雌激素受体α亚细胞定位及其与细胞生长的相关性

雌激素受体（Estrogen Receptor，ER）是核受体（Nucleus Receptor，NR）超家族成员，能够被其配体雌二醇（Steroid hormone17-β-estradiol，E2）激活．ER有两种亚型，ERα和ERβ，由4个不同的功能域组成．通过构建ERα的不同缺失突变体（ER△LBD、ER△DBD和ER△Hinge）来研究不同功能域对细胞增殖及在E2刺激下对ERα亚细胞定位的影响．结果表明，ERα呈核多浆少的分布，ER△LBD为核定位．ER△DBD为核多浆少分布，ER△Hinge则主要分布在胞浆．进一步分析表明，E2诱导的ERα入核是核定位序列（Nuclear Location Signal，NLS）依赖性．此外，我们还发现，ERα能够增强293T细胞增殖，且这种促增殖效应可能依赖于ERα在细胞核与胞浆的正常转运．     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的研究紫杉醇(PTX)对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用。方法应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用。结果紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用,其IC50为21.6nmol/L。结论紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用。     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的：研究紫杉醇（PTX）对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用。方法应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用。结果紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用，其IC50为21.6nmol/L。结论紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用。     

紫杉醇对SMMC-7721肝癌细胞的增殖抑制

目的 研究紫杉醇(PTX)对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制的作用.方法 应用MTT法观察紫杉醇对SMMC-7721的生长抑制作用.结果 紫杉醇对肝癌细胞SMMC-77211有明显的生长抑制作用,其IC50为21.6nmol/L.结论 紫杉醇对SMMC-7721有明显的生长抑制作用.     

Exfoliazone通过诱导细胞凋亡抑制HepG2细胞体外增殖

探讨Exfoliazone对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响.采用细胞培养技术,用不同浓度的药物在一定的时间内处理细胞株,应用MTT比色法检测Exfoliazone对HepG2细胞体外生长的抑制作用;4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)荧光染料染色,显示凋亡细胞形态;用Western-Blotting检测聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白的表达;Annexin V/PI双染检测Exfoliazone对HepG2细胞凋亡的影响.Exfoliazone可抑制HepG2细胞的生长,并呈现剂量和时间的抑制,在药物处理24、48和72 h后,半数细胞抑制浓度(IC50)分别为35、16 和8 μmol/L.进一步研究表明,Exfoliazone可诱导PARP切割,细胞出现核质浓集和凋亡小体等典型的凋亡形态学特征,Annexin V/PI染色证实Exfoliazone能诱导HepG2细胞凋亡,并且以早期凋亡为主.Exfoliazone可能通过诱导HepG2细胞凋亡抑制癌细胞的生长.     

卵巢雌激素受体的研究进展

在卵巢的内分泌调控中，雌激素受体发挥着重要的生理作用．近年来，它的分子结构和调控机制等方面的研究取得了长足进步．本文就两种雌激素受体——α受体(ERα)和β受体(ERβ)的发现及其分子结构、分布、调控作用和影响因素等方面对该领域研究进行综述．     

荧光雌酮标记乳癌细胞中雌激素受体的定量研究

本文提出一种估量各类乳癌细胞中雌激素受体相对量的方法。使用这种方法时,乳癌细胞经过荧光雌酮标记处理。荧光标记的乳癌细胞根据其相对辉度(它是以模糊隶属函数来表达的)通过模式识别的技术进行分类。在此以后,用线性估计方法来得到雌激素受体的相对量。根据这种方法,一种临床确定雌激素受体量的细胞化学法可以得到系统化的实现。     

雌激素受体辅助抑制因子REA对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响

雌激素在前列腺癌转移中的作用已有报道,但其作用机制尚不清楚.研究了雌激素受体辅助抑制因子REA在前列腺上皮细胞和前列腺组织中的表达及其对前列腺癌细胞生物学功能的影响.发现在前列腺癌细胞和组织中随恶性程度增加REA的表达逐渐增强.划痕愈合实验证实了REA能够明显促进前列腺癌细胞的迁移,而且其促进作用与雌激素和ER存在着协同作用.这些研究结果为揭示雌激素效应及其受体亚型的表达水平在前列腺癌转移中作用机制的探讨奠定了实验基础.     

新型雌激素受体ERα36在张氏肝细胞和人肝癌细胞中的表达比较分析

研究新型雌激素受体ERα36在人肝细胞和肝癌细胞系中的差异表达具有重要的意义.以张氏肝(Chang Liv-er)、Caveolin-1基因沉默细胞株CAV7、人肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2为实验材料,通过免疫印迹杂交法观察了不同细胞内ERα36蛋白的表达情况,并与典型雌激素受体亚型ERα66蛋白的表达进行了比较.结果发现:(1)几种细胞中均有ERα36蛋白的表达;(2)与张氏肝细胞相比,Caveolin-1基因沉默时ERα36表达明显增加(P0.01);(3)ERα36在SMMC-7721中表达水平较低,而在HepG2细胞中表达水平较高,与ERα66和Caveolin-1的表达水平相关.提示新型雌激素受体ERα36可能参与Caveolin-1介导的雌激素信号转导,而在肝细胞的恶性增殖过程中发挥一定的作用.     

壳寡糖对Hela细胞的增殖抑制与诱导凋亡

为了明确壳寡糖(COS)对Hela细胞的增殖抑制作用及对凋亡的影响,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测增殖抑制作用,Wrights-Giemsa及吖啶橙-溴乙锭(AO-EB)染色观察凋亡细胞的形态,Annexin V-FITC/PI法检测凋亡率,免疫组化法分析Bax,Bcl-2和Survivin表达量变化.结果显示:不同浓度COS处理Hela细胞均能抑制增殖,5.0mg/mL并作用24h对其增殖抑制率为52.15%(P0.01).Wrights-Giemsa染色显示细胞形态趋近圆形,贴壁能力减弱,出现凋亡小体.AO-EB染色时细胞出现早期和晚期凋亡现象.AnnexinV-FITC/PI检测细胞凋亡率为31.75%(P0.05).免疫组化分析细胞内Bax表达量增加,Bcl-2和Survivin表达量降低.表明COS能够抑制Hela细胞增殖并诱导凋亡,其原因与Bax的上调和Bcl-2与Survivin的下调相关.     

靶向多肽R8-HBAP抑制成人T细胞白血病细胞恶性增殖

成人T细胞白血病(Adult T-cell leukemia,ATL)是与人类T淋巴细胞白血病1型病毒(Human T-cell leukemia virus type 1,HTLV-1)感染密切相关的恶性淋巴细胞白血病.HTLV-1反义编码的HBZ(HTLV-1 b ZIP factor)蛋白在ATL发生过程中扮演极为重要的角色.为了寻找治疗成人T细胞白血病的方法,设计了能与HBZ蛋白形成二聚体,从而封闭HBZ蛋白功能的靶向多肽R8-HBAP.通过免疫共沉淀实验,发现R8-HBAP可以有效抑制HBZ蛋白与下游靶蛋白c-Jun的结合,报告基因实验显示,R8-HBAP能阻遏HBZ蛋白对AP-1信号通路的调控作用.MTT和流式细胞术实验发现,R8-HBAP能抑制ATL细胞的恶性增殖并促进细胞凋亡.因此,靶向多肽R8-HBAP通过阻遏HBZ蛋白的功能从而抑制白血病细胞的恶性增殖,为R8-HBAP的开发利用及成人T细胞白血病的治疗提供一定的实验依据.     

生长抑素类似物通过细胞生长抑制和细胞溶解途径以SSTR2依赖的方式抑制癌细胞增殖

通过在两个具有不同内源性生长抑素受体(SSTR)表达谱的癌细胞系capan-2和A549中过表达SSTR2,用生长抑素类似物(SSA)奥曲肽或者伐普肽(RC-160)处理实验组的癌细胞,对过表达SSTR2和生长抑素类似物的抗肿瘤增殖效果通过细胞增殖实验进行了研究,而且进一步通过免疫印记的方法研究了SSA/SSTR2涉及的信号通路.结果表明,过表达SSTR2明显抑制了内源性SSTR2表达阳性和阴性癌细胞增殖,而单独使用奥曲肽或者伐普肽对癌细胞增殖影响甚微.然而,在过表达SSTR2的癌细胞中奥曲肽或者伐普肽则可明显抑制癌细胞的增殖,而且具有剂量依赖性.深入研究发现SSA/SSTR2是通过细胞周期阻滞和促凋亡来抑制细胞增殖.结果提示SSTR2可作为候选基因用于本身SSTR2表达阳性或阴性肿瘤的基因治疗,细胞内SSTR2的水平可能是影响肿瘤进程和SSA治疗效果的一个关键因素.     

GPR41稳定细胞株的建立及受体激动剂筛选

构建GPR41稳定细胞株,从RNA、蛋白水平验证了GPR41的表达并利用cAMP和钙流检测验证了GPR41的生物活性.实验结果表明,该细胞株可以用于筛选受体激动剂.从海藻来源的黄曲霉中提取到的次级代谢产物用于筛选GPR41的激动剂.实验结果还表明,2-吡喃酮类化合物(37号)在1μmol/L浓度条件下即可具有GPR41受体激动活性.这是首次报道2-吡喃酮类化合物具有GPR41受体激动活性.     

子宫平滑肌细胞雌,孕激素受体含量在性周期中的变动

采用放射免疫法（ＲＩＡ）检测大鼠在动情周期中再侧子宫角胞浆中雌、孕激素受体的含量，结果表明，大鼠在动情周期中子宫胞浆雌，孕激素受体含量呈周期性变化，与血清孕酮水平呈一定的对应关系，但两侧子宫胞浆雌，孕激素受体含量在各期无明显差异，提示大鼠可作为一种甾体激素受体测定的理想同体对照实验模型。     

当归注射液对兔主动脉平滑肌细胞中增殖细胞核抗？…

目的：观察当归注射液地平滑肌细胞（ＳＭＣ）中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的影响。方法：Ｅ和免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测培养的兔主动脉ＳＭＣ中ＰＣＮＡ的表达,同时测定培养液中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、前列环素（ＰＧＩ２）及环磷酸腺苷的含量。结果：当归注射液能增加ＳＯＤ活性,降低ＬＰＯ和升高ＰＧＩ２、ＣＡＭＰ水平,抑制ＳＭＣ中ＰＣＮＡ的表达。结论：当归有抑制ＳＭＣ增殖的作用。     

雌激素受体与男性骨质疏松的研究进展

男性骨质疏松严重威胁着老年男性的生存质量。引起男性骨质疏松病因是多方面的,雌激素缺乏和雌激素受体缺陷是重要因素之一。雌激素受体分为ER-α和ER-β二种亚型,但它们为不同的基因产物。雌激素与ER-α和ER-β结合,通过不同的途径作用于骨组织,影响成骨细胞和破骨细胞,调节骨的代谢。基因突变可能是引起骨质疏松的遗传因素。近年来,用雌激素受体调控剂治疗男性骨质疏松获得了较为满意的效果。通过对雌激素受体的研究为治疗和预防男性骨质疏松打下了良好的基础。     

GADD45β过表达抑制膀胱癌细胞T24的增殖

GADD45β(growth arrest and DNA damage,GADD)在肿瘤的发生、发展以及凋亡过程中起着重要作用。首先利用Real-time quantitative(qPCR)检测到32μg/mL巴西苏木素处理人类移行膀胱癌T24细胞6h后,GADD45β的mRNA水平显著上调2.7倍。为了研究GADD45β在巴西苏木素致死T24细胞中的作用,从T24细胞的cDNA中扩增获得GADD45β基因全长读码框,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,构成重组载体pcDNA3.1-GADD45β。将该真核表达载体转染T24细胞,发现GADD45β在mRNA水平的表达显著上调,表明真核表达载体成功转入T24细胞;观察GADD45β过表达后对肿瘤细胞的影响,发现细胞变圆,贴壁性变差,活性显著降低85%。本研究表明GADD45β在T24细胞中的过表达能有效地抑制细胞生长,对细胞有较强的致死作用。     

款冬花中抑制肺癌细胞LA795增殖的活性成分研究

分析研究了款冬花中具有抑制肺癌细胞增殖的活性成分.以小鼠肺腺癌LAL795细胞为体外抑瘤筛选模型,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,结合硅胶柱色谱,Sephadex LH-20,PHPLC等手段追踪分离款冬花抗肺癌的活性成分.并通过理化和波谱分析方法鉴定了单体化合物的结构.它们分别是:1,2-di-(3',4'-dihydroxycinnamoyl)-cychopenta-3-ol,(Ⅰ)、芦丁(Rutin,Ⅱ)、山奈酚(Kaemferol,Ⅲ)、槲皮素(Quercetin,Ⅳ)、异槲皮苷(Isoquercitrin,Ⅴ).其中(Ⅰ)为新化合物,化合物(Ⅴ)为首次从款冬花中分离得到.并采用MTT法对分得的化合物进行抑制LA795细胞株增殖作用的研究,用半数抑制浓度(IC)评价其抗肿瘤活性.结果表明化合物Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ对小鼠肺腺癌细胞LA795的增殖都显示出一定的抑制作用.其中化合物Ⅰ和Ⅳ抑瘤作用较显著.IC50分别为125.2和83.2μg/mL.这些化合物抗肺癌细胞增殖活性为款冬花中首次发现.     

当归注射液对兔主动脉平滑肌细胞中增殖细胞核抗原表达的影响

目的：观察当归注射液对平滑肌细胞（ Ｓ Ｍ Ｃ） 中增殖细胞核抗原（ Ｐ Ｃ Ｎ Ａ） 表达的影响。方法：用免疫组织化学 Ｌ Ｓ Ａ Ｂ 法检测培养的兔主动脉 Ｓ Ｍ Ｃ 中 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 的表达,同时测定培养液中超氧化物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ） 、脂质过氧化物（ Ｌ Ｐ Ｏ） 、前列环素（ Ｐ Ｇ Ｉ２） 及环磷酸腺苷（ｃ Ａ Ｍ Ｐ） 的含量。结果：当归注射液能增加 Ｓ Ｏ Ｄ 活性,降低 Ｌ Ｐ Ｏ 和升高 Ｐ Ｇ Ｉ２ 、ｃ Ａ Ｍ Ｐ 水平,抑制 Ｓ Ｍ Ｃ 中 Ｐ Ｃ Ｎ Ａ 的表达（ Ｐ＜ ００５ ～００１） 。结论：当归有抑制 Ｓ Ｍ Ｃ 增殖的作用。     

三种中草药对人肝癌细胞SMMC7721体外增殖抑制

采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和细胞凋亡形态观察,初步探讨白英、毛麝香和使君子3种中草药的醇提物对肝癌细胞SMMC7721体外增殖的抑制效果.结果表明,白英醇提物对肝癌细胞SMMC7721有很强的抑制作用,当抑制率为50%时,样品的质量浓度(ρ50)达到25.85 mg·L-1,且经50 mg·L-1作用72 h后,细胞逐渐变圆,体积缩小,有凋亡小体形成,呈典型的凋亡现象;使君子、毛麝香的醇提物对细胞抑制作用较弱, 在药物质量浓度达到100 mg·L-1时,对SMMC7721细胞的抑制率分别为43.88%,20.88%,二者的ρ50均大于100 mg·L-1.