RT—PCR法检测SMMC—7721人肝癌细胞α5β1整合蛋白 …

整合蛋白α５β１是一类存在于细胞表面的细胞粘附分子，在肝癌的发生发展和演进中起着重要的作用。研究了快速定量检测整合蛋白α５β１ ｍＲＮＡ表达的ＲＴ－ＰＣＲ方法，结果表明：在ＰＣＲ反应体系中加入２５ｎｇ到２００ｎｇ ｍＲＮＡ的逆转录产物呈较好的线性关系，并以此为反应条件测定ｐｃＤＮＡ３－α５，ｐｃＤＮＡ３－β１质粒共转染或单转染的α５β１．６－７７２１，α５．３－７７２１，β１．６－７７２１细胞株ｍ     

缺氧对脑星状细胞GAPDH和β—Actin基因表达的影响

目的：样本ＲＮＡ加样量的差异是影响Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交ＲＮＡ分析和反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量分析的重要因素。因５－磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）和β肌动蛋白（β－ａｃｔｉｎ）ｍＲＮＡ水平一般相对恒定,常用于基因表达研究时样本加样量的校正。但有报道表明某些因素对ＧＡＰＤＨ和β－ａｃｔｉｎ的ｍＲＮＡ水平有一定影响。脑星状细胞（ＡＣ）是近年来神经科学的研究热点之一,有关其基因的研究得到广泛的重视     

c—Myb基因反义寡核苷酸对K562细胞增殖和生长的影响

用体外培养技术研究了ｃ－Ｍｙｂ基因的ｍＲＮＡ反义寡核苷酸对慢凿Ｄ５６２红白细胞增殖和生长的影响。结果显示．ｃ－Ｍｙｂ基因反义寡核苷酸在２０－１６０μｇ／ｍｌ时，对细胞的增增与集落的形成有明显的抑制作用，提示：ｃ－Ｍｙｂ基因在控制白血病增殖与生长中起重要作用。     

爪蟾卵母细胞中核酸—蛋白质的相互作用

已知爪蟾中编码核糖体蛋白Ｌ１的基因是在转录后被调节的；第三内含子能从前体ｍＲＮＡ以两种可选择的方式被剪裁下来，结果导致Ｌ１ｍＲＮＡ的产生或释放出一种小的核仁ＲＮＡ（Ｕ１６）。通过卵母细胞的显微注射，对剪接复合物的形成进行了活体研究，证明了剪接体的装配在Ｌ１的第三内含子上受到了损害，而剪接效率低的原因是由于存在次等的同感序列。对核内不均一的核内核蛋白体（ｈｍＲＮＰ）的分布也进行了分析，揭示了核内不均     

c－Myb基因反义寡核苷酸对K562细胞增殖和生长的影响

用体外培养技术研究了ｃ－Ｍｙｂ基因的ｍＲＮＡ反义寡核苷酸对慢粒Ｋ５６２红白细胞系增殖和生长的影响。结果显示：ｃ－Ｍｙｂ基因反义寡核苷酸在２０～１６０μｇ／ｍｌ时，对细胞的增殖与集落的形成有明显的抑制作用，提示：ｃ－Ｍｙｂ基因在控制白血病细胞增殖与生长中起重要作用     

GHRP—scu—PA—32K突变体的构建,表达及纯化产物的部分性 …

在ｓｃｕ－ＰＡ３２Ｋ的ｃＤＮＡ分子基础上经定点突变,在Ｎ端紧接Ｌｅｕ＾１以前引入编码ＧＨＲＰ四肽的寡核苷酸序列（ＧＧＴＣＡＴＡＧＧＣＣＴ）,构建了ＧＨＲＰ－ｓｃｕ－ＰＡ－３２Ｋ的突变体ｃＤＮＡ。将它克隆到表达载体ｐＣＭ－β－ｄｈｆｒ共转染ＣＨＯ／ＤＨＦＲ＾－细胞。筛选到的稳定表达株在无 清培养基的表达量为５８０ＩＲ／（１０＾６细胞．２４ｈ）。经锌离子螯合亲和柱纯化的产物,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示为一蛋     

Eu^2＋激活的Li—β—Al2O3的组成,结构和发光

运用周期表对角线规则，获得了Ｅｕ＾２＋激活的Ｌｉ－β－Ａｌ２Ｏ３新的发光基质，研究了该基质的组成，结构，电荷补偿机制及Ｅｕ＾２＋在体系中的发光性质。结果表明：锂对ＢａＭｇＡｌ１０Ｏ１７基质中镁的取代仍然保持β－Ａｌ２Ｏ３结构不变，Ｌｉ－β－Ａｌ２Ｏ３基质中的电荷补偿主要是形成间隙Ａｌ６３＋或Ｌｉ＾＋离子机制，Ｅｕ＾２＋激活的Ｌｉ－β－Ａｌ２Ｏ３具有良好的发光性能，通过进一步研究有可能应用到三基色发     

Mg^2＋—ADP—钒酸根三元体系的核磁共振法研究

用＾５１ＶＮＭＲ滴定法研究在Ｍｇ＾２＋－ＡＤＰ－ＶＯ４＾３－三元体系中的物种分布，通过分析用Ｍｇ＾２＋一ＡＤＰ－钒酸根混合溶液时＾５１Ｖ核磁谱峰的变化，指出溶液中形成了Ｍｇ－Ｖ２Ａ２（Ｖ２Ａ２为两个钒酸根和两个ＡＤＰ分子形成的双核配合物的简写）和Ｍｇ－ＡＤＰＶ（ＡＤＰＶ代表一个四面体钒酸根单体与ＡＤＰ中的β－磷酸根缩合形成的酸酐），测得Ｍｇ－Ｖ２Ａ２及Ｍｇ－ＡＤＰＶ的形成常数分别是７２．５ｍｏｌ＾     

Cu—Al合金相变统计物理与热力学

首先依据规则溶体模型，在利用相图及热力学数据的基础上，推导出Ｃｕ－Ａｌ合金系中各组元的晶格稳定参数△Ｃｕ＾β＾→＾α和△Ａｌ＾β＾→＾α的数学表达式；其次运用统计物理模型处理了Ｃｕ－Ａｌ合金系中有关马氏相变的体心立方面心立方结构的有序相变，分别求得β→β和α→α的内能变化△Ｕ＾β→β△Ｕα→α；最后根据相变中该合金系自由能变化式从理论上计算得马氏体相变温度，且计算曲线与实测曲线良好吻合。     

大豆胰蛋白酶抑制剂SBTi—A2新类型Ti^d突变位点的初步研究

纯化的大豆胰蛋白酶抑制下Ｔｉ＾ａ和Ｔｉ＾ｄ分别经烷基化，ＣＮＢｒ裂解，痛ＰＡＧＥ电泳，Ｔｒｉｃｉｎｅ／ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析，初步证明了Ｔｉ＾ｄ的突变位点发生在蛋白Ｎ端１－８４氨基酸残基上。     

预测竞争性和非竞争性剪接位点对

基于剪接位点竞争机制,剪接位点对分成竞争性剪接位点对和非竞争性剪接位点对.并且竞争性和非竞争性剪接位点对的分类是一个很重要的工作.结合位置权重矩阵、离散量和支持向量机,提出了预测竞争性和非竞争性剪接位点对的新方法.独立检验集中90%以上的剪接位点对能被正确地分类成竞争性和非竞争性剪接位点对.此预测成功率高于其它方法.     

逆转录病毒载体介导的Anti—ras核酶对T24ras转化3T3细胞 …

突变ｒａｓ基因存在多种人类肿瘤细胞中，本文将可特异性切割１２位点突变ｒａｓ（Ｔ２４ｒａｓ）之核酶Ｒ８通过逆转录病毒载体导入Ｔ２４ｒａｓ转化的ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以期检测核酶在细胞内对其靶基因的作用，结果表明Ｒ８可特异性地切割突变ｒａｓｍＲＮＡ导致转化细胞生物学特性的细胞形态，生长速度等在一定程度上发生逆转。     

UP,βn和Fewp的相对可分离性

本文给出ＵＰ、βｎ和ＦｅｗＰ与ＮＰ和ＰＳＰＡＣＥ相对于Ｔａｌｌｙ集的分离结果。同时还引入强ｎ－范畴机和强ｐ－范畴机等概念，并比较它们所接受的语言类在Ｐ－ＮＰ情况下的性质，得到如下结果；存在递归ｏｒａｃｌｅＡ和Ｂ，以及递归Ｔａｌｌｙ集Ｔ和Ｔ＾１，使得：（１）Ｐ＾Ａ－β＾Ａｎ且Ｐ＾ＡＲ≠β＾ＡＮ，（２）Ｐ＾Ｂ＝ＦｅｗＰ＾Ｂ     

真核基因剪接位点二级结构特征

利用RNA二级结构的预测程序,通过对148个人类基因由EST验证的发生剪接的784个供体位点和受体位点以及101个人类基因由EST验证的发生选择性剪接的418个供体位点和受体位点附近的二级结构的预测,寻找真核基因剪接位点及选择性剪接位点的二级结构特征。通过详细研究剪接位点及选择性剪接位点在RNA二级结构中的结构分布,获得了一些剪接位点及选择性剪接位点在RNA二级结构中结构分布的规律性。结果表明,在RNA剪接及选择性剪接过程中,顺式作用元件具有结构特定性。这种结构特定性可以从结构上对真核基因剪接及选择性剪接机制进行一些合理的解释,有利于对真核基因剪接位点的识别及其表达调控机理的进一步理解。     

VP—16诱导的鼻咽癌细胞亚系多药耐受表型的研究

经ＶＰ－１６大剂量短暂冲击加递增低浓度诱导方法建立了鼻咽癌耐药细胞亚纱ＬＣＥ／ＶＥ,用ＲＴ－ＰＣＲ和ＰＣＭ免疫荧光法检测了耐药基因ＭＲＰ和ｍｄｒ１在ｍＲＮＡ水平和蛋白质水平的表达,并用ＭＴＴ法测定了ＬＣＥ／ＶＰ对９种化疗药物的敏感试验,结果发现ＬＣＥ／ＶＰ细胞几ｍｄｒ１在ｍＲＮＡ水平均有表达,且前明显高于后,蛋白质水平的表达情况与ｍＲＮＡ水平相一致,ＬＣＥ／ＶＰ对９种化疗药物中的６种药物敏感程     

卷柏属12种卷柏植物孢子的元素成分分析

利用反义ＲＮＡ抑制基因表达的技术,发现ｃｙｃｌｉｎＥ基因在表达受到抑制后,乳腺癌细胞增殖速率和致癌性明显下降,结果还表明ｃｙｃｌｉｎＥ基因的抑制,可使ｐ２１＾ｗａｆｌ的转录水平上升,由此说明ｃｙｃｌｉｎＥ的异常与乳腺癌的发生有着密切的关系,在细胞周期调控上ｐ２１＾ｗａｆｌ的转录受到ｃｙｃｌｉｎＥ表达水平的明显影响。     

杂交捕获抑制聚腺苷二磷酸核糖聚合酶基因的体外翻译

体外转录载体ｐＳＰ７２—Ｃ１２和ｐＳＰ７２—Ｃ１．４分别经ＸｂａⅠ和ＸｈｏⅠ酶切线性化后，用ＳＰ６ＲＮＡ聚合酶与Ｔ７ＲＮＡ聚合酶进行体外转录得到编码人聚腺苷二磷酸核糖聚合酶基因的ｍＲＮＡ全序列（３．７ｋｂ）及与其５’端编码区的起始密码子ＡＵＧ上游区域互补的反义ＲＮＡ片段（１．４ｋｂ）。等摩尔数的正、反义ＲＮＡ通过酚相乳浊杂交技术进行分子杂交。在网织红细胞裂解物体外翻译系统中，正义ＲＮＡ能正常地翻译出蛋白质；而反义ＲＮＡ与正义ＲＮＡ杂交可阻断翻译的进行。     

基于特征挖掘与融合的剪接位点识别

在基于保守序列这一信号特征识别剪接位点的基础上．挖掘了可用于剪接位点识别的其他多个特征（包括剪接位点上、下游序列的碱基组成。剪接位点信号和上、下游序列的碱基组成随位点邻近序列C＋G含量的变化等统计特征）,建立了描述这些特征的模型。设计了能有效融合这些特征对剪接位点进行识别的对数线性模型,开发了剪接位点识别程序SpliceKey．测试结果表明：SpliceKey识别剪接位点的精度不仅较WAM方法有显著的提高,而且也优于国际上最新发布的剪接位点识别软件DGSplice．SpliceKey已提供网络服务：http：／／infosci．hust．edu．cn／SpliceKey／．     

隐Markov模型在剪接位点识别中的应用

剪接位点的识别是基因识别中的一个重要环节。由于现有的基因识别算法主要关注编码区的整体特性 ,而并不着重考虑个别位点的信息 ,因此难以准确地识别出剪接位点。考虑到剪接位点附近的保守序列的相邻碱基之间应该存在某种相关性 ,利用一阶 Markov链建立了表述这种相关性的模型 ,在此基础之上 ,设计了专门用于剪接拉点识别的隐马氏模型 (HMM)方法。实验结果表明 ,用 HMM描述剪接位点附近序列符合实际情况 ,并且利用这一方法进行剪接位点的识别可以很好地提取位点附近保守序列在边缘分布与条件分布 (转移概率 )上的统计特征。使用该方法对真实剪接位点和虚假剪接位点进行识别 ,识别率均可达 90 %以上。     

反义核酸对肿瘤细胞多药抗性的抑制--作用靶点及作用方式的研究

为了用反义寡聚ＤＮＡ调控要霉素肿瘤细胞ＫＢ－Ａ－１的多药抗性,对反义核酸的预作用位点、作用方式和硫代化类似物进行了研究。筛选得到两段对应于翻译起始区（３）和Ｐ－糖蛋白ＡＴＰ结合位点（９）的２０聚反义片段,发现反义核酸的使用次数对结果的检测有很大影响,采用５μｍｏｌ／Ｌ５μｍｏｌ／Ｌ的反义片段９连续处理４ｄ,实现了将近５０％抑制效果,而其正义和错义链在１０μｍｏｌ／Ｌ沈度的同样处理条件下则没有检测到