酵母自溶动力学及其影响因素研究(Ⅰ)——酵母细胞自溶生物学研究

对啤酒酵母细胞自溶的动力学研究结果表明,在55℃,pH5. 5的醋酸钠缓冲液中,酵母自溶诱导期约为1. 85h;细胞内贮糖原降解最快,蛋白质次之,核酸降解速率最慢。酵母细胞生物大分子的降解自溶存在显著的正协同效应,酵母生理状态对自溶液的氨基酸组份影响极显著(P<0. 01) 。随培养时间延长,相应自溶液中的必需氨基酸、鲜味及苦味氨基酸比例显著增加,因而自溶液的鲜味增浓,营养效价提高,但苦味亦上升。     

啤酒废酵母自溶提取物的制备及抗氧化活性研究

废啤酒酵母具有较高的开发利用价值，本研究以啤酒厂废酵母为材料，通过单因素实验研究其最佳自溶条件及最佳微波水解条件，比较自溶、微波水解与外加酶制剂处理法制备酵母活性多肽的效果，并研究了酵母多肽的抗氧化活性.结果表明，啤酒酵母的最佳自溶条件为固液比1: 20、温度45.0 ℃、pH 6.0、时间48 h；在此自溶条件下，酵母蛋白质被有效水解为多肽，水解度为41.5%，提取蛋白质得率为42%.自溶法制备啤酒酵母多肽的效率与外加酶制剂处理的效果相当，但显著高于微波水解法.自溶法制备的啤酒酵母多肽具有高的抗氧化活性.本研究表明，自溶法是开发利用啤酒厂废弃的酵母和制备酵母多肽的理想方法.     

论啤酒发酵过程中导致酵母死亡及自溶的环境因素

在啤酒酿造过程中,酵母是魔术师,它把麦芽和大米中的糖分发酵成啤酒,产生酒精、二氧化碳和其他微量发酵产物。但是在酵母发酵过程中异存在着导致酵母死亡与自溶的环境因素,在发酵过程中需特别注意对环境因素的控制。     

米曲霉自溶作用的研究Ⅰ.米曲霉的自溶条件

采用多因素试验正交优选法对三株米曲霉的自溶条件进行了系统研究，研究结果表明：自溶的ｐＨ值，自溶温度和氧气状况对米曲霉的自溶作用影响最为显著。     

自溶链霉菌遗传操作研究

放线菌新种自溶链霉菌能够产生一种称为自溶霉素的抗肿瘤活性产物.虽然自溶霉素具有成为抗肿瘤药物的良好前景,但是自溶链霉菌遗传操作方法的缺乏严重阻碍了对自溶霉素生物合成的研究.本工作对自溶链霉菌中各种遗传操作方法进行了探索.优化了PCR扩增的反应体系和程序,建立了外源DNA导入的方法,确立了构建基因敲除突变株的最佳方案.此外,也摸索了自溶霉素发酵和HPLC检测的适宜条件.利用所建立的方法对自溶链霉菌基因almRⅠ和almRⅡ的功能进行了初步研究,结果表明它们在自溶霉素生物合成过程中起正调控作用.自溶链霉菌遗传操作方法的建立为进一步开发利用放线菌资源奠定了基础.     

米曲霉自溶作用的研究：Ⅲ.米曲霉自溶的电镜观察

借助电子显微镜对自溶的米曲霉菌丝细胞的结构进行观察．结果发现,自溶开始后,菌丝细胞发生质壁分离,核及各种细胞器被破坏,质膜破裂,细胞壁上出现孔隙,细胞物质通过孔隙释放出来     

猪胰蛋白酶自溶后的活性产物

酶的催化作用起因于分子中某些部位氨基酸残基的特定空间结构,即“活性部位”的存在。使酶分子发生有限度的降解,观察它对酶活性的影响,乃至分离出具有酶活性的降解产物——“活性碎片”,这是研究酶的结构与功能的关系的方法之一。在这方面,胰蛋白酶特别引人注意,因为在一定条件下,无需外加蛋白酶,胰蛋白酶本身就能发生自溶作用;同时胰蛋白酶的高度的专一性对于确定肽链断裂的位置也是很有帮助的。     

一步自溶法生产ATP的新工艺

新鲜白地霉菌体中核糖核酸(RNA)的含量为5％,白地霉菌体在一定条件下自溶‘菌体中的RNA则降解成为5′—核苷酸溶于溶液中,核苷酸收率按菌体中核酸含量计算为80％左右。5′—核苷酸经离交换柱层析法分离得到—磷酸腺苷(AMP)收率为18。5％。由AMP制得三磷酸腺苷(AM户)的收率为110％,产品ATP含量最高达98.5%,平均在92％左右,经过三年生产实践证实本工艺是有效和切实可行的。     

酵母菌最适生长条件和自溶条件研究

采用正交实验设计,研究了酿酒酵母和扣囊拟内孢霉混合培养的最适条件和菌体的自溶作 用,得到了最佳的条件组合.实验结果表明,酿酒酵母和扣囊拟内孢霉混合培养的最适条件为: 1.5％豆饼,2％玉米粉,28℃,pH 5.0,0.2％酵母膏;酿酒酵母和扣囊拟内孢霉混合菌体的自溶条 件为:pH 5.0醋酸-醋酸钠缓冲液,55℃,0.5％NaCl.     

猪胰蛋白酶及其自溶活性产物的圆二色性研究

用圆二色性谱(CD谱)研究了猪胰蛋白酶及其自溶活性产物在溶液中的构象,并观察了在十二烷基硫酸钠(SDS)溶液中酶分子构象的变化。 猪胰蛋白酶的CD谱显示有相当量的α-螺旋成份及少量β-折叠成份,它在190nm附近的[θ]值远大于牛胰蛋白酶。其自溶活性产物的CD谱显示α-螺旋的成份减少5—6％,β-折叠成份上升3—6％,而有序部分所占比例基本不变,提示自溶后α-螺旋转化为β-折叠。 在SDS溶液中,α-螺旋和β-折叠在胰蛋白酶分子中所占的比例提高,而α-螺旋成份增加更为明显,表明酶分子的有序度提高。 参照Chou与Fasman以及Chen,Yang与Martinez等人的方法,预测猪胰蛋白酶有36％的氨基酸残基可以形成α-螺旋,由实测CD谱计算,亦在37％左右,两者相符。     

活性饲料酵母

活性饲料酵母是湖北省武汉市新州饲料厂在科研单位的协助下研制成功的。产品已通过市级技术鉴定,目前已批量生产。活性饲料酵母是一种含有丰富蛋白质、B族维生素、矿物质以及谷氨酸、蛋氨酸、赖氨酸、门冬氨酸等17种氨基酸、多种消化酶,     

利用啤酒废酵母进行营养型酵母调味品的研究

研究利用啤酒废酵母为原料生产营养型酵母调味品的方法和条件。原料经洗涤、脱苦、自溶、真空浓缩等工序得到含多种营养成分的 ,具有增鲜、增香赋予食品肉香味等功能的、符合国家理化、卫生指标的调味品。该工艺的最佳条件为 :用 0 .5 % (w/w)NaHCO3溶液脱苦0 .5h ,自溶加水量为 2倍 ,自溶剂为 1.0 % (w/w)的食盐并在 (45± 1)℃条件下自溶 4 8h .     

高温链霉菌与细菌的相互作用及其自溶和分枝机制

链霉菌（Streptomyces sp.2)与金黄色葡萄球苏，枯草杆菌之间有相互抑制作用，链霉菌对大肠杆菌有抑制作用，但大肠杆菌则对链霉菌无抑制作用，细菌的存在能诱导链霉菌提前产生可溶性紫色色素，Streptomyces sp.2在5度下，YM，YG，YA培养基上产生细胞自溶的最短培养时间为2天，全部细胞自溶需要5天，在37度下及培养基上全部自溶的时间为8天，Streptomyces SP.1在55度或37度，培养基上细胞全部自溶的时间超过14天，Streptomyces SP.2孢子萌发的时间为4小时左右，产生的菌丝有分节现象，其细小分枝产生在菌丝及孢子的任何部位，低浓度（4mg/L)氨苄青霉素对链霉菌的孢子萌发及生长无影响，链霉菌菌丝在生长延伸时表现出相互靠扰和吸引，形成网络结构，各细胞间相互直辖市，形成一定形状，大小的菌落，在菌落的特定部位产生孢子，表现出一定的社会性。     

硒酵母的研究

近二十年来,人们逐渐认识到微量的硒对生命过程有着重大的作用.如果人体内血硒的含量长期低于0.1PPm,就有可能引起心肌损害、癌症、关节炎等疾病.在美国市场上已出现了补充硒的营养品,大致可分成三类:(一)含有机硒的硒酵母;(二)含无机硒的酵母;(三)含无机硒的维生素C.对人体补充硒的观察表明:含有机硒的硒酵母较易被吸收且无毒,是现有的最适用的一类.但国外关于硒酵母的详细制法未见发表;而我国在防治克由病、大骨节病中系使用亚硒酸钠,到目前为止,亦未见研制硒酵母的报导.     

酵母Mn-transporter基因研究进展

在酵母中有两个锰离子的转运系统 :即高亲和力系统和低亲和力系统 .本文简要介绍了酵母中与锰离子转运有关的基因 :SMF1、BSD2、ATX2、CCC1、PMR1和MNR1及它们所编码蛋白的大小、细胞定位、跨膜域及他们在锰转运中的功能 .文中还比较了几种蛋白之间的关系 .     

人造单染色体酵母

正酿酒酵母是一种单细胞真核生物,其基因组装载在16条染色体上。中国科学院分子植物科学卓越创新中心/植物生理生态研究所合成生物学重点实验室覃重军研究团队及其合作者首次人工创建了单条染色体的真核细胞,这是合成生物学领域具有里程碑意义的突破。两个研究团队用CRISPR基因组编辑技术,将酿酒酵母的16条染色体进行"剪切"和"粘贴",以合成新的染色体。美国纽约大学团队将16条染色体拼     

酵母超氧化物歧化酶的研究

从味精厂发酵废液培养的酵母中分离纯化超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）纯化倍数达１００倍，比活１１１５０ｕ／ｍｇ蛋白，电泳纯，回收率达８０％；每公斤湿酵母菌体产超氧化物歧化酶酶活力达５０万单位．此酶分子量为３７２００，等电点为５．６．     

酵母Elp3在毕赤酵母中的分泌表达及活性测定

酵母Elp3是Elongator复合物的催化亚基,可参与组蛋白乙酰化修饰与基因转录延伸.生物信息学分析及有关研究表明Elp3除组蛋白乙酰转移酶(Histone acetyltranferase,HAT)活性外,可能还拥有组蛋白去甲基化酶活性.本文以yElp3的pYES2yElp3质粒为模板,PCR获得yElp3基因全长,插入改造过的毕赤酵母表达载体pPIC9KH,转化巴斯德毕赤酵母GS115菌株.经表型鉴定、PCR分析及G418筛选获Mut+型多拷贝整合菌,经0.5%的甲醇诱导和Ni-NTA纯化,得到目的蛋白并对其进行体外酶活测定.SDS-PAGE分析表明yElp3在毕赤酵母中实现了高效分泌表达,Western印迹证实得到的蛋白为yElp3.OPA法测得纯化蛋白拥有较好的HAT活性,具有生物活性的Elp3蛋白的获得为体外测定其第二结构域是否有催化活性奠定了基础.     

回用酵母发酵生产甘油

回用酵母发酵生产甘油的发酵周期比一次性菌种发酵短４０～６０ｈ,平均产甘油率（８４６％）、转化率（４１６％）与一次性菌种发酵相当．采用回用酵母、高营养、低初始糖浓度、分批补料的工艺,不仅发酵周期短,而且平均产甘油率达１００２％,转化率达４６％,残糖较低,因此,此工艺对目前许多甘油发酵厂家具有一定应用价值．     

巴斯德毕赤酵母表达系统

巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris,P .pastoris)是一种广泛使用的外源基因表达系统 ,该系统不仅具有高效表达、高稳定、高分泌、高密度生长等特点 ,而且可以对表达产物进行类似真核细胞的翻译后修饰和加工等显著优点。该研究对巴斯德毕赤酵母表达系统的特点及研究进展作了简要的综述