共价修饰的辣根过氧化物酶及其在酶传感器中的应用

将介体对甲酰苯基二茂铁（ＦＰＦ）与辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）共价结合,然后同单体吡咯一起电聚合到铂电极上,再通过戊二醛将葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ）交联固定在电极上,制成共价修饰的ＨＲＰ／ＧＯＤ介体酶传感器。共价修饰的酶传感器响应电流增大,底物测试范围０～４０ｍｍｏｌ／Ｌ,电极稳定性增强。     

辣根过氧化物酶修饰电极的研究进展

过氧化物酶修饰电极在H2O,芳香胺,酚类,葡萄糖等物质的测定中有着很重要的作用,所以近年来得到了较为广泛的研究和发展,本综述重点介绍了辣根过氧化物酶修饰电极的检测原理,制备方法及其应用,比产全面地总结了近十几年来辣根过氧化物酶修饰电极的研究和应用情况,并展望了其发展前景,引用文献73篇。     

锇聚合物修饰丝网印刷电极的辣根过氧化物酶传感器

酶生物传感器检测环境污染应用前景良好。该文采用戊二醛-牛血清白蛋白交联法将锇-聚乙烯基吡啶(Os(bpy)2(PVP)10Cl2,Os-PVP)与辣根过氧化物酶(HRP)依次固定在丝网印刷电极上,制备电流型过氧化氢生物传感器。通过循环伏安法对修饰电极的氧化还原性质进行研究,并采用计时-电流法对传感器的固定化和工作参数进行了研究,以便提高信号响应的灵敏度和稳定性。在最适合条件下,底物在修饰电极表面进行催化反应的表观Michaelis-Menten常数kampp为1.79 mmol/L,并确定以HRP酶为标记物的免疫传感器所采用的底物浓度宜大于20倍的kmapp。     

锇聚合物修饰丝网印刷电极的辣根过氧化物酶传感器

酶生物传感器检测环境污染应用前景良好。该文采用戊二醛-牛血清白蛋白交联法将锇-聚乙烯基吡啶(Os(bpy)2(PVP)10Cl2,Os-PVP)与辣根过氧化物酶(HRP)依次固定在丝网印刷电极上,制备电流型过氧化氢生物传感器。通过循环伏安法对修饰电极的氧化还原性质进行研究,并采用计时-电流法对传感器的固定化和工作参数进行了研究,以便提高信号响应的灵敏度和稳定性。在最适合条件下,底物在修饰电极表面进行催化反应的表观Michaelis-Menten常数kampp为1.79mmol/L,并确定以HRP酶为标记物的免疫传感器所采用的底物浓度宜大于20倍的kmapp。     

聚苯胺二茂铁甲酸修饰的酶传感器的研究

用苯胺作为修饰膜 ,研究了苯胺 GOD和中介体的电化学共聚合 ,得到了较好性能的酶传感器     

苯醌介体修饰的葡萄糖生物传感器

用聚氯乙烯将苯醌修饰在玻碳电极的表面 ,再用牛血清白蛋白和戊二醛将葡萄糖氧化酶固定在电极上 ,制备成葡萄糖传感器 .糖的浓度在 5 .0× 10 -4 ～ 1.1× 10 -2 mol·L-1范围内有良好线性关系 .响应时间为 3min .蔗糖、尿素和氨基酸等 19种化合物无干扰 ,寿命 2 0d以上 .     

辣根过氧化物酶在钛酸纳米管修饰玻碳电极上的直接电化学研究

采用循环伏安法研究证明了辣根过氧化物酶在钛酸纳米管修饰玻碳电极上的直接电化学.结果显示:在磷酸缓冲溶液中,辣根过氧化物酶在钛酸纳米管修饰的玻碳电极上呈现出一对良好的氧化还原峰.紫外-可见光谱数据表明,在钛酸纳米管存在的条件下,辣根过氧化物酶的构象基本保持不变,说明钛酸纳米管对辣根过氧化物酶具有良好的生物相容性.此外,电化学结果表明,该修饰电极能够有效地催化双氧水的还原.     

辣根过氧化物酶在酚类废水中的应用

辣根过氧化物酶(HRP)是一种重要的含血红素酶,具有结构特殊、酶源丰富、性质稳定、价格低廉等优点,在众行业中用途广泛。本文综述了辣根过氧化物酶的特性、作用机理及辣根过氧化物酶处理酚类废水的应用,并对现存问题和解决途径进行了探讨。     

无酶葡萄糖电化学传感器的研究进展

综述了无酶葡萄糖电化学传感器的检测机理,基于贵金属、过渡金属和掺杂碳纳米材料的复合材料等修饰的无酶葡萄糖传感器的研究进展,以及新型可穿戴无酶葡萄糖检测设备的最新进展.随着科学技术的发展,无酶葡萄糖传感器将有可能应用于动植物体的活体检测,这将成为新近研究的热点.     

修饰的弹性酶在保健食品中的应用

用活化的右旋糖苷 (MW =4 0 0 0 0 ) ,对弹性蛋白酶进行化学修饰 ,修饰后的酶在常温下 18个月活力保持不变。制成保健胶囊 ,活力损失少 ,效果好 ,适用于大规模生产 ,前景良好     

纳米ZnO固载辣根过氧化物酶及其降解酚类化合物研究

目的 利用纳米材料固载辣根过氧化物酶并对固载酶性质及应用进行研究.方法 运用电镜,红外光谱法表征材料,用紫外光谱法检测固载化HRP活性.结果 固载酶在碱性环境中活性比游离酶平均高40%,60℃反应体系里仍然能维持45.3%活性,保存50 d后活性为35.8%,用于降解苯酚与氯酚时去除效率分别为87.3%和65.4%.结论 实验证明了纳米ZnO能够固载辣根过氧化物酶,所得固载酶应用于降解苯酚、氯酚水溶液时催化效率比游离酶分别提高39.68%和21.56%.但是,固载化HRP的重复利用性较差,4次循环使用后基本失活.有必要进一步探索优化固载与催化条件,提高固载酶重复利用性.     

2-氨基乙硫醇在玻碳电极表面的共价键合及其对尿酸的痕量测定

采用电化学氧化法将2-氨基乙硫醇共价键合在玻碳电极表面,并采用X-射线光电子能谱和电化学方法对其进行了表征．2-氨基乙硫醇修饰的玻碳电极对尿酸显示出较好的催化氧化作用,表现在尿酸氧化过电位的负g（230mV）和峰电流的增加．并且,尿酸的氧化峰电流在8．0×10^-6～2．0×10^-4mol／L内随尿酸浓度的增加而线性增大,相关系数为0．9976,检测限为4．8×10^-7mol／L．该法被成功地用于人尿中尿酸含量的测定．另外,该修饰电极可将常规电极上尿酸和抗坏血酸重叠的氧化波进行有效的分离,由此,该法有望用于两者的同时测定．     

水-有机溶剂混合体系中辣根过氧化物酶的催化反应

运用分光光度法和傅立叶变换红外光谱研究了辣根过氧化物酶（HRP）在甲醇、乙腈和二氧六环与水互溶溶剂体系中的性质变化,研究结果显示不同种类和含量的有机溶剂都使HRP有不同程度的失活,HRP在有机溶剂中的米氏常数（Km）增大了,但HRP的活性点结构没有遭到破坏,只是将活性部位从一个包埋于酶分子内部的、疏水的环境暴露于极性的有机溶剂中．傅立叶变换红外光谱研究结果显示在有机溶剂中酶分子的二级结构发生了变化,推测可能是酶在有机溶剂中的活性降低的原因．     

辣根过氧化物酶在石墨电极上的固定化及其对H_2O_2的响应

基础电极的选择和酶、抗体、DNA等生物活性分子的固定化方法都是影响生物传感器性能的关键因素.以石墨电极(GE)为基础电极,基于辣根过氧化物酶(HRP)对H2O2氧化邻苯二胺(OPD)生成2,3-二氨基吩嗪(DAP)反应体系的高效催化作用,研究了HRP固定化技术.分别利用再生丝素、聚乙二醇、壳聚糖包埋固定HRP,并以HRP修饰GE为指示电极,通过电位法测定H2O2浓度,对不同的固定化方法进行评价.结果表明,利用再生丝素包埋法制备的HRP/GE电极对H2O2具有更好响应性能,其工作曲线斜率为54.97,检测下限为8.82×10-8 mol.dm-3,线性范围为3.53×10-7～8.82×10-4 mol.dm-3.所提出的HRP/GE具有制备简单、成本低廉、响应快、灵敏度高等优良性能,具有较好的应用前景.     

Direct electrochemistry and electrocatalysis of horseradish peroxidase in MnO_2 nanosheet film

A novel material MnO2 nanosheet has been used as the support matrix for the immobilization of horseradish peroxidase (HRP). HRP entrapped in MnO2 nanosheet film exhibits facile direct electron transfer with the electron transfer rate constant of 6.86 s-1. The HRP/MnO2 nanosheet film gives a re- versible redox couple with the apparent formal peak potential (E0′) of -0.315 V (vs. Ag/AgCl) in pH 6.5 phosphate buffer solution (PBS). The formal potential E0′ of HRP shifts linearly with pH with a slope of -53.75 mV·pH-1, denoting that an electron transfer accompanies single-proton transportation. The immobilized HRP shows an electrocatalytic activity to the reduction of H2O2. The response time of the biosensor for H2O2 is less than 3 s, and the detection limit is 0.21 μmol·L-1 based on signal/noise = 3.     

辣根过氧化物酶修饰电极的电化学研究

制备了考马斯亮蓝和多壁碳纳米管混合物修饰玻碳电极（CBB G-250/MWNT/GC）,考察了固定在该修饰电极上的辣根过氧化物酶的电子转移情况。结果表明,辣根过氧化物酶在该电极上实现了稳定的直接电子转移反应,循环伏安图上出现了一对对称性良好的氧化还原峰。直接电子转移反应的表观速率常数k_s=4.68s^-1,式量电位E^0′几乎不随扫速（至少在20～270mV/s的扫速范围内）而变化,平均值为（-0.333±0.002）V（参比Ag/AgCl pH 7.0）。式量电位和pH的良好的线性关系表明该修饰电极上辣根过氧化物酶的直接电化学反应是有质子参与的。实验结果还证实了该修饰电极上酶对底物H₂O₂有良好的电催化活性。该方法可为生物传感器和生物燃料电池酶电极的制备提供基础数据。     

N-3与辣根过氧化物酶相互作用的光谱研究

在没有过氧化氢存在情况下,利用紫外-可见光谱和荧光光谱研究了N-3与辣根过氧化物酶的相互作用.结果显示两者之间存在一个位点的结合,形成了配合物,其形成常数为7.9×108 L·mol-1; N-3与辣根过氧化物酶的结合,使得辣根过氧化物酶的荧光生色基团的微环境的极性增大.     

Direct electrochemistry and electrocatalysis of horseradish peroxidase in MnO2 nanosheet film

A novel material MnO2 nanosheet has been used as the support matrix for the immobilization of horseradish peroxidase （HRP）. HRP entrapped in MnO2 nanosheet film exhibits facile direct electron transfer with the electron transfer rate constant of 6.86 s^-1. The HRP/MnO2 nanosheet film gives a reversible redox couple with the apparent formal peak potential （E^0＇） of -0.315 V （vs. Ag/AgCl） in pH 6.5 phosphate buffer solution （PBS）. The formal potential E^0＇ of HRP shifts linearly with pH with a slope of -53.75 mV.pH^-1, denoting that an electron transfer accompanies single-proton transportation. The immobilized HRP shows an electrocatslytic activity to the reduction of H2O2. The response time of the biosensor for H2O2 is less than 3 s, and the detection limit is 0.21 μmol · L^-1 based on signal/noise = 3.