微胶囊法和交联法固定化磷脂酶A1的比较

采用不同固定化磷脂酶A1的方法，即交联法和微胶囊法，以壳聚糖和海藻酸钠为载体，戊二醛为交联剂，固定化磷脂酶A1．通过考察固定化载体和固定化酶的性质以及固定化酶的活力回收等，比较两种固定化酶方法的优劣．结果表明，微胶囊包埋法固定化磷脂酶A1工艺较佳．     

蒙脱石K-10固定糖化酶研究

蒙脱石是一种优良的吸附剂，采用吸附法将其作为固定化糖化酶的载体研究固定化糖化酶的性质，结果表明:每克固定化酶的活力3442U；固定化酶的最适pH值是4.8，比游离酶增加了0.2个单位；固定化酶反应的最适温度是60℃，比游离酶升高了5℃；固定化酶的半衰期为12d；固定化酶的Km=14.3g/L，为游离酶的1.47倍.     

固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质

用固定化单宁通过吸附法制备固定化木瓜蛋白酶,研究了固定化的条件和固定化酶的性质、在200毫克固定化单宁加入200单位木瓜蛋白酶、5℃,pH8.5的条件下进行固定化,固定化木瓜蛋白酶活力可达260单位/克固定化酶(湿重)。固定化酶和自然酶的最适pH及最适温度相同,分别为pH6及75℃;但固定化酶的温度及贮存稳定性明显优于自然酶。在室温下用其连续澄清啤酒,使用半衰期为8天。     

蒙脱石K-10吸附固定糖化酶研究

蒙脱石是一种优良的吸附剂,采用吸附法将其作为固定化糖化酶的载体研究固定化糖化酶的性质,结果表明:每克固定化酶的活力3 442 U;固定化酶的最适pH值是4.8,比游离酶的最适pH值增加了0.2;固定化酶反应的最适温度是60 ℃,比游离酶升高了5 ℃;固定化酶的半衰期为12 d;固定化酶的Km=14.3 g/L,为游离酶的1.47倍.     

固定化真菌α淀粉酶在海参饵料添加剂方面的应用研究

采用海藻酸钠为载体固定化真菌α-淀粉酶,首次作为海参饵料添加剂考察了固定化的最适条件和固定化酶的酶学性质.结果表明:海藻酸钠质量分数2.5%,加酶量15%,CaCl2质量分数2%,固定化时间1.0 h固定化酶活力最高.固定化酶的最适温度范围在55～60℃,最适pH在5.0～5.5之间.固定化酶在添加量为0.16 mg/g(干饵料),酶解时间25～30 min效果最佳.     

氨基功能化SBA-15分子筛的制备及对纤维素酶的固定化

采用共缩聚法制备了氨基功能化SBA-15介孔分子筛,以此为载体,戊二醛作交联剂,进行了纤维素酶固定化.考察了戊二醛浓度、给酶量、pH、固定化时间等因素对固定化的影响,确定了固定化最佳条件,并对固定化酶的酶学性质进行了研究.结果表明,固定化酶最适作用温度60℃,最适作用pH为4;固定化酶Km值3.61 mg·mL-1;固定化酶的热稳定性、操作稳定性、贮存稳定性均明显高于游离酶.     

以明胶为载体的固定化葡萄糖氧化酶的研究

1.研究了明胶经戊二醛处理后,酶经渗透制备固定化葡萄糖氧化酶的方法。采用这种方法制备的固定化葡萄糖氧化酶活力高、使用稳定。2.酶固定化后,表观米氏常数有所增加,热稳定性有所提高,其他葡萄糖氧化酶性质几乎没有改变。固定化酶提高了酶的稳定性和利用效率,促使近十几年来固定化酶的方法和技术的飞跃发展。固定化葡萄糖异构酶生产果葡糖浆、固定化青霉素酰胺酶生产半合成青霉素中间体6APA等一系列工业应用的成功,已使固定化酶成为新兴的酶工艺的重要组成部分。固定化葡萄糖氧化酶可用于制葡萄糖酸,近年来还用于血糖的分析。明胶是一种优良载体,适用于多种酶的固定化。本文报导了作者用渗透法制备明胶固定化酶的方法及固定化葡萄糖氧化酶的酶学性质等方面的工作。     

壳聚糖固定化β-葡萄糖苷酶酶学性质研究

采用交联吸附法将β-葡萄糖苷酶固定在壳聚糖上,方法简便易行.固定化酶的最适反应温度为50℃,相比于游离酶上升了10℃,且固定化酶提高了游离酶的热稳定性.固定化酶最适pH值为6.0,与游离酶相比上升了1.0,更耐碱.固定化酶对化学试剂稳定性增强,贮藏稳定性有显著提高.固定化酶优化了游离酶的部分酶学性质,具有一定应用价值.     

壳聚糖铜固定化漆酶研究

用壳聚糖与CuSO2.5H2O溶液络合成的壳聚糖铜为载体,固定化白毒鹅膏菌胞外漆酶,测定了铜盐浓度、络合时间、固定化时缓冲液的pH值、固定化时间、给酶量对固定化酶性质的影响。实验得出固定化最佳条件是在20℃、pH7.0的磷酸缓冲液中,固定2个小时,这种条件下酶活保持率为50.2%。固定化酶的最适pH值4.0比游离酶的4.6偏酸;固定化酶的最适温度24℃。     

环糊精葡萄糖基转移酶的固定化及其应用研究(I)球形纤维素阴离子交换剂对环糊精葡萄糖基转移酶的固定化研究

以球形纤维素弱阴离子交换剂为载体固定化环湖精葡萄糖基转移酶，研究了给酶量、吸附时间、载体粒度对固定化效果的影响．考察了固定化前后其酶学性质的变化．结果表明，酶经固定化后，热稳定性有所提高；pH值的影响则与自由酶不同，出现了两个活力峰值；固定化酶的Km值有所增大；10mmol／L的CaCl2可使固定化酶活力有较大幅度的提高，这一浓度的CaCl2也有利于固定化酶在室温下的保存，15天后，固定化酶活力仍保持80％以上．     

壳聚糖固定化云芝漆酶的制备及特性

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂制备固定化漆酶,测定了不同戊二醛浓度、交联时间、给酶量以及固定化时间对固定化漆酶活性的影响。结果表明,固定化反应的最佳条件为戊二醛浓度5%,交联时间8h,给酶量20mg/g载体,固定化时间6h,在此条件下制备的固定化漆酶酶活性保持率为52.2%。此固定化漆酶具有最大活性时的溶液pH值在4.5,相比于自由漆酶的最佳pH值5.0,其向酸性偏移;与自由漆酶相比,固定化酶有很好的稳定性和可重复使用性。     

谷胱甘肽双功能合成酶固定化研究

对谷胱甘肽双功能合成酶(GshF)固定化载体进行了筛选,最终选择氧化石墨烯(GO)作为GshF的固定化载体,并对其固定化条件和固定化酶学性质进行了探讨。结果表明,固定化体系最优pH为8.0,温度为4℃,固定化时间为30 min,此时最大加载率达到90%,酶活回收率为45%。固定化体系中温度和pH的适用范围都得到了进一步提高。另外,对固定化酶的贮存稳定性和循环利用性进行了研究,结果表明在常温条件下贮存时,游离酶在第3天就几乎完全失活,而固定化酶仍保留约63%的酶活力。在重复循环利用6次后,固定化酶的酶活力仍保持在80%左右。     

酶解双醛淀粉固定化脲酶性质的研究

采用酶解双醛淀粉固定化脲酶并对其固定化脲酶性质进行了研究。结果表明,酶解双醛淀粉固定化脲酶以后,载体之间形成较大的团状。酶解双醛淀粉载体固定化脲酶量达到24.3%。对固定化脲酶的性质研究表明,酶解双醛淀粉固定化脲酶的最适pH6.0,最适温度为70℃,具有很好的储存稳定性和较高的米氏常数,固定化脲酶重复使用10次后,活力下降了约25%。以上结果表明酶解双醛淀粉能有效固定化脲酶,是一种新型高效的固定化酶载体。     

固定化β-葡萄糖苷酶的酶学性质

以壳聚糖微球为载体构建了固定化β-葡萄糖苷酶,研究了固定化和游离β-葡萄糖苷酶的酶学性质.结果表明:固定化和游离β-葡萄糖苷酶的最适pH均为4.5;固定化β-葡萄糖苷酶的最适温度为60℃,比游离酶低5℃;固定化β-葡萄糖苷酶的pH稳定性和贮存稳定性明显高于游离酶,但热稳定性略低于游离酶;固定化和游离β-葡萄糖苷酶的表观米氏常数和米氏常数分别为0.52 mmol/L和2.4 mmol/L;固定化β-葡萄糖苷酶重复分批酶解10 g/L的纤维二糖,其操作半衰期为31 d左右.     

磁性复合微球固定化脂肪酶的研究

用壳聚糖和二氧化硅共同包裹Fe3O4纳米粒子制得磁性高分子微球,并以此为载体,以戊二醛为交联剂固定化脂肪酶,探讨了固定化过程中戊二醛浓度、固定化时间、固定化pH对固定化酶活力的影响.结果表明,固定化脂肪酶的最佳条件:时间为10h,pH为7.5,戊二醛的浓度为8％.同时还对固定化酶与游离酶的最适温度和最适pH作了测定,固定化酶的最适温度为50℃,比游离酶的最适温度为40℃,提高了10℃;固定化酶的最适pH为7.0,与游离酶的最适pH7.5相比,向酸性偏移了0.5.     

硅藻土强化吸附壳聚糖固定化青霉素酰化酶

文中针对壳聚糖颗粒机械强度不够和比表面积不大的缺点,用无机多孔材料硅藻土(celite)在低压下强化吸附壳聚糖,再用戊二醛使其活化,以此为载体通过共价结合固定化青霉素酰化酶。以酶活和回收率为指标,讨论了活化、固定化及酶反应的不同条件对固定化青霉素酰化酶的酶活和回收率的影响。当戊二醛溶液质量分数为5%、pH值为8.5;酶固定化温度为27℃,固定化pH值为7.6,固定化时间为12～18h时,为最佳固定化条件。固定化酶的酶活可达10000mol/s左右,回收率约为40%。固定化酶的储存稳定性和热稳定性好,载体有良好的强度。     

环糊精葡萄糖基转移酶的固定化及其应用研究：（I）球形纤…

以球形纤维素弱阴离子交换剂为载体固定化环糊精葡萄糖基转移酶，研究了给酶量、吸附时间、载体粒度对固定化效果的影响，考究了固定化前后其酶学性质的变化。结果表明，酶经固定化后，热稳定性有所提高；ｐＨ值的影响则与自由酶不同，出现了两个活力峰值；固定化酶的Ｋｍ值有所增大；１０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＣａＣｌ２可使固定化酶活力有较大幅度的提高，这一浓度的ＣａＣｌ２也有利于固定化酶在室温下的保存，１５天后，固定化酶活力仍     

交联海藻酸钙凝胶固定化酵母醇脱氢酶研究

对用海藻酸钙包埋、戊二醛交联法固定酵母醇脱氧酶催化苯乙酮酸合成(R)-扁桃酸的过程进行研究,比较游离酶与固定化酶的酶学性质.实验结果表明:固定化酶的热稳定性显著提高,游离酶在70℃时酶蛋白变性失去活力,而固定化酶在65℃保温1 h的能保持64%的酶活力,在70℃时酶活力仍町保留48.6%;固定化酶的最适温度由30℃升至40℃,最适反应pH值由6.8下降为5.8;固定化酶保留了62.72%的游离酶活性, 固定化酶的表观米氏常数和最大反应速率分别为37.33 mmol/L和358.42 nmol/min.该固定化酶具有良好的储存稳定性和操作稳定性.     

使用国产环氧树脂LXEP-120固定化脂肪酶研究

使用国产环氧树脂LXEP-120对猪胰脂肪酶进行固定化,研究其固定化工艺的最佳条件,并且对固定化酶和游离脂肪酶的酶学性质作初步的比较。结果显示,最佳固定化条件为:选用pH6.0、1.0mol/L的磷酸钾缓冲液,载体投放量5.0g,固定化温度22℃,固定化时间12h。最终得到的固定化酶酶活400U/g,酶活回收率92.79%,固定化酶重复使用10次后仍保持70%左右的酶活。与游离酶相比,固定化酶的最适反应pH(pH8.0)没有变化,最适反应温度(45℃)提高5℃,pH耐受性、热稳定性和重复使用性显著增强。同时,固定化酶具有较好的储存稳定性。研究结果证明国产环氧树脂LXEP-120在工业酶的固定化应用上具有很好的应用潜力。     

酶解双醛淀粉固定化脲酶的酶学性质

采用酶解双醛淀粉固定化脲酶,并对相应的固定化脲酶的性质进行了研究.扫描电镜分析表明,酶解双醛淀粉固定化脲酶后,载体之间形成较大的团状.研究发现:酶解双醛淀粉固定化脲酶量达到24.3%;酶解双醛淀粉固定化脲酶的最适pH值为6.0,最适作用温度为70℃;固定化脲酶具有很好的储存稳定性和较高的米氏常数,且重复使用10次后的活力仅下降约25%.说明酶解双醛淀粉能有效固定化脲酶,是一种高效的固定化酶载体.