钩藤提取物与阿片受体结合特点分析

用放射配体结合实验方法确定钩藤提取物是否能与阿片受体发生相互作用,具体以3H-diprenorphine为标记配体,反应体系及反应条件同饱和结合实验,选用不同浓度的吗啡(10-10~10-5nmol/L)或钩藤提取物(0.125~4mg/mL)为竞争药物,考察钩藤提取物与转染阿片受体的结合水平.结果表明,钩藤提取物(0.125~4 mg/mL)浓度依赖地竞争3H-diprenorphine(1nmol/L)与μ、δ、κ3种阿片受体的结合,其IC50值分别为(1.27±0.86)mg/mL(n=3)(、0.59±0.21)mg/mL(n=4)和(1.20±0.24)mg/mL(n=3),其Ki值分别为(0.41±0.27)mg/mL(n=3)、(0.26±0.09)mg/mL(n=4)和(0.38±0.08)mg/mL(n=3),说明钩藤提取物非选择性地与μ、δ、κ三种阿片受体结合.     

某些自由基清除剂对抗哇巴因致豚鼠心律失常的研究(简报)

用哇巴因致心律失常为模型,观察自由基清除剂亚硒酸钠(Sodium Selenate)和超氧化物歧化酶(Snperoxide dismutase,简称SOD)对哇巴因致动物中毒的影响。豚鼠300-400g体重,随机分为4组:(1)对照组,n=10,静脉注入等容积生理盐水,实验结果表明哇巴因致室早、室速、室颤和死亡的剂量分别为158.15±25.46、179.76±34.29、227.68±39.35和309.87±38.23ug/kg((?)±SD)。(2)亚硒酸钠组,n=10,实验结果表明哇巴因致室早、室速、室颤和死亡的剂量分别为192.60±26.23~*、224.84±29.42~(***)、274.88±20.14~(***)和345.69±23.51~(**)ug/kg((?)±SD)。(3) SOD组,n=8,实验结果表明哇巴     

玉米螟人工饲养研究Ⅱ.越冬代成虫羽化期不同对其后代的影响

越冬代亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis(Guenée)的老熟滞育幼虫,由田间引入实验室后,终止滞育发育的历期参差不齐,越冬代成虫羽化早的与晚的相差可达20多天。本实验观察了不同时期羽化的成虫,对其子代的发育有何影响。观察结果表明,早期羽化的成虫其所生之后代,正常化蛹率高,可达61.63％;蛹重也较重,雌蛹重106.33±8.51mg((?)±SE,下同),雄蛹重70.76±5.81mg。中期羽化成虫的后代,各项指标居中,正常化蛹率为59.52％,雌蛹重82.33±8.97mg,雄蛹重61.47±8.88mg。而晚期羽化成虫所生之后代,则正常化蛹率最低,只约50.15％,蛹重也最低,雌蛹重79.88±6.67mg,雄蛹重58.18±6.41mg。性比值(雄/雌)从早期,中期至晚期羽化者的后代由高变低,分别为1.05、0.93和0.89,意义不明,可能是雄虫发育一般早于雌虫之故。从本实验结果可以看出,人工饲养玉米螟中,引进野生种群时,宜选用早期终止滞育羽化的成虫所产之卵繁衍后代,生命力较强,种群质量较高。     

肉仔鸡血清酶活性指标的测定

本试验选择常规饲养AA+品种雌、雄肉仔鸡各10羽,在20、24、28日龄取静脉血,检测血清中的LDH-L、CK、GOT/AST、GPT/ALT活性,经统计学处理,确定血清酶活性指标,同时比较雌雄肉仔鸡血清酶活性指标差异.结果表明20、24、28日龄雄性肉仔鸡血清LDH-L活性分别为704±80,529±51和515±51,雌性分别为490±80,380±51和389±51;CK雄性分别为98±8,87±6和149±30,雌性分别为78±8,65±6和69±30;GOT/AST雄性分别为194±12,225±17和226±14,雌性分别为171±12,213±17和214±14;GPT/ALT雄性分别为14±3,6±1和1±1,雌性分别为16±3,6±1和1±1.20、28日龄的雌、雄肉鸡CK、LDH-L活性差异显著(P<0.05),24日龄的雌、雄肉鸡CK、LDH-L活性差异极显著(P<0.01);20、24、28日龄的雌、雄肉鸡GOT/AST、GPT/ALT活性差异均不显著(P>0.05).     

单组分胰岛素的制备及质量分析

单峰胰岛素经DEAE 琼脂糖快流速离子交换层析后用醋酸锌结晶,得到结晶单组分胰岛素.层析和结晶的胰岛素回收率分别为93.8%±1.0%(n=3)和94.7%±1.5%(n=3).产品经PAGE分析为单带,HPLC检测高分子量杂蛋白和脱酰胺胰岛素的含量分别为0.42%±0.06%(n=3)和1.29%±0.06%(n=3),锌的残留量为0.187%±0.006%(n=3),产品效价为27.13±0.40U/mg(n=3).所有指标均达到USP24的质量标准.该工艺具有回收率高、产品质量好的特点.     

SKF38393对DRG神经元GABA-激活电流的抑制

在大鼠新鲜分离DRG神经元标本上应用全细胞膜片作记录,观察了多巴胺D_1受体的选择性激动剂(±)SKF38393HCI对GABA-激活电流的作用。大部分受检细胞(60/70)对GABA敏感。10~(-6)～10~(-3)mol/L GABA可引起呈剂量依赖性的明显去敏感作用的内向电流。在60个对GABA敏感的细胞中,预加SKF38393引起的膜反应如下:(1)外向电流(7/60);(2)内向电流(5/60);(3)无反应(48/60)。与GABA激活的内向电流相比,SKF38393激活电流幅值较小,无明显去敏感现象。预加SKF38393 30秒对GABA-激活电流幅值的影响如下:产生抑制作用的为88.33％(53/60),增强的为1.66％(1/60),无明显作用的为10.0％(6/0)。SKF38393对10~(-4)mol/L的GABA-激活电流的抑制作用依赖于SKF38393的浓度,在其浓度为10~(-4)、10~(-5)、10~(-6)、10~(-7)mol/L时对GABA-激活电流的抑制(±)分别为46.5％±2.3(n=8)、35.5％±1.2(n=8)、26.8％±1.5(n=7)、24.8％±2.6(n=7)。通过应用二次膜片作(repatch)技术在同一细胞(n=2)以及不同细胞组间(n=14)进行对比,证明:细胞内加蛋白激酶抑制剂H-7后,SKF38393对GABA的抑制作用完全清除。结果提示:SKF38393对GABA-激活电流的抑制作用可能是由于SKF38393激活D_1受体后通过胞内转导机制,使GABA受体通道复合体胞内磷酸化所致。     

米非司酮受体结合力及抗糖皮质激素活性的研究

目的:探讨米非司酮与孕激素受体及糖皮质激素受体相互作用的关系。方法:以放射配体结合实验测定米非司酮与家兔子宫胞浆孕激素受体及大鼠肝细胞浆糖皮质激素受体的相对结合亲和力。结果:与孕酮相比较,米非司酮的相对结合亲和力(RBA)为396.67±25.32,50%抑制浓度(IC50)为(6.61±1.20)nmol/L,P<0.01;与地塞米松相比较,米非司酮的RBA为344.41±57.41,50%IC50为(4.21±1.02)nmol/L,P<0.05。结论:米非司酮与孕激素受体的结合力强于孕酮,具有强的抗孕激素作用和一定的抗糖皮质激素作用。     

IgA肾病患者甘露糖结合蛋白基因多态性的功能研究

探讨IgA肾病 (IgAN)患者甘露糖结合蛋白 (MBP)基因第 5 4号密码子基因多态性对其功能的影响 ,阐明MBP基因多态性与IgAN免疫病理多样性之间联系的本质 .按照MBP基因型分别选取 5 8例IgAN患者 ,其中 30例为单纯IgA伴C3沉积 (A组 ) ,2 8例为IgA、IgG、IgM伴C3、C1q沉积 (AGM组 ) ;另选取 32名健康成人作为正常对照组 .用PCR RFLP方法对所有个体MBP基因型进行分析 ,同时从各个体获得外周血清 ,应用ELISA双抗夹心法测定血清MBP浓度 ,分析比较MBP基因多态性与MBP血清浓度的关系 .①正常对照组中 ,MBP基因GGC/GGC型和GGC/GAC型群体血清MBP浓度分别为 (1711± 177)ng/mL (n =19)、(2 93± 6 3)ng/mL (n =11) ;IgAN患者A组和AGM组GGC/GGC型、GGC/GAC型血清MBP浓度分别为(16 2 2± 194 )ng/mL (n =16 )、(2 71± 4 6 )ng/mL (n =12 )和 (15 12± 2 11)ng/mL (n =17)、(2 10± 4 2 )ng/mL (n =10 ) .上述各人群中 ,GGC/GGC型与GGC/GAC型血清MBP水平存在显著性差异 (P <0 .0 0 0 1) ,GGC/GAC型MBP水平约为GGC/GGC型的 1/6～ 1/8.各人群中由于GAC/GAC型极罕见 ,因此MBP水平无统计学意义 ,但该基因型个体血清MBP水平极低且均相互接近 (<10ng/mL) ,远低于另两种基因型血清MBP的平均水平 .②正常对照组、IgAN患者A组和AG     

钼对小鼠生殖毒性研究

为了探讨高剂量钼的生殖毒性作用,选择40只雌性和20只雄性小鼠(60日龄),随机分成4组,每组10只雌性和5只雄性小鼠,分别为空白对照组、低钼组(100 mg/L)、中钼组(200 mg/L)和高钼组(400 mg/L)。试验处理4周后,雌雄合笼饲养,进行生殖毒性试验。记录产仔数,计算分娩率和每胎产仔数。取F1代小鼠,检测雄鼠睾丸细胞微核率、精子畸形率、精子数量、雄鼠卵泡刺激素和睾酮水平,以及雌鼠卵泡刺激素和雌激素水平。试验结果显示:高钼可显著地降低小鼠的繁殖性能,F1代时,高钼组小鼠分娩率显著低于对照组(P<0.01),而F1代雄性小鼠睾丸细胞微核率、精子畸形率显著高于对照组(P<0.01),精子数量、睾酮水平显著低于对照组(P<0.01)。长期高钼暴露对小鼠有一定的生殖毒性。     

蓖麻蚕雌激素样作用醇提活性部位的研究

通过对实验雌鼠子宫、免疫器官脏器指数、阴道角化细胞发生率的检测,发现蓖麻蚕(PhilosamiacynthiaDonovan)各种醇提物(EEFM)在0.8g/kg的剂量下对实验鼠雌激素活性均达到极显著;各种醇提物对实验鼠免疫器官无显著影响(DES组显著降低实验鼠胸腺重量).各种醇提物雌激素活性相互比较结果表明:蓖麻蚕80%的醇提物(EEFM3)为蓖麻蚕醇提物雌激素样活性最佳部位.利用蓖麻蚕醇提最佳活性部位EEFM3与临床上常用的几种雌激素:E2(雌二醇)、DES(乙稀雌酚)、CEE(孕马结合雌激素)进行比较雌激素活性研究,结果表明:EEFM3在0.8g/kg的剂量下,其雌激素活性接近于雌E2与CEE(0.085×10-3g/kg),并显著增大了实验幼鼠胸腺指数.实验结果表明EEFM3对实验鼠具有显著的雌激素效应,有可能成为雌激素替代疗法(ERT)潜在药源物质.     

Identification and distribution of 5-HT3 receptors in rat brain using radioligand binding

Functional serotonin (5-hydroxytryptamine, 5-HT) receptors have been divided into three subtypes: 5-HT1-like, 5-HT2 and 5-HT3 (ref. 1). Brain binding sites have been identified for both the 5-HT1 and 5-HT2 subtypes. Receptors of the 5-HT3 type have been characterized on isolated peripheral tissue models such as the rat vagus nerve, guinea-pig ileum and isolated rabbit heart. Using these models, selective 5-HT3 receptor antagonists such as MDL 72222 (ref. 5), ICS 205-930 (ref. 6), GR38032F (ref. 7) and BRL 43694 (ref. 8) have been developed. Recently, GR38032F, MDL 72222 and ICS 205-930 have been shown to have behavioural effects in rodents and primates that undoubtedly reflect an action in the central nervous system (refs 9-11 and unpublished observations), suggesting the existence of 5-HT3 receptors in the brain. Here we report direct evidence for the existence of 5-HT3 receptors in rat brain tissue and their distribution, based on high affinity binding of the potent 5-HT3 receptor antagonist 3H-GR65630 to homogenates of rat entorhinal cortex. Selective 5-HT3 receptor antagonists and agonists inhibited binding of 3H-GR65630 with high affinities which correlated well with their actions on the rat isolated vagus nerve. Binding was differentially distributed throughout the brain with high concentrations in cortical and limbic areas.     

催产素对大鼠惊吓应激和习惯化的影响

通过外周肌注和侧脑室埋植导管给予催产素（ＯＴ）两种方法,观察分析ＯＴ对大鼠基础心率,惊吓应激和习惯化的影响．结果显示：（１）两种方法给予ＯＴ,均使大鼠的基础心率下降,但仅有外周肌注达到统计学差异（Ｐ＜０．０１）;（２）利用噪声作为外界刺激源,以心率改变作为惊吓应激反应的指标,可见肌注ＯＴ明显减弱雌性大鼠的惊吓应激反应;（３）以心率不变作为习惯化建立的指标,我们发现,两种给药方法均对大鼠的习惯化有明显的抑制作用（Ｐ＜０．０１）．     

多巴胺(DA)抑制哺乳动物离体卵巢组织雌二醇(E_2)分泌的初步研究

本文采用放免分析方法,探讨了多巴胺（DA）对离体的哺乳动物卵巢组织雌二醇分泌活动的影响,结果表明,多巴胺（DA）可直接作用于抑制雌二醇的分泌释放,其详细机制有待于进一步研究。     

Cerebellar GABAA receptor selective for a behavioural alcohol antagonist

Benzodiazepines are widely prescribed anxiolytics and anticonvulsants which bind with high affinity to sites on the GABAA receptor/Cl- channel complex and potentiate the effect of the neurotransmitter GABA (gamma-aminobutyric acid). The heterogeneity of benzodiazepine recognition sites in the central nervous system was revealed by studies showing different classes of GABAA receptor subunits (classes alpha, beta and gamma) and variant subunits in these classes, particularly in the alpha-class. Expression of recombinant subunits produces functional receptors; when certain alpha-variants are coexpressed with beta- and gamma-subunits the resulting receptors have pharmacological properties characteristic of GABAA-benzodiazepine type I or type II receptors. The alpha-variants are differentially expressed in the central nervous system and can be photoaffinity-labelled with benzodiazepines. Here we report a novel alpha-subunit (alpha 6) of cerebellar granule cells. We show that recombinant receptors composed of alpha 6, beta 2 and gamma 2 subunits bind with high affinity to the GABA agonist [3H]muscimol and the benzodiazepine [3H]Ro15-4513 but not the other benzodiazepines or beta-carboniles. The same distinctive pharmacology is observed with GABAA receptors from rat cerebellum immunoprecipitated by an antiserum specific for the alpha 6 subunit. We conclude that this alpha-subunit is part of a cerebellar receptor subtype, selective for Ro15-4513, an antagonist of alcohol-induced motor incoordination and ataxia.     

性激素诱导大鼠前列腺增生的免疫组织化学研究

Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠６５只分为正常对照组和实验组．后者均做双侧睾丸摘除术，术后３周根据不同的处理方法分为单纯阉割组、雄激素（Ｔ）处理组和不同比例雌雄激素处理组．以免疫组化ＡＢＣ法观察大鼠前列腺腹叶（ＲＶＰ）内雄激素受体（ＡＲ）和雌激素受体（ＥＲ）含量的变化。结果表明ＲＶＰ内ＥＲ变化不明显，ＡＲ含量在各实验组不同：单纯阉割组动物ＡＲ逐渐减少，雌激素（Ｅ２）与Ｔ同时处理较单用Ｔ处理ＡＲ增加更为显著，Ｅ２增加ＲＶＰ内ＡＲ含量的这种作用须在大鼠体内Ｔ大于一定含量时方能实现。提示Ｅ２可通过增加ＲＶＰ内ＡＲ的含量协同Ｔ对ＲＶＰ正常及异常生长的调节作用，本文对这种效应进行了讨论。     

High constitutive activity of native H3 receptors regulates histamine neurons in brain

Some G-protein-coupled receptors display 'constitutive activity', that is, spontaneous activity in the absence of agonist. This means that a proportion of the receptor population spontaneously undergoes an allosteric transition, leading to a conformation that can bind G proteins. The process has been shown to occur with recombinant receptors expressed at high density, and/or mutated, but also non-mutated recombinant receptors expressed at physiological concentrations. Transgenic mice that express a constitutively active mutant of the beta2-adrenergic receptor display cardiac anomalies; and spontaneous receptor mutations leading to constitutive activity are at the origin of some human diseases. Nevertheless, this process has not previously been found to occur in animals expressing normal levels of receptor. Here we show that two isoforms of the recombinant rat H3 receptor display high constitutive activity. Using drugs that abrogate this activity ('inverse agonists') and a drug that opposes both agonists and inverse agonists ('neutral antagonist'), we show that constitutive activity of native H3 receptors is present in rodent brain and that it controls histaminergic neuron activity in vivo. Inverse agonists may therefore find therapeutic applications, even in the case of diseases involving non-mutated receptors expressed at normal levels.     

类固醇激素受体在扬子鳄睾丸表达的免疫细胞化学研究

用免疫细胞化学方法对雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR) 在扬子鳄睾丸中进行定位研究.结果表明,三种类固醇激素受体在扬子鳄睾丸中都有分布:雄激素受体在睾丸的肌样细胞和支持细胞中呈阳性反应,雌激素受体在睾丸的间质细胞中呈 阳性反应,孕激素受体在睾丸的生精细胞中呈阳性反应.推测结果表明,雄激素受体在扬子 鳄精子发生过程有重要作用;雌激素受体可能在扬子鳄睾丸发育过程中影响睾丸间质细胞雄性激素的分泌,进而调节生精过程和精子发育成熟,孕激素受体可能通过转换成AR和ER来对精子发生进行调节.这些结果为证明性类固醇激素参与调节扬子鳄性腺生殖内分泌调控提供了重要的形态学新证据.     

卵泡分化排卵和黄体发生的分子基础

本文综述了近二十年来在雌性生殖研究领域中五个方面的研究进展。（1）原始卵泡的启动生长和分化：原始卵泡生长启动可能受卵巢内在因子,像生长因子的调控,而不是人所想象的FSH;启动生长的卵泡受生长因子,FSH,激活素,孤儿受体和其他卵巢旁分泌因子调控,并发展成“优势卵泡”;（2）优势卵泡和闭锁卵泡：FSH,激活素／抑制素,卵泡抑素和雌激素调节卵泡分化的趋向,它们的相互作用和平衡决定“优热卵泡”和“闭锁卵泡”的形成,其中雌激素在此起关键性作用;它一方面促进FSH对LH受体的诱导作用,增加GC上的LH受体数目;另一方面可促进GC芳香水酶的产生,使此卵泡进入良性循环,发展为优势卵泡;（3）两种细胞两种促性尕激素学说：在FSH和LH作用下,GC产生的孕酮可被膜细胞利用转化为雄激素;因此GC和TC相互作用是卵巢雌激素产生的前提;（4）排卵:GC主要产生tPA,而TC主要表达tPA的抑制因子PAI－1,在激素作用下,GC的tPA和TC的PAI－1相互作用,形成一个局部蛋白水解窗口,它对卵泡破裂起决定性作用;（5）黄体形成和萎缩：uPA和MMP／TIMP系统对黄体发生起重要作用;而tPA对黄体萎缩起关键作用。