聚合酶链反应技术在实验动物微生物检测中的应用

聚合酶链反应技术在实验动物微生物检测中的应用姚玉霞丛斌刘福英徐增年河北省实验动物中心（石家庄０５００１７）随着现代生命科学技术的发展,聚合酶链反应（简称ＰＣＲ）技术近几年来得到了迅速发展。ＰＣＲ是一种在体外模拟自然ＤＮＡ复制过程的核酸扩增技术,即无细...     

湖南省实验动物病毒检测及检测方法比较

湖南省实验动物病毒检测及检测方法比较李虹，陈宝珠湖南省卫生防疫站（长沙，４１０００５）根据卫生部颁布的“医学实验动物标准”和“医学实验动物监测手册”中病毒检测方法，结合湖南省的具体情况，我们用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、玻片免疫酶试验（ＥＩＡ）、...     

解放军总医院清洁级实验动物房的环境检测

解放军总医院清洁级实验动物房的环境检测李双良赵慧生乔伯英赵双和祝京援解放军总医院实验动物中心（北京１００８５３）环境对实验动物饲养、管理和动物实验的影响一直是生物医学研究的重要领域,这是因为实验动物不仅在生物学特性表达与其所处的环境紧密相关,而且动物...     

谈持续改进实验动物质量检测管理体系的若干措施

党的十六大明确提出:“发展要有新思路,改革要有新突破,开放要有新局面,各项工作要有新举措。”组织认证后的实验动物质检机构,如何加强自律意识,持续保持认证的有效性,确保质量体系的高效运转,是一个至关重要的问题。实验动物认证部门按规范化的准则对实验动物各质检机构进行计量认证、质量审查,评审内容、评定方法等的检查越来越细致、完备合理,但如何敦促各质检机构在取得认证合格证书后,摈弃惰性、保证《质量管理手册》的落实与完善,进入一种全面的、良性循环的运作机制,需出台一些激励与管理措施。本文将结合认证、评审后的实际情况,阐…     

实验动物细菌检测中的生物安全控制与预防

实验动物细菌检测中的生物安全必须得到有效地控制与预防,才能确保实验动物细菌质量检测工作的顺利 进行。从“选择合适的操作技术、防散设备和设施;检测工作中的生物安全的有效处理措施;实验室主管在生物安 全保障中的作用”这三大方面进行分析,阐明了实验动物细菌检测中生物安全得到有效控制与预防的必需措施与 重要性,进而实验动物细菌质量控制就有了有力的保障。     

推动山西省实验动物工作上新台阶

文章介绍了山西省在推动实验动物工作方面的指导思想与近年来取得的成绩     

分子生物学技术在实验动物遗传检测中的应用

九十年代以前,实验动物的遗传检测技术主要以形态学标记、细胞遗传学标记、免疫学标记以及生物化学标记为主。九十年代以后,随着分子生物学技术的飞跃发展,特别是对生命信息物质ＤＮＡ的深入研究,出现了一些新技术,其中一些技术已应用到实验动物的遗传检测上,这将使...     

2017年10月北京市啮齿类实验动物的病理检测

目的 通过检测北京市啮齿类实验动物的病理变化,为北京市实验动物质量监控及改进提供依据。方法 对送检的400只啮齿类实验动物,其中包括180只小鼠、80只大鼠、120只豚鼠及20只金黄地鼠,采集心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠,制成石蜡切片后进行HE染色,对镜检肝细胞肿胀的样品又分别进行了PAS染色和冰冻切片油红O染色,并于显微镜下观察。结果 此次进行实验动物质量的抽检,检出病变主要为小鼠、大鼠、豚鼠均出现不同程度的肝脏细胞肿胀,并均有糖原沉积病变检出,脂肪变性在豚鼠检出;此外小鼠及金黄地鼠,尤其是部分金黄地鼠出现明显肝脏坏死及炎性细胞浸润;小鼠和豚鼠的心脏发生增生性炎;小鼠肾脏炎性细胞浸润。结论 本次抽检的啮齿类实验动物基本健康,部分啮齿类动物的饲养管理仍需加强,本监测结果可为科研实验的准确性提供可靠有效的依据。     

大理地区精神病患者弓形虫感染情况调查

目的：了解大理地区精神病患者弓形虫感染情况,探讨弓形虫感染与精神疾病之间的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验对219例精神病患者及91例健康体检者进行血清弓形虫IgG抗体检测。结果：精神病患者弓形虫抗体阳性率为31．96％,健康体检者为20．88％,两者之间差异显著（P〈0．05）。结论：本地区精神病患者弓形虫抗体阳性率高于健康人群。临床医务工作者应加强对弓形虫病的认识,重视精神病患者的弓形虫感染情况．对门诊和住院病人进行常规弓形虫检测。     

老鼠和人对抗弓形虫感染的先天免疫应答研究概况

白细胞介素12(IL-12)和干扰素γ(IFN-γ)是弓形虫感染刺激机体先天防御系统所产生的两个关键性细胞因子,其信号是通过To1l样受体(TLR)介导的髓样分化因子(MyD88)依赖途径来激活早期的先天免疫反应.研究证实TLR 11在应答弓形虫感染过程中起着主要作用,但是它在人体中仅仅只是个假基因.因此,在缺失TLR11的情况下,人体受到弓形虫感染后如何引发先天性免疫和获得性免疫应答反应还需进一步研究.该文就人和老鼠体内对寄生虫防御起作用的感知分子和效应分子的相似性和区别进行探讨.     

抗弓形虫噬菌体单链抗体库的构建及筛选

采用弓形虫可溶性抗原攻击的小鼠,取小鼠脾脏从中提取细胞总RNA,通过RT-PCR扩增鼠源抗体VH和VL基因,并采用重叠PCR (SOE-PCR)方法构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载体pCANTAB5E中,转化于感受态大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.从20个噬菌体克隆中筛选到15个具...     

H-2基因检测方法在北京市实验动物遗传质量抽检中的应用

目的为贯彻实施新国标,通过检测小鼠H-2单倍型,确认近交系小鼠免疫遗传质量。方法依据新国标GB/T14927.2-2008中的微量细胞毒检测方法,检测北京地区主要生产厂家的BALB/c和C57BL/6小鼠共70只的H-2单倍型。结果共抽检4个单位的BALB/c和C57BL/6近交系小鼠70只,经检测BALB/c为H-2Dd和H-2Kd,C57BL/6为H-2Db和H-2Kb,符合率100%,质量符合要求。结论经抽检,北京地区主要生产厂家2个品系小鼠免疫遗传质量合格。     

RH株弓形虫抗原及高效价多克隆抗体的制备

通过制备和分析弓形虫抗原蛋白，并以此抗原制备高效价的兔抗弓形虫多克隆抗体，为弓形虫的免疫检测和诊断提供有效的方法和途径，同时也为基因工程产物的鉴定提供方便有效的检测手段．速殖子主要来源于感染后72～74h获得的腹水，通过常规方法制备和提纯弓形虫可溶性抗原，采用SDS-AGE方法分析抗原蛋白的分子量．以抗原和福氏佐剂制备成完全和不完全福氏佐剂通过脊柱两旁皮下多点免疫的途径免疫新西兰大白兔，制备兔抗弓形体多克隆抗体，间接ELISA法检测血清中抗体的效价．经过观察所获得的虫体阶段主要处在宿主细胞巨噬细胞内而尚未逸出阶段，通过对结果的分析，所制备的弓形体抗原的分子量主要集中在17～156ku之间，与文献报道有差异，兔抗弓形体抗体效价在60000以上．该研究结果将为弓形体的蛋白质研究，免疫诊断、预防及有效治疗奠定基础．     

RAPD技术在实验动物中的应用

随着生物医学的发展 ,实验动物种质资源的保护和利用、实验动物的标准化问题已成为当今实验动物科学发展的主题。实验动物遗传背景分析、品种或品系的鉴定、引种和繁育均需要一定的遗传标记辅助完成 ,分子遗传标记作为一种有效精确的监测手段 ,突破了形态学标记、细胞学标记和同功酶标记等表达型标记的局限性 ,可以从分子水平揭示物种的遗传变异 ,在许多领域发挥着独特的作用。RAPD技术是 1990年被首次提出 ,由于该方法具有简便、快速、成本低、信息含量丰富等特点 ,在生物类群种属分类鉴定、遗传图谱构建、物种亲缘关系的确定以及种群遗…     

实验动物科学和服务组织

与生物医学研究发展一样 ,实验动物科学和服务组织在过去的 4 0年也在不断演变和发展。人们对动物质量的更高要求以及对动物福利的深切关注就是这些组织发展的动力 ,同时 ,也给实验动物科学领域的工作人员给予了极大的支持。最早的实验动物组织于 2 0世纪 5 0— 6 0年代在北美、日本和欧洲建立 :195 0年的AALAS(以前的ACP)195 2年的JALAS ,196 3年的LASA ,196 7年的ICLAS ,还有 196 8年建立的CCAC。之后 ,随着亚洲、美洲中部和南部等其他国家生物医学研究水平的不断提高 ,全世界新的实验动物科学和服务机构也飞速地发展起来。国…     

鼠腹腔中弓形虫的增殖发育及S.D.对其的影响

对鼠腹腔中弓形虫速殖子的增殖发育的方式、过程及S.D.对其的影响作了详细的考察,结果表明弓形虫的无性生殖方式有内二裂殖、纵二裂殖、裂殖生殖等,虫体以鼠腹腔内巨噬细胞的胞壁作为假包囊壁有其中增殖发育,经过72h的增殖生长,虫体成熟后突破假包囊逸出,S.D.可部分抑制速殖子增殖。     

弓形虫传播模型的稳定性分析

为了研究控制弓形虫病传播的临界值,对疾病进行有效预防,并进行相关的理论分析与研究,针对弓形虫的生活史以及传播途径建立数学模型,分析得到了决定疾病是否继续存在以及传播的基本再生数,当基本再生数小于1时,疾病将逐渐消亡,最终灭绝,当基本再生数大于1时,模型存在唯一的地方病平衡点,此时疾病将一直持续下去,形成地方病。通过建立合适的Lyapunov函数等方法,给出了无病平衡点和地方病平衡点全局渐近稳定的充分条件,同时对建立的数学模型进行了系统、完整的定性和稳定性研究。研究结果对后续弓形虫病的研究及其数学模型的建立有一定的借鉴意义。     

浙江省实验动物现状与对策

浙江省的实验动物科学事业与国际、国内先进水平相比还有差距。建设实验动物的生产供应、应用研究、质量监控、人才培训四大体系组成的公共服务平台是当前浙江省实验动物工作的主要任务。并提出了下一步的工作重点。