酶解法提取紫藤总黄酮及自由基清除活性研究

优选酶辅助法提取紫藤总黄酮工艺条件及总黄酮提取液的抗氧化活性研究.辅助法提取藕节中的总黄酮提取工艺如下:首先纤维素酶酶解,再用乙醇回流.固定提取剂乙醇浓度为70%,固定料液比为1∶20g/mL和回流时间为2h.设计单因素实验和正交实验初步确定了紫藤中总黄酮提取的较佳实验条件.实验结果表明:酶浓度为0.20mg/mL,酶解温度为50℃,pH值为6.0,酶解时间为2.5h,紫藤颈、紫藤叶、紫藤花和紫藤果荚中总黄酮提取率分别为0.94%、4.60%、3.32%和5.16%,可见紫藤不同部位总黄酮含量差异较大.紫藤总黄酮提取液的抗氧化活性及对自由基的清除实验结果显示,紫藤总黄酮提取液对自由基有较强的清除活性.     

复合酶法提取红托竹荪多糖的工艺研究

采用复合酶法提取红托竹荪中的水溶性多糖,通过单因素试验和正交试验研究酶浓度、酶解时间、酶解温度以及酶解pH值对多糖得率的影响.确定复合酶法提取红托竹荪水溶性多糖的最佳条件为:酶浓度为1.5%,酶解时间120 min,酶解温度50℃,酶解pH值为4.5,此条件下的红托竹荪多糖得率为7.98%.     

Ionomycin诱导小鼠精子顶体反应的初步研究

目的:探讨Ionomycin诱导精子顶体反应的效果.方法:收集小鼠附睾尾精子,体外获能后用不同终浓度的Ionomycin处理相同时间,以及用相同浓度的Ionomycin处理不同时间.FITC-PNA染色观察并统计精子顶体反应率.结果:用终浓度为1、5、10、50μmol/L Ionomycin处理1 h的精子AR率分别为31.6%、52.2%、57.4%和64.0%.用终浓度为5μmol/L的Ionomycin处理10、30、45、60、120、180 min的精子AR率分别为17.2%、25.0%、41.2%、52.2%、54.0%和55.0%.结论:Ionomycin可以诱导小鼠精子的顶体反应,且顶体反应率随着浓度和诱导时间的变化而变化.     

超声波-压热法制备莲子抗性淀粉工艺研究

通过湿磨法获得莲子原淀粉,运用超声波对原淀粉进行预处理,并结合压热法制备抗性淀粉.以淀粉乳浓度、超声波功率、超声波处理时间、压热时间以及压热温度为单因素,研究其对莲子抗性淀粉得率的影响.通过正交优化分析获得最优工艺条件.结果表明,在莲子淀粉乳浓度为45％,超声波功率为300W,超声波处理时间为55 min,压热时间为15 min,压热温度为1 15℃的条件下,莲子抗性淀粉得率较高,达到56.12％.     

山楂单宁酶法降解工艺的研究

为改良山楂汁的色泽澄清度及口感,采用向山楂匀浆中加入不同比例的单宁酶以及控制不同的温度与时间酶解山楂中的单宁,测定酶解之后的单宁含量,通过单因素和正交实验优化工艺条件,得到酶解单宁的最佳条件.结果表明:酶解温度45℃、单宁酶在山楂匀浆中体积分数为0.4%、酶解时间为120 min时为最佳酶解组合.     

褐球固氮菌和荧光假单胞菌原生质体制备条件的研究

为了利用原生质体融合技术获得同时具备固氮、解磷、抑病等活性的多功能菌株,本文对褐球固氮菌A41和荧光假单胞菌P32原生质体的制备条件进行了研究。通过对菌龄、酶解温度、酶浓度、酶解时间等影响因素的正交实验确定了褐球固氮菌A41和假单胞菌P32原生质体制备的最佳条件。实验结果表明,固氮菌A41最佳制备条件为菌龄20h、酶解温度37℃、酶浓度3mg/mL、酶解时间45min;假单胞菌P32最佳制备条件为菌龄20h、酶解温度37℃、酶浓度2mg/mL、酶解时间30min。     

醋酸纤维素/聚丙烯复合膜固定化脂肪酶的研究

以醋酸纤维素/聚丙烯复合膜为载体对脂肪酶进行吸附固定,研究了不同条件对固定化脂肪酶活性的影响,得到了最佳固定化条件:酶浓度0.020 g/mL,温度20℃,pH8.0,振荡速度100 r/min,吸附时间2 h,膜酶活力最高为4.5 U/cm2;膜酶转化反应最佳条件:最适温度35℃,比游离酶降低了5℃;最适pH 8.5,与游离酶相比pH向碱性偏移,固定化脂肪酶间歇水解橄榄油132 h酶活力为原酶活力的56.7%.     

响应面法在番茄汁酶解工艺中的应用

选取果胶酶添加量、酶解温度和酶解时间三个因素进行中心组合设计,利用响应面法对其提取工艺进行优化研究.利用DesignExpert软件分析,结果表明最佳工艺条件为果胶酶用量0.18％,酶解时间91.9 min,酶解温度52℃.在此条件下,出汁率达到77.38％.     

海藻酸钠-壳聚糖固定化漆酶的研究

采用海藻酸钠包埋法和海藻酸钠-壳聚糖包埋-交联法固定化漆酶,探讨了固定化条件、固定化漆酶及游离酶的酶学性质,结果表明：包埋法和包埋-交联法固定化漆酶的最佳条件分别为海藻酸钠浓度3％、CaCl2浓度1．5％和海藻酸钠浓度2％、CaCl2浓度2％、壳聚糖浓度1．5％、戊二醛浓度1％．两种固定化漆酶的最适pH和最适温度相同,分别为5．0和30℃,游离酶pH为4．6,温度20℃．包埋法固定化漆酶、包埋一交联法固定化漆酶和游离酶的米氏常数分别为3．3,2．8,1．22mmol／L．     

复合酶法提取冬瓜多糖的研究

采用蛋白酶、果胶酶、纤维素酶复合处理冬瓜多糖溶液,通过对复合酶的作用温度、作用pH值、作用时间进行单因素实验,对复合酶配比、复合酶的提取工艺进行正交试验,确定了复合酶法提取冬瓜多糖的最佳工艺条件:复合酶按纤维素酶1.5%,果胶酶1.5%,蛋白酶1.5%配比,酶作用温度40℃,酶作用pH值为5.0,酶作用时间为40 min,多糖提取率最高.     

保存液及保存条件对中华绒螯蟹精子存活率的影响

以精子存活率和精子密度作为判据，研究了低温（4 ℃）条件下6种保存液体外保存中华绒螯蟹精子的效果.精子存活率采用伊红染色法检测，六种保存液分别为无钙离子人工海水I、无钙离子人工海水II、海水等渗NaCl溶液、无菌中华绒螯蟹生理盐水、海水等渗KCl溶液和海水等渗葡萄糖溶液.结果显示，六种保存液中海水等渗KCl溶液和海水等渗葡萄糖溶液的保存效果最差，保存2 d后精子即全部死亡，而两种无钙离子人工海水的保存效果较好，其中以无钙离子人工海水II的效果尤佳，其保存6 d后的精子存活率达92.19%，精子密度亦保持较高水平；故无钙离子人工海水II是中华绒螯蟹精子短期体外保存的理想保存液.在此基础上以无钙离子人工海水II作保存液，研究了精子密度、保存液pH值和渗透压对保存效果的影响.结果显示，不同精子密度的保存效果差异显著，其中以106～107个/mL的保存密度效果最好，在保存2 d后精子存活率仍保持在95 ％以上；在7~10的范围内保存效果较好，保存15 d后精子存活率均在90%以上；在以NaCl配制的渗透压范围为500～1 000 mOsmol/kg H2O的10个梯度保存液中，渗透压在750～850 mOsmol/kg H2O的范围内保存效果最好，该条件下保存15 d后精子存活率仍在75 ％以上.以上结果证实，中华绒螯蟹精子适宜的保存条件为：精子密度为106～107个/mL，渗透压范围为750～850 mOsmol/kg H2O，pH值为pH 7~10.     

3-甲基覆盆子酮的合成研究

以对羟基苯甲醛和丁酮为原料，经Claisen-Schmidt缩合和氢化反应得到3-甲基覆盆子酮。在Claisen-Schmidt缩合中使用丝光沸石作为酸催化剂，并对相关工艺进行了优化，确定最佳工艺条件为：HM3作为酸催化剂，用量为m（HM3）：m（对羟基苯甲醛）=O．6，n（丁酮）：n（对羟基苯甲醛）=6，反应温度80℃，反应NN36h,3-甲基-4-对羟基苯基-3-丁烯-2-酮收率为65．9%。在氢化反应中，使用钯炭作为催化剂，3-甲基覆盆子酮收率为95．0％，氢化时间为190min。两步反应总收率为62．6％。经IR、MS和^1H NMR分析确定了产物的结构。通过香气评定认为该化合物可望成为一种具有实用价值的新香料。     

磷钨酸/硅胶催化剂催化合成苯甲醛1,2-丙二醇缩醛

以自制磷钨酸/硅胶为多相催化剂,以苯甲醛和1,2-丙二醇为原料合成苯甲醛1,2-丙二醇缩醛,采用正交试验探讨了合成苯甲醛1,2-丙二醇缩醛的影响因素.实验结果表明:固定苯甲醛物质的量为0.2mol,在n(苯甲醛)∶n(1,2-丙二醇)=1∶1.6,催化剂用量为反应物料总质量的0.75%,带水剂环己烷为10 mL,反应时间30 min的条件下,苯甲醛1,2-丙二醇缩醛的收率为75.9%.     

SiCl_4制备正硅酸乙酯的工艺研究

为寻找一条工序简单、耗价低、易于工业放大路线,实现多晶硅副产物四氯化硅(SiCl4)废物资源化制备正硅酸乙酯(TEOS),本文以多晶硅副产物SiCl4和无水乙醇为原料制备TEOS,在半连续化生产工艺的基础上研究了SiCl4与乙醇的摩尔比、反应温度、反应时间等因素对TEOS产率及纯度的影响。正交实验优化结果表明:15℃下,以恒定速率滴加14.21 g无水乙醇于15 g四氯化硅中,反应35 min,补加8.12 g无水乙醇;55℃下恒温40 min,经减压蒸馏,除去低沸点的乙醇和氯化氢,TEOS产率达到86.61%。对正交实验优水平下制得的产物进行红外光谱(IR)和气相色谱(GC)分析,结果表明:产物中TEOS结构正确,其纯度大于99.0%,达到市售分析纯纯度。     

反应-蒸馏合成双丙酮醇工艺研究

以丙酮为原料、采用反应-蒸馏装置,在大孔型阴离子交换树脂的催化作用下,合成双酮醇,通过单因素实验和正交试验确定了合成的最佳工艺条件.最佳工艺条件为:进料流量1.58 m L/min,反应温度25℃,反应时间2 h,双丙酮醇的收率可达80%.     

1,4-二硝基咪唑的制备工艺研究

以浓硫酸-硝酸铵-醋酐为混合硝化体系,通过用醋酐法制备1,4-二硝基咪唑.并通过反应时间、反应温度、硝酸铵加入量、醋酐加入量单因素实验和硝酸铵的正交实验得到了合成1,4-二硝基咪唑较优的工艺条件:自制4-硝基咪唑精品11.3g,醋酐70ml,浓硫酸8ml,酰化温度大约35℃～40℃,酰化时间1h,硝酸铵20g,反应温度为30℃～35℃,反应时间为1.5h,1,4-二硝基咪唑得率为73%.并对样品进行了熔点测定,为92℃～94℃;采用红外光谱进行了表征,验证了所得反应产物.     

生姜中多酚的提取及其抑菌性研究

采用超声波法从生姜中提取多酚类物质,利用酒石酸亚铁分光光度法表征提取物中多酚的含量,通过正交试验对提取条件进行优化.结果表明,生姜中多酚的最佳提取条件为:提取温度为60℃,料液比为1︰15(g/mL),乙醇体积分数为70%,提取时间为20 min,生姜中多酚的提取率为18.50 mg/g.抑菌实验表明,生姜多酚对大肠杆菌有一定的抑制作用.     

毛细管气相色谱法测定土壤和桔梗中七氯及滴滴涕的含量

建立了土壤和桔梗中七氯及滴滴涕异构体含量的气相色谱分析方法.样品以石油醚+丙酮在索氏提取器中提取,提取液以浓硫酸净化.采用DB-5弹性石英毛细管柱分离样品,GC-ECD检测农药七氯、滴滴涕的含量.方法的线性范围为2.18×10-13～5.31×10-11g;敏感度为3.4×10-12～6.8×10-12g/mL;加样平均回收率为96.27%～100.3%(RSD为3.0%～6.5%).     

锌-柠檬酸铵还原体系用于氢化偶氮苯合成

采用锌-柠檬酸铵溶液还原体系,从偶氮苯制备氢化偶氮苯.选取偶氮苯与锌粉的物质的量比、饱和柠檬酸铵溶液的稀释倍数、柠檬酸铵溶液的用量及水浴温度作为影响产率的主要因素,采用四因素三水平的正交表L9(34)设计实验,确定了最佳反应条件:偶氮苯与锌粉物质的量比为1∶4(偶氮苯0.625 mmol),稀释1.0倍的饱和柠檬酸铵溶液的用量为2.0 mL,水浴温度82.0℃,反应时间约4min,收率为86.4%.     

供精个体和异种动物精浆对小鼠精子介导转染外源基因效率影响的研究

目的探讨供精个体和异种动物精浆对小鼠精子转染外源DNA效率的影响,以探索精子作为外源基因的载体建立转基因小鼠的影响因素。方法从性成熟小鼠的输精管及部分附睾管中取出精子,用DIG免疫组化方法检测和比较精予转染效率,因素为供精个体和异种动物精浆。结果不同供精个体间转染效率存在一定差异,但有的个体问差异极显著（P〈0．01）,而有的个体间差异不显著：共孵育体系中异种动物精浆可显著降低转染效率（实验组与对照组分别为（8．6±1．7）％VS（51．3±5.3）％,P〈0．01）。结论小鼠供精个体和异种动物精浆可影响小鼠精予转染外源DNA的效率。