重铬酸吡啶盐作用下烯丙基甾醇的氧化反应研究

在不同的反应条件下,用重铬酸吡啶盐（PDC）氧化豆甾醇,分别得到以豆甾-4,22-二烯-6β-羟基-3-酮或豆甾-4,22-二烯-3,6-二酮为主的产物。结果与有关文献的报道有所不同。     

雄甾-4-烯-3,17-二酮的浓硫酸乙酸酐分光光度测定

为建立一种雄甾-4-烯-3,17-二酮(4-AD)快速而简便的测定方法,用乙酸乙酯-浓硫酸(15︰1,v/v)溶液溶解4-AD标准品,配成标准溶液,并稀释为一定的浓度梯度后加乙酸酐反应15 min,测定吸光度,绘制标准曲线,进行稳定性试验、加样回收率试验和精密度试验,并通过分光光度法检测分支杆菌转化植物甾醇所得转化液中4-AD含量,与高效液相法进行了比较.结果表明:4-AD在0.08⁰.48 mg/m L的范围内呈良好线性关系,相关系数R2=0.9993,精密度RSD为0.672%,样品平均回收率为99.69%,分光光度法和高效液相方法检测结果差异不显著(p>0.05).故此法操作简单、快速,准确性高,重现性好.     

分枝杆菌Mycobacterium sp.M1甾酮C1,2位脱氢酶活性的研究

分枝杆菌Mycobacterium sp．M1可以有效降解大豆甾醇侧链得到雄甾-4-烯-3，17-二酮（AD）和雄甾-1，4-二烯-3，17-二酮（ADD）。通过该菌株细胞和细胞裂解液对底物AD的转化，表明了该菌株中存在甾酮C1．2位脱氢酶。利用酶活测定中活力高的细胞裂解液可以有效地降解大豆甾醇生成ADD。     

油水乳化体系中分枝杆菌转化植物甾醇产9α-羟基雄甾烯酮工艺研究

为了提高分枝杆菌转化植物甾醇产9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-酮(9-OH-AD)的转化效率,建立了油水乳化体系。结果表明:机械搅拌提供剪切力和加入吐温80作为分散剂是形成稳定乳化体系的必要因素,且油的比例须随甾醇投料质量浓度的增加而增加。在油水乳化体系中,细胞均匀分散,生物量增加,植物甾醇投料浓度和转化效率均得到提高;植物甾醇投料质量浓度可达20g/L,9-OH-AD摩尔得率达到64.06%,产率为1.28g/(L·d)。转化终止后通过离心进行相分离,可以去除大部分存在于油相中的副产物,使产物纯度从66%提高到90%。     

气相色谱法测定植物甾醇发酵液中雄甾烯酮和植物甾醇的含量

采用气相色谱仪建立了一个同时测定植物甾醇发酵液中雄甾-4-烯-3,17-二酮(Androst-4-ene-3,17-dione-4-AD)、雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮(Androst-1,4-diene-3,17-dione,ADD)和植物甾醇含量的外标分析方法.发酵液经离心后,二氯甲烷提取,可直接进样分析.气相色谱务件为:FID检测器,SE-54型(15m×0.25mmx0.25um)毛细管柱;柱温260℃,进样口和检测器温度均为300℃;载气为高纯N2,流速1mL/min.在实验条件下,发酵液中各主要成分和杂质分离良好.结果表明:4.AD、ADD和植物甾醇各组分的浓度与Ai/As的线性范围4-AD为0.5-4 g/L(R=O.999 9);ADD为0.5-4g,L(R=0.9992);菜籽甾醇为0.09～0.86 g/L(R=0.9991);菜油甾醇为0.14～1.39 g/L(R=0.999 5);豆甾醇为0.03～0.27 g/L(R=1);谷甾醇为0.24～2.4 g/L(R:0.999 1),平均回收率4-AD、ADD和上述植物甾醇依次为(96.37±0.77)%,(95.64±1.01)%,(99.6±2.78)%,(98.66±2.19)%,(96.85±2.19)5,(97.52±2.9)%.该方法具有步骤简单、重现性好、准确度和灵敏度高的特点.     

反应介质对植物甾醇侧链生物降解的影响

分析考察了有机溶剂、表面活性剂和超分子等反应介质对分枝杆菌(Mycobacterium sp.NRRL B-3683)降解植物甾醇生成雄甾烯酮AD(D)的生物转化反应的影响.结果表明,采用有机溶剂和吐温80等表面活性生剂作为反应介质的转化反应的转化率较低,而在含有环糊精的超分子反应介质中植物甾醇的转化率和转化速率均大幅度提高.采用直接添加的方式加入羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD),反应168 h,植物甾醇转化率达89.8%,比对照提高了2.9倍.转化48 h时加入与植物甾醇摩尔比为2:1的HP-β-CD,72 h时转化率达到87.5%,此时同期对照转化率为27.6%,缩短了反应周期.     

3β-乙酰氧基雄甾-5,15-二烯-17-酮的合成

以醋酸去氢表雄酮为原料,经C17保护,C16溴代,C15和C16间脱溴化氢及C17脱保护4步反应法合成了3β-乙酰氧基雄甾-5,15-二烯-17-酮.探讨了影响缩酮化反应、溴代反应、消除反应及去保护反应的主要因素,测试了各步产物的物理常数,并用高效液相色谱,红外光谱,质谱,氢核磁共振等对产物进行了表征.研究结果表明:缩酮化反应中催化剂对甲苯磺酸与甾体的量比为0.066时比较适宜,过量会产生油状物;溴代反应中,溴化试剂C5H5N·HBr·Br2的性能优于Br2的性能;溴代反应中间体偕二溴代物中,脱溴试剂NaI的性能优于KI的性能,KI的性能优于Zn粉的性能;消除反应中反应速度与叔丁醇钾的用量成正比,溶剂二甲亚砜优于二甲苯;升高温度不利于去保护反应的进行.上述4步反应的收率分别为93.4%,81.8%,88.8%和96.7%,总收率为65. 6%.     

螺甾内酯(Spiroenone)中间体的合成

3β-乙酰氧基雄甾-5，15-二烯-17-酮(2)与甲基硫氧叶立德(3)通过亲核加成反应得到螺甾内酯(Spiroenone)重要中间体3β-乙酰氧基-15β，16β-亚甲基雄甾-5-烯-17-酮(1)，产物经重结晶法分离，收率达80．5％．讨论了反应的主要影响因素，找到了优化条件，即反应温度为12℃，n((CH3)3S^ OI^-)：n(NaH)：n(2)=1．1：1．05：l，溶剂为二甲亚砜和四氢呋喃(体积比为4：1)时，加料方式为叶立德溶液加入到甾体溶液中．实验表明：低温有利于15β，16β-亚甲基产物的形成．测试了产物的物理常数；并用IR，MS，^1HNMR等波谱分析手段对产物进行了表征、     

3β-乙酰氧基-15β,16β-亚甲基雄甾-5-烯-17-酮的合成

在二甲亚砜、四氢呋喃或1,4—二氧杂环己烷溶剂中,当温度为12～30℃时,碘化三甲氧硫锤钅翁((CH3)3S+OI-)与氢化钠(NaH)作用1h生成甲基硫氧叶立德,再与3β 乙酰氧基雄甾 5,15 二烯 17 酮(Ⅱ)反应,产物经分离得到环丙化产物3β 乙酰氧基 15β,16β 亚甲基雄甾 5 烯 17 酮;探讨了反应物配比、反应温度、溶剂种类、加料方式对环丙化反应的影响.当反应温度为12℃,n((CH3)3S+OI-)∶n(NaH)∶n(Ⅱ)=1.10∶1.05∶1.00,加料方式为叶立德溶液加入到甾体溶液中,溶剂为二甲亚砜和四氢呋喃(体积比为4∶1)时,用重结晶法分离得产物,产率为80.5%.测试了产物的比位移值Rf、熔点、旋光度,并采用IR,MS和1HNMR等对产物进行了表征.     

中药结核康体外抗结核分支杆菌活性的实验研究

目的观察中药结核康在体外对结核分支杆菌的抑制和杀灭作用.方法采用改良罗氏法和7H9液体培养基中测定中药结核康的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度.结果结核康在7H9液体培养基中最小抑菌浓度(M IC)为40 mg/L,在改良罗氏培养基中最小杀菌浓度为(MBC)800 mg/L.结论结核康在体外对结核分支杆菌具有抑制和杀灭作用.     

新本尼登虫Neobenedenia sp. 的扫描电镜观察

报告作者在扫描间下详细观察新本尼登虫Ｎｅｏｂｅｎｅｄｅｎｉａ ｓｐ．和本尼登虫Ｂｅｎｅｄｅｎｉａ ｓｐ．之超微结构,并比较两者之间的差异。     

产碱杆菌SB1菌株的分离和降解水杨酸的研究

用富集培养法从工业水中分离到一株能以水杨酸为唯一碳源和能源的产碱杆菌ＳＢ１。该菌株在优化培养条件下对水杨酸的降解率可达９９％以上。     

一种孟氏虫Menziesia sp. 的扫描电镜观察

扫描电镜观察显示：孟氏虫呈长椭圆形,背腹扁平,具1对吸盘样前吸器,前吸器之后为口咽,生殖孔在虫体左侧边缘处．后吸器盘状,无柄,内具3对中央大钩和7对边缘小钩,边缘膜由柱状细胞组成．体表皮褶不明显,腹面体表具感觉乳突和体棘;背面体表密布颗粒状突起．     

一种六沟盘虫的扫描电镜观察

扫描电镜观察六沟盘虫(Hexabothriidae gen.sp.)发现,该虫个体较小,口吸盘外周由肌细胞包围,可见生殖孔及两个阴道孔,后吸器有6个吸铗,吸铗大小相等且对称排列．每个吸铗有一弯曲、末端带钩的铗片．尾突由后吸器的边缘伸出,尾突端部有两个大小相等的端吸盘．     

假单胞菌SH1菌株对苯甲酸类化合物的生物降解

假单胞菌(Pseudomonassp.)SH1菌株能以苯甲酸、邻羟基苯甲酸、间羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸和苯乙酸为唯一碳源和能源生长.研究了温度、pH、Ca2 、Mg2 、氮源和碳源浓度以及微量元素对SH1菌株生长的影响.在优化培养条件下SH1菌株在48h内对上述5种化合物的降解率分别为95%、95%、95%、93%和87%.讨论了苯甲酸分子中取代基的位置和大小与生物降解性的关系     

2—氯—5—甲基吡啶的侧链氯化

研究影响２－氯－５－甲基吡啶的侧链氯化的主要因素发现，硫酰氯（ＳＯ２Ｃｌ２）是较理想的氯化剂，使用该氯化剂对２－氯－５－甲基吡啶的侧链氯化选择性较高，反应时间短，产物纯度高，反应步骤少，为２－氯－５－氯甲基吡啶的合成提供了较理想的方法。     

结核分枝杆菌和卡介苗抗原蛋白的比较研究

利用Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ技术,对结核分枝杆菌和卡介苗抗原蛋白进行研究,发现两个菌种的３１ＫＤ和３０ＫＤ蛋白均能单克隆抗体识别,且两蛋白均存在于培养基滤液中,并对卡介苗诱发抗结核反应的机制进行了探讨。     

母牛分枝杆菌最佳生长条件的研究

对适宜母牛分枝杆菌 (Mycobacterium vaccae)菌株液体生长的培养基及培养条件进行了研究 ,结果表明在含有 0 .1%的酵母膏培养基中 ,初始 p H7.2 ,培养温度 35℃的条件下有利于母牛分枝杆菌的生长 ,确定为最佳生长条件     

响应面法优化桂花多糖的超声提取工艺研究

目的采取响应面方法对桂花多糖的超声提取工艺进行优化。方法在单因素(超声功率、超声时间、液料比)试验的基础上,通过Box-Behnken中心组合设计,建立桂花多糖的数学模型,经响应面方法进行优化桂花多糖的提取方法。结果桂花多糖的最佳提取工艺为:超声时间为20 min、超声功率为350 W、液料比为30:1(m L/g),提取温度为65℃,理论收率为20.38%,据此条件,验证性试验得其收率为19.45%,与预测值相符性较好。结论响应面优化桂花多糖的提取工艺,方法简单,为桂花多糖的提取工艺提供一定的参考价值。     

枝单杯虫Dendromonocotyle sp.的扫描电镜观察

报道寄生于南海条尾Hong（Taeniura sp.)鱼背体表的枝单杯虫（Dendromonocotyle sp.)的扫描电镜观察情况。该虫体前端具有一特征性凹槽,球形乳突;边缘两侧各有6个分泌腺孔,孔内含颗粒状分泌物;后端圆盘状后吸器由1个中央室、8个辐射小室、56个边缘乳突及三叉形指状突组成。