质谱在NIST质谱库进行相似性检索并进行定性分析,用总体积积分法进行定量分析。从仙鹤草挥发油样品中共分离出56个色谱峰,鉴定出其中50个组分,占挥发油总含量的90.53%,其主要组分为醇和单萜类化合物,分别占总化合物的50.58%和18.34%。采用该方法可为进一步研究和开发仙鹤草的药用价值提供有用信息。     

迎春花无菌体系的建立以及茎段和叶片愈伤组织的诱导

本文对迎春花无菌体系的建立和茎段、叶片愈伤组织的诱导进行了研究。结果表明：（1）在建立迎春花的无菌体系时,应该选择晴天去采集外植体为好;（2）带芽茎段和叶片的污染率最大,而不带芽茎段的污染率最小;（3）在超净工作台外消毒应先用饱和洗衣粉溶液浸泡10 min,然后用自来水冲洗2-3次,最后再用蒸馏水冲洗2-3次;在进行超净工作台内消毒时,叶片应该先用84消毒液（1%）浸泡5min,无菌水冲洗3次,75%酒精浸泡20s,无菌水冲洗3次,0.1%升汞浸泡8 min,无菌水冲洗3次,而茎段应该先用84消毒液（1%）浸泡10 min,无菌水冲洗3次,75%酒精浸泡30s,无菌水冲洗3次,0.1%升汞浸泡10min,无菌水冲洗3次;（4）在NAA为0.2 mg/L时,高浓度的6-BA有利于不定根的再生,而低浓度的6-BA则更利于愈伤组织的诱导;在NAA为0.2 mg/L时,高浓度的KT有利于愈伤组织的诱导,而低浓度的KT则有利于不定根的再生;（5）NAA更利于不定根诱导,也可诱导愈伤组织。而2,4-D只利于愈伤组织的诱导,不利于诱导不定根。     

绿桐增殖、生根培养及炼苗移栽研究

本研究旨在建立适于绿桐（Paulownia fortunei×Paulownia tomentosa）的快速无性繁殖技术,为试管苗工厂化生产提供技术参考。实验以绿桐当年生枝条为外植体,对消毒方式、取材部位、植物生长调节剂及其浓度配比条件进行优化,筛选合适的诱导、增殖和生根培养基。实验结果表明,最佳消毒方式为依次采用75%乙醇、等体积的10%次氯酸钠与0.1%升汞混合液、0.1%升汞消毒;当年生嫩条顶端10 cm长度的茎段为最佳外植体;外植体在MS+1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤（6-BA）+1.0 mg/L 2,4-对氯苯氧乙酸（2,4-D）+0.8 mg/L赤霉素（GA₃）的培养基中,能诱导出长势健壮的不定芽;在MS+0.8 mg/L 6-BA+0.4 mg/L萘乙酸（NAA）的增殖培养基中,增殖系数达2.02;而生根以1/2 MS+0.6 mg/L吲哚-3-丁酸（IBA）+0.4 mg/L NAA培养基为最佳,生根率达100%;对组培苗进行炼苗后覆膜保湿,移栽存活率可达92%。本研究获得了适合绿桐快速繁殖的培养基,建立了一套绿桐快速繁殖体系。