淡色库蚊幼虫微粒体细胞色素P-450与杀虫剂结合光谱研究

文献报道了淡色库蚊(Culex pipiens pallens Coq.)抗拟除虫菊酯品系P_y和敏感品系S幼虫细胞色素P-450——微粒体单加氧酶系的终端氧化酶——差光谱研究的结果。确认P-450水平和性质的变化是抗性产生机制之一,单加氧酶系可以催化各种外源化合物(包括杀虫剂在内)的生物转化,这一反应首先要求底物和氧化态P-450活性部位结合,这是整     

以~(32)P后标记技术研究人血组分在DNA-致癌剂加合物AF-dG形成中的作用

DNA加合物的形成,即致癌剂对DNA分子的共价修饰是致癌的初始作用.绝大多数致癌剂必须先在生物体内酶系催化下形成亲电子的代谢物,然后与靶细胞DNA亲核部位共价结合。报道据,肝脏和一些肝外组织的细胞色素P-450及其他氧化酶系参与基因毒性化合物的生物活化.血液各组分有各种氧化酶活力,人血细胞在外源致癌剂生物活化的作用,     

三化螟越冬休眠幼虫未发现微粒体细胞色素 P450

三化螟(Tryporyza incertulas)曾是水稻最主要害虫之一,近年来在我国南方一些省区危害率又有上升趋势.本文报告人工饲养的三化螟幼虫体内单加氧酶系(又称多功能氧化酶系)的终端氧化酶细胞色素P450的含量及其光谱特性.该酶系的存在情况与多种昆虫抗药性及交互抗性直接有关.实验所用三化螟采自广西来宾,在实验室内用人工饲料连续饲养已达三个世代.实验采用3～4龄幼虫134头,经表面清洁后去头冷冻匀浆,然后用差速离心法制备微粒体,以     

细胞色素P-450模拟体系的活性中间体——第三类型氧合铬(Ⅴ)——四苯基卟啉配合物的分离、表征和氧化反应

氧合过渡金属卟啉配合物是细胞色素P-450模拟体系的可能活性中间体。已分离和表征的钛(Ⅳ)、钒(Ⅳ)、钼(Ⅳ,Ⅴ)和铬(Ⅳ)等氧合过渡金属卟啉配合物,因其不是有效的氧化剂,所以不是细胞色素P-450模拟体系的可能活性中间体。氧合锰(Ⅳ)卟啉虽能氧化碳氢化合物,但至今还未能分离出。我们曾分离出并表征的氧合铬(Ⅳ)卟啉以及     

苯,过渡金属离子与鱼肝微粒体相互作用过程的生物光子发射

生物光子来源于细胞内生物化学过程中产生的电子激态物.在非酶或酶促反应中肝微粒体系统产生这些激态物的条件是:(1)需有过渡金属离子,如Fe~(2+),Cu~(2+)等,或有机过氧化物;(2)不含有被肝微粒体可羟化的物质;(3)存在含NADPH或抗坏血酸的细胞色素P_(-450)/P_(-450)还原酶;(4)含有类脂.苯在肝微粒体或重组的含细胞色素P_(-450)膜中可被羟自由基(·OH)氧化.因此,它是微粒体可羟化物质.与其它水生动物比较,鱼的细胞色素P_(-450)在肝微粒体氧化代谢外源性物质和生物光子发射中起着主导作用.鉴此,本文以不外加NADPH或抗坏血酸而加入苯,构成不满足上述4项条件的Fe~(2+)或Cu~(2+)-鱼肝微粒体系统,通过观测苯与该系     

酶的研究与生命科学(二):氧化酶和ATP酶的研究

生物氧化是机体能量生成的基础,是生命得以维持的基本保证。细胞色素氧化酶的发现开启了现代生物氧化研究的序幕:一方面鉴定了大量氧化酶,从而充实了氧的利用特征;另一方面脱氢酶及辅助因子的鉴定进一步理解了生物氧化的本质为氢与氧结合生成水,同时释放能量促使ATP生成的过程。ATP合酶和Na+,K+-ATP酶的发现推动了对ATP生成和利用机制的研究。许多酶的催化都需要ATP的辅助,如泛素连接酶等,相关研究拓展了对细胞内物质代谢的认识。笔者通过生物氧化(亦称生物能学)发展过程的介绍而展现氧化酶和ATP酶的重要性。     

烟碱乙酰胆碱受体序列的比较统计分析:受体的分子识别从头法研究

烟碱乙酰胆碱受体(nAChRs)不仅是医药研究领域的重要靶标,也是目前农业领域中广泛使用的新烟碱类杀虫剂(neonicotinoids)的作用靶标.新烟碱杀虫剂能选择性地作用于昆虫,而对脊椎动物毒性较低.这种不同种属     

细胞色素P450 配体通道的研究进展

细胞色素P450 (CYP)是一类含亚铁血红素的酶, 不但能催化内源性底物的生物合成和代谢, 而且对外源性化合物的代谢、激活以及降解毒性等起着重要作用. P450 也是人体内最主要的药物代谢酶, 能催化代谢约75%的临床药物. 已有的P450 酶晶体结构显示, 绝大多数酶呈现闭合的构象, 其催化活性位点位于血红素上方且深埋于蛋白质的中心, 没有明显的通道用于配体进出活性中心. 因此一个有趣而重要的问题是, 配体如何进出酶的活性中心达到被氧化或发生抑制作用? 近年来, 关于P450 酶配体通道的研究取得了显著进展. 本文重点综述了通道研究的实验方法及6 类P450 酶可能存在的通道和作用机制, 并对其未来的发展方向进行了展望.     

昆虫抗药性的产生和发展——新的启示和新的探索方向

昆虫抗药性是指在某一品系昆虫中发展形成的对一定剂量杀虫剂的抵抗或耐受能力,对同一物种的正常群体来说,它们中的绝大多数在上述剂量水平是致死的。昆虫抗药性是随着杀虫剂的广泛应用而逐步发展的,自从1914年梅兰德(Melander)报道美国的梨园盾蚧对石灰硫磺合剂产生抗性以来,抗性昆虫种数逐年增加,据1980年的一个统计,全世界已正式报道的产生抗性的昆虫已达432种。抗性的产生影响人们对害虫进行有效的化学防治,不仅造成严重的经济损失,而且带来严重的环境问题。我国山东棉区自1980     

花生四烯酸及其衍生物在肺动脉高压发生发展中的作用

花生四烯酸(AA)是全顺式-5, 8, 11, 14-二十碳四烯酸,可以通过环氧化酶(COX)、脂氧合酶(LOX)和细胞色素P450酶(CYP)途径合成多种花生四烯酸衍生物,在病理性和生理性的血管重构中发挥重要作用。肺动脉高压(PAH)是以肺动脉阻力进行性增大,肺动脉压力上升,最终导致右心衰竭甚至死亡为主要特征的病理过程,肺血管收缩、血管重构和血管栓塞是PAH重要的病理基础。文章总结了花生四烯酸及其衍生物在PAH发生发展中的作用及其机制,为治疗PAH和发现新药物靶点提供思路。     

用重组杆状病毒在昆虫细胞中表达苏芸金杆菌的δ-内毒素基因

昆虫杆状病毒(IBV)是防治农林害虫的生物杀虫剂,由于其杀虫速度慢、宿主范围窄,限制了它的使用。从80年代初开始,人们不得不转向利用IBV的多角体蛋白基因(ocu)构建转移载体,表达外源基因。80年代后期,学者们再次用基因工程技术把IBV的研究转到了杀虫剂方面。     

磁场对酪氨酸酶催化活性的影响研究

酪氨酸酶(Tyrosinase)又称多酚氧化酶,广泛存在于人、动物、植物和微生物中,是催化与生物体内黑色素的形成有关的一种含铜氧化酶.该酶分子中含有两个铜离子的结合位置,铜离子存在与催化活性有直接的关系.磁的生物学效应很早就引起了人们的关注,科学家们都试图从各种不同的角度对磁的生物效应进行观察和研究,曾经有人研究了核磁共振对水稻生长发育和增产效应,马逸龙采用生物传感器测定了H场磁化水对细胞内几种酶的活性影响.本文选用了广泛使用的H场磁化杯和流体磁化器,在相同的实验条件下,首次比较研究了两种磁场磁化器对酪氨酸酶催化底物DL-3,4-二羟基苯丙氨酸活性的影响.这一研究对于揭示磁场对生物体系内活性物质的生物活性影响及磁的生物效应有重要的理论价值和实际意义.     

小鼠艾氏乳腺癌腹水细胞质膜质子泵活性研究

生物换能膜(如线粒体、叶绿体及细菌质膜)中分布有电子传递链酶系和H~+-ATP酶,它们都具有质子泵的功能。电子传递、质子转移和能量偶联的ATP合成三者的相互关系一直是生物能力学研究的中心问题。但是,近年来在若干动物、植物和真核微生物细胞质膜也发现广泛分布有电子跨膜传递与质子转移相偶联的氧化还原系统(图1)。这样的偶联系统,当外部     

Mg~(2+)影响磷脂流动性的激光拉曼光谱研究

前曾报道Mg~(2 )对猪心线粒体H~ -ATP酶及细胞色素氧化酶在脂质体重组中的影响,提出Mg~(2 )很可能是通过影响膜脂流动性来影响酶的构象,从而呈现较高的酶活性。本文利用拉曼光谱进一步研究了Mg~(2 )对磷脂流动性的影响,比较了它对两种磷脂:双棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC),和双棕榈酰磷脂酸(DPPA)分散体的物理状态的影响,两者所含的脂肪     

授粉生物正面临着威胁

正●一家肩负着监测全球生态系统健康的国际科学机构刚刚发布了其首份研究报告。报告警告说:全球授粉昆虫和动物数量的不断减少正在威胁农作物的生产。生物多样性和生态系统服务政府间科学政策平台(IPBES)关于授粉生物的报告于2016年2月26日在吉隆坡的会议上发布。降低杀虫剂的使用,并使用其他的方式控制害虫,可以减少授粉生物对杀虫剂的接触。报告同时建议,农民应采取对生态系统友好的耕种技术,比     

呼吸分析法查癌

美国芝加哥大学一名学者发明了一种呼吸试验法,可以用来测量人体内一种称为 P_1-450细胞色素的酶团的量。目前他正用此法探索体内酶量与患癌倾向的关系。给被测人喝一杯加有用碳-13合成的咖啡因饮料(刺激 P_1-450的产生),在体内酶的分解下,咖啡因中的碳-13     

Mg~(2+)对猪肾外髓质Na~+,K~+-ATP酶在脂质体重建的影响

近年来,重建技术被广泛应用于研究膜蛋白的结构与功能及其与膜脂的相互关系。前曾报道,Mg~(2+)等二价金属离子对猪心线粒体H~+-ATP酶、细胞色素氧化酶等膜蛋白在脂质体的重建具有明显的促进作用。本文对Mg~(2+)影响猪肾外髓质Na~+,K~+-ATP酶在脂质体的重建初步进行了探索。     

P450酶活性中心催化1,2-二溴-3-氯丙烷的机理及动力学同位素效应

发展有毒物质被细胞色素P450酶催化转化途径和机理的计算毒理预测方法,对于污染物的风险评价具有重要意义.本研究通过密度泛函理论计算,揭示了细胞色素P450酶活性中心(CpdI)催化氧化1,2-二溴-3-氯丙烷(DBCP)的反应机理,并考察了动力学同位素效应的影响.结果显示,DBCP羟基化反应与烷烃羟基化反应机理存在明显差异.不同于一般的双态反应,DBCP羟基化反应是自旋选择性反应.此外,DBCP羟基化第二步反弹过程中的能垒明显的高于烷烃羟基化过程.自旋密度分析表明,DBCP羟基化反应的氢提取步骤是一个氢原子转移过程.DBCP羟基化反应具有明显的动力学同位素效应(KIE),且温度和隧道效应对KIE值具有明显的影响.本研究可为卤代烷烃类化合物的生物转化预测提供理论依据.     

柞蚕饰腹寄蝇(Blepharipa tibialis Chao)细胞色素P-450的研究

柞蚕饰腹寄蝇是寄生在柞蚕幼虫体内使寄主致死的大害虫。我国首先发现能有效地防治这种害虫而对蚕无害的杀虫剂为“灭蚕蝇”。我们曾报道了“灭蚕蝇”具有明显选择毒性的原因,可能主要是对这两种昆虫神经系统中乙酰胆碱酯酶的抑制有明显的差异,即对寄蝇该酶的抑制效力比对柞蚕的酶要大几十倍,其次是柞蚕体内存在酰胺水解酶,使“灭蚕蝇”部分解     

细胞色素酶2D6的分子对接以及分子动力学研究

细胞色素酶P450是人体内重要的药物代谢酶. 通常, 这类酶在其结构中都含有一个亚铁血红色分子, 并且负责代谢超过90%的已知药物分子. 细胞色素酶2D6是这类酶中的重要一员, 它负责代谢大约20%~30%的已知药物分子. 利用分子对接和分子动力学模拟的方法, 研究了细胞色素酶2D6的结构特征以及其与药物分子之间的相互作用. 并且发现, 细胞色素酶2D6活性位点中的Glu216, Asp301, Ser304和Ala305在其与药物分子的相互作用中有着重要的作用. 它们可以形成一个或者多个氢键来固定药物分子. 同时其活性位点中的Phe120可以通过形成一定的Π-Π相互作用来识别和固定药物分子. 这些发现有助于进一步了解细胞色素酶2D6的结构特征, 特别是其活性位点附近的结构特征, 理解细胞色素酶2D6代谢药物的机理. 同时, 由于细胞色素酶2D6存在着单核苷酸多肽性, 所得到的结果可以为个性化医疗提供一定的理论基础.