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保护赖氨酸的制备工艺 总被引:2,自引:0,他引:2
保护L-赖氨酸是固相多肽合成的重要原料,其商品价格居高不下。采用Fmoc和Boc保护策略,对L-Lys的α-氨基和ε-氨基保护进行了制备工艺研究,优化选择了其制备条件,将Fomc-L-Lys(Boc)的产品产率由76%提高到88%,产品纯度达到99.6%, 相似文献
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通过N-芴甲氧羰基(N-fluorenylmethoxycarbonyl,Fmoc)作为α-氨基的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成TAT-PTD多肽,运用高效液相色谱和质谱鉴定合成多肽的纯度和相对分子质量。通过紫外吸收光谱和琼脂糖凝胶电泳阻滞实验研究合成的TAT-PTD多肽与质粒DNA相互作用,实验表明TAT-PTD多肽与质粒DNA可以通过静电作用相互吸引、靠近并结合,于是为下一步小单孢菌基因工程的细胞转导提供了依据。 相似文献
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新设计了一种多肽C-端衍生物的合成方法。本方法结合了Fmoc-SPPS技术与TAEC技术的优点,室温反应,反应条件温和,易于监测,反应过程中所需采取的保护基最少,后处理简单高效,与正向固相合成互补,可高效地合成多种多肽以及多肽C-端衍生物。 相似文献
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植物细胞外多肽信使已经被证实是植物信号转导中重要的第一信使,运用生物信息学的方法,分析比较了已知的植物胞外多肽和人的细胞因子的氨基酸序列,发现这些来自不同界别的胞外多肽具有某些共同的结构特征,利用在线工具对胞外多肽的结构特征进行了验证,并根据细胞外多肽的结构特征推测了钙调素受体的三维结构,这些结果对发现新的植物胞外多肽及推测其可能的受体有重要意义. 相似文献
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废啤酒酵母具有较高的开发利用价值,本研究以啤酒厂废酵母为材料,通过单因素实验研究其最佳自溶条件及最佳微波水解条件,比较自溶、微波水解与外加酶制剂处理法制备酵母活性多肽的效果,并研究了酵母多肽的抗氧化活性.结果表明,啤酒酵母的最佳自溶条件为固液比1: 20、温度45.0 ℃、pH 6.0、时间48 h;在此自溶条件下,酵母蛋白质被有效水解为多肽,水解度为41.5%,提取蛋白质得率为42%.自溶法制备啤酒酵母多肽的效率与外加酶制剂处理的效果相当,但显著高于微波水解法.自溶法制备的啤酒酵母多肽具有高的抗氧化活性.本研究表明,自溶法是开发利用啤酒厂废弃的酵母和制备酵母多肽的理想方法. 相似文献
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应用固相多肽合成技术,人工合成了一种衍生于纤维结合素的六肽GRGDSS。用高效液相层析进行纯度鉴定,并观察六肽对骨髓瘤细胞株K562的体外抑制作用。实验结果表明,六肽在72h内对骨髓瘤细胞的抑制率为31%;多肽的结构对功能有一定的影响。根据竞争抑制原理,设计和合成多功能的多肽可为临床医学治疗肿瘤开辟一个新的途径。 相似文献
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用多肽固相合成法合成了血管紧张素Ⅰ转换酶抑制剂(ACEI),经HPLC检查其纯度达99%以上,用质谱测得分子量与理论值相同,氨基酸组分分析与预期结果相一致。动物实验表明,在体外ACEI对大鼠的ACE有明显的抑制作用;在体内能有效地降低血压。 相似文献
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虎纹捕鸟蛛毒素-ILys13突变对生物学活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
从虎纹捕鸟蛛Selenocosmia (Ornithoctonus ) huwena的粗毒中分离纯化出来的虎纹捕鸟蛛毒素-I(HWTX-I)是一种多肽类神经毒素.为了进一步探明其结构与功能的关系,采用以固相多肽合成为核心技术的蛋白质工程方法直接构建了Ala取代Lys13的单残基突变体K13A-HWTX-I,并同时合成了HWTX-I的全序列sHWTX-I作实验对照.合成产物经质谱和序列分析鉴定无误后在含谷胱甘肽的缓冲体系中氧化折叠并用离子交换和RP-HPLC纯化.活性测定结果表明,氧化复性后,sHWTX-I与天然HWTX-I的生物学活性完全相同,而K13A-HWTX-I的生物学活性下降了87%,提示Lys13是与HWTX-I的生物学活性密切相关的重要残基. 相似文献
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<正>多肽药物是指通过生物合成法(天然原料提取法、酶解法、发酵法、基因重组法)或化学合成法(液相合成法和固相合成法)获得的具有特定治疗作用的多肽,具有生物活性高、特异性强、免疫原性低及稳定性强等优点,广泛应用于抗病毒、抗肿瘤、抗菌、疫苗、内分泌、心血管及糖尿病等医疗领域。目前,合成多肽药物应用最普遍的是固相合成法,以保护氨基酸(Boc-氨基酸或Fmoc-氨基酸)作为起始物料,定向获得目标肽,由于Fmoc-氨基酸具有在碱性条件下进行脱保护的优势,因此是目前固相合成法中最为常用的起始物料。关于起始物料中杂质的控制,食品药品监督管理局(FDA)、欧洲药品管理局(EMA)以及ICHQ11、 相似文献
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《中山大学学报(自然科学版)》2019,(1)
毒素lt3a是从信号芋螺毒管中分离鉴定到的一种天然多肽,天然来源的lt3a的第6位脯氨酸发生了羟基化修饰。为深入研究脯氨酸羟基化的生物学意义,以lt3a中第6位脯氨酸为研究目标,采用固相化学合成的方法分别合成了不含羟基化修饰的多肽lt3a和具有羟脯氨酸的多肽lt3a[P6O],并对其氧化折叠速率、热稳定性和功能进行了研究,发现在GSSG/GSH溶液中,lt3a[P6O]的氧化折叠速率是lt3a的两倍,但两者的折叠终产率相当,进一步实验表明羟脯氨酸的存在不影响lt3a的热稳定性和对神经干复合动作电位的作用。说明羟脯氨酸促进了lt3a的氧化折叠速率,但对其生物学活性没有显著影响。该研究一方面为芋螺多肽翻译后修饰研究奠定了基础,另一方面对芋螺毒素的结构改造提供理论依据。 相似文献
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纤维结合素多肽衍生物的化学合成及对骨髓瘤组织株K562的… 总被引:1,自引:0,他引:1
应用固相多肽合成技术,人工合成了一种衍生于纤维结合素的六肽GRGDSS。用高效液相层析进行纯度鉴定,并观察六肽对骨髓瘤细胞株K562的体外抑制作用,实验结果表明,六肽在72h内对骨髓瘤细胞的抑制率为31%,多肽的结构对功能有一定的影响,根据竞争抑制原理,设计和合成多功能的多肽可为临床医学治疗肿瘤开辟一个新的途径。 相似文献
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脱脂豆粕多肽络合盐的应用特性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
张亚丽 《哈尔滨商业大学学报(自然科学版)》2005,21(1):93-95
利用1398中性蛋白酶水解脱脂豆粕后形成的多肽与微量的锌、亚铁络合。制备出的多肽络合锌、多肽络合亚铁为原料,研究其对食品的抗氧化作用和对生物吸收率的影响.结果表明,添加多肽络合锌和多肽络合亚铁的猪油和鱼油的过氧化值均低于对照组,表明其具有抗氧化性;将多肽络合锌和多肽络合亚铁喂食小鼠,得出其有一定的生物吸收利用率,故可作为食品营养强化剂。 相似文献
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为优化鳙鱼活性多肽酶法制备工艺,分析了鳙鱼肉糜预处理温度和酶解温度对水解度的影响,确定了最佳的预处理条件为85℃水浴中加热预处理20 min,酶解温度设为55~75℃.经均匀设计实验优选和最优条件验证实验证实,以氮溶指数为指标的最优酶解条件为:酶解时间8.0 h,固液比1∶4.25,蛋白酶A用量3‰,酶解温度75℃,产物氮溶指数达80.54%;以多肽得率为指标的最优酶解条件为:酶解时间8.0 h,固液比1∶2,蛋白酶A用量3‰,酶解温度75℃,产物多肽得率达11.92%;以产物总抗氧化指数为指标的最优酶解条件为:酶解时间1.0 h,固液比1∶6,蛋白酶A用量3‰,酶解温度55℃,所得产物总抗氧化指数达87.42‰. 相似文献
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海藻是重要的海洋生物,也是人们食物的重要来源.前期广泛的研究已经证实,海藻含有大量的蛋白质.但由于多肽含量低,在提取纯化时,传统的方法存在一定难度,目前较常用酶解法和化学提取法进行提取,用色谱法和膜分离法进行纯化,从海藻中获取较高纯度的多肽,使用与MS相关的技术对其结构进行鉴定.海藻多肽对抗肿瘤具有较强作用,其作用机制表现在多个方面.本文综述了海藻多肽最新的提取纯化和鉴定方法及抗肿瘤活性的研究进展,为其进一步开发利用提供参考. 相似文献
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避免c-Src蛋白的多肽类拮抗剂与多个蛋白发生混杂性结合,对于降低抗癌药物的毒性风险具有重要作用。本研究运用生物信息学方法对氨基酸序列进行优化设计,旨在减少混杂性结合的发生。本研究综合利用各种多肽数据库和生物信息学工具,首先总结了多肽分子与多个蛋白SH3结构域之间潜在的混杂性结合,并发现了其中的内在规律。随后,根据所发现的规律,对多肽的氨基酸序列进行针对性的优化设计。结果表明,大多数多肽在经过优化后,所结合的c-Src以外的蛋白数量都有所下降,从而显著提高了多肽与c-Src蛋白之间结合的特异性(P0.05),并降低了其潜在的毒性风险。本研究所取得的结果将为设计具有高度特异性和低毒性的靶向性多肽药物提供参考。 相似文献
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研究了芴烯-哌啶加合物的紫外光谱特性并将其应用于定量测定Fmoc锁定的树酯容量(capacity)和Fmoc保护的树酯肽含量.该法的灵敏度为0.000 1 mmol/g树酯.利用该法可在不损失树酯肽的情况下定量测定基于Fmoc的多肽固相合成法中各步反应的偶合产率. 相似文献