乳清蛋白的理化特性及乳化性能的研究

用差示扫描量热法和激光衍射法研究乳清蛋白的热变性及其乳化性能。结果表明，当pH26，乳清蛋白分子比较容易展开，形成的乳状液稳定性较好；胰蛋白酶对乳清蛋白的有限度水解可明显地提高它的溶解度，并改善它在pH6时的乳化性能；除了等电点pH外，蛋白质在油滴表面上的吸附量约为2～3mg/油，属于单分子层吸附；在80℃下预热处理乳清蛋白1h，只有当其浓度4％时。才能显著地提高乳状液的稳定性。     

用铜盐法纯化牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶

牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶（Ｃｕ·Ｚｎ－ＳＯＤ），经溶血，ＣｕＣｌ２处理及离子交换柱层析等步骤被纯化到高度均一程度．纯化酶在聚丙烯酰胺梯度凝胶图谱上的活性染色带与蛋白染色带相对应，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱上呈现单一区带．元素分析表明该酶含有２个锌原子和多于２个的铜原子．分子量和亚基分子量分别为３３５００和１７８００．在紫外区酶有４个明显吸收峰，分别为２７４．６ｎｍ，２６６．２ｎｍ，２５８．８ｎｍ和２４５．４ｎｍ．该酶对热稳定，纯化后酶比活性为１４５２５ｕ／ｍｇ，活力回收率为４５％．本文对经ＣｕＣｌ２处理与氯仿－乙醇处理纯化的牛血Ｃｕ·Ｚｎ－ＳＯＤ进行比较，结果表明，氯仿－乙醇对酶的某些性质有影响     

牛血超氧化物歧化酶(bovine superoxide dismutase)生产工艺研究

将红细胞连续分离、热变性以及超滤技术应用在牛血SOD生产制备中，使SOD生产成本大幅降低，实现牛血SOD生产工业化，实现表明，冷冻血球和新鲜血球在酶的收率、纯度以及比活等方面无明显差别；热变性、超滤、丙酮沉淀等各工艺步骤酶的活性以及收率基本稳定；通过重组SOD技术使失去铜锌离子失活的酶蛋白恢复酶的催化活性。     

La Sota毒株胰蛋白酶作用试验

在３７℃条件下,用０．１％和１％胰蛋白酶消化新城疫病毒（ＮＤＶ）ＬａＳｏｔａ毒株１２和２４ｈ后,接种１５日龄ＮＤＶ非免疫雏鸡,接种１５ｄ内雏鸡健活,采取血清测定血凝抑制（ＨＩ）抗体效价与对照组无显著差异;用０．１％和１％胰蛋白酶分别作用ＬａＳｏｔａ毒株２、４、１２和２４ｈ后,接种１０日龄ＮＤＶ非免疫鸡胚,鸡胚平均致死时间及尿囊液中病毒血凝（ＨＡ）效价与对照差异不显著;ＬａＳｏｔａ、Ｃｌｏｎｅ－３０     

不同NaCl处理条件诱导盐胁迫蛋白的效果

应用四因素两水平正交实验设计，研究不同ＮａＣｌ处理条件对高粱蛋白质ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳谱带的影响。结果表明：高浓度ＮａＣｌ和长时间处理所诱导的盐胁迫蛋白不同；低龄高盐组合诱导出的盐胁迫蛋白种类较多；处理方式对蛋白质在细胞中的含量无显著影响。     

牛血超氧化物歧化酶在变性因素影响下的酶活与构象变化

应用圆二色谱（ＣＤ谱），测定了牛血超氧化物歧化酶（ＳＯＤ），在不同变性因素下的构象变化，并和酶活性作了比较。ＳＯＤ的ＣＤ谱分析表明，它是一种含β－折叠较多的酶（４２．３％），其分子的稳定性很高，对变性因素的作用不甚敏感。但是在特定实验条件下，ＳＯＤ的酶活性仍然会发生变化，构象也会发生改变，并且构象变化还早于酶活的降低。     

纳米磁性体系的增强磁热熵效应：Ⅱ.基于实验测量及分子？…

通过实验测量不同团簇尺寸下的纳米Ｇｄ材料的磁热熵效应，结果表明在纳米尺度下，Ｇｄ材料具有增强和磁热熵效应并尖于最佳纳米尺寸，实验结果直接证实了用统计力学理论及Ｍｏｎｔｅ Ｃａｒｌｏ方法处理模拟结果，当纳米团簇尺寸减小时，伴随着磁热熵变△Ｓ的增加，超铁磁－超顺磁转变温度ｔｓｃ发生下降偏移，采用分子场理论，导出了增强磁热熵变△Ｓ与温度偏移因子（１－ｔ）＾－１／２满足很好的标度关系△Ｓ～（ｔ）＾－１／２     

SiO2基nm复合薄膜制备及微区不均匀性研究

采用溶胶－凝胶工艺制备了ＳｉＯ２基ｎｍ复合薄膜．ＦＴ－ＩＲ分析表明，薄膜中羟基（－ＯＨ）的含量随热处理温度的提高而减少；通入ＣＣｌ４热处理，可以使－ＯＨ含量明显降低．ＳＥＭ及电子能谱显示薄膜中存在亚μｍ的不均匀区域，此区域含Ｃ量较高．经８００℃通氧热处理，不均匀区域的含Ｃ量与均匀区域相同．Ｘ射线衍射的掠入射分析表明，随热处理温度的提高，晶粒尺寸沿膜厚方向的差异增大．     

金枪鱼加工副产物的生物转化工艺研究

主要针对中性蛋白酶、胰蛋白酶、风味酶3种酶在不同加酶量下酶解金枪鱼加工副产物(下脚料)过程对其可溶性蛋白转化率的影响,以及保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、酵母菌3种可食用性商业菌在不同添加量下对其可溶性蛋白转化率的影响。得出以下结论:金枪鱼下脚料添加量为2 g,料液比1:5时,酶解过程风味蛋白酶转化率最大值16.79%,胰蛋白酶转化率最大值16.63%,中性蛋白酶转化率最大值16.57%。发酵过程中,酵母菌接种量40%在发酵第5天时,蛋白转化率最大值为16.48%,嗜热链球菌接种量30%在发酵第5天时,蛋白转化率最大值15.77%,酶解及发酵过程,分别能使蛋白转化率提高,提高金枪鱼下脚料等低值海产品加工副产物的利用率,在不同加酶量及接种量条件,不同接种时间下可溶蛋白转化率发生变化。     

美拉德反应对花生分离蛋白体外消化特性的影响

为了探讨花生蛋白饮料在热杀菌过程中的美拉德反应发生情况以及对后续模拟消化特性的的影响,本文在80℃、100℃、121℃条件下分别对外加葡萄糖的花生分离蛋白湿热处理30min,然后进行体外模拟消化,并与同样处理条件但未加葡萄糖的样品进行比较.分别检测了热处理后样品在294nm和420nm处的吸光值,模拟消化产物的水解度、蛋白消化率、肽分子量分布和游离氨基酸组成.试验结果表明:未加葡萄糖的样品热处理后也发生了褐变,加入葡萄糖后褐变程度显著加深;热处理及美拉德反应致使后续的模拟消化产物中分子量较大的肽段含量增加;三个热处理条件中只有121℃超高温热处理有利于消化产物水解度的提高,而美拉德反应的发生总体上不利于花生分离蛋白的消化利用.     

羧基功能化超顺磁性纳米粒子吸附牛血清蛋白的特性

以牛血清白蛋白(BSA)为目标蛋白,考察时间、BSA质量浓度、pH值、温度等条件对磁性纳米粒子吸附BSA的影响,并对吸附有BSA的磁性纳米粒子的解吸附情况进行研究.结果表明:在25~45 ℃内,温度几乎不影响吸附过程;pH值为4.0~4.5达最大吸附量,该吸附过程满足准一级动力学方程和Freundlich等温吸附模型;Na₂HPO₄对其有较强的脱附作用,但粒子与BSA之间不是简单的物理相互作用,而是静电相互作用,导致其脱附水平依然较低,仅为20.06%.     

酪蛋白磷酸肽的制备及性质

用不同的蛋白水解酶水解牛乳酪蛋白,通过钙－乙醇沉淀法和离子交换法从水解产物中提取酪蛋白磷酸肽（ＣＰＰｓ）,并对ＣＰＰｓ进行体外化学分析及体内生物学功能鉴定,结果表明：用双酶法（胰蛋白酶和Ａｌｃａｌａｓｅ）制得的ＣＰＰｓ３（平均相对分子质量为４ ０６６,摩尔Ｎ／Ｐ为５．４８）在体外的持钙能力最强,连续喂食该样品的小鼠对钙的吸收明显提高（吸收率达５６％ ）。     

Solution structure of a protein denatured state and folding intermediate

The most controversial area in protein folding concerns its earliest stages. Questions such as whether there are genuine folding intermediates, and whether the events at the earliest stages are just rearrangements of the denatured state or progress from populated transition states, remain unresolved. The problem is that there is a lack of experimental high-resolution structural information about early folding intermediates and denatured states under conditions that favour folding because competent states spontaneously fold rapidly. Here we have solved directly the solution structure of a true denatured state by nuclear magnetic resonance under conditions that would normally favour folding, and directly studied its equilibrium and kinetic behaviour. We engineered a mutant of Drosophila melanogaster Engrailed homeodomain that folds and unfolds reversibly just by changing ionic strength. At high ionic strength, the mutant L16A is an ultra-fast folding native protein, just like the wild-type protein; however, at physiological ionic strength it is denatured. The denatured state is a well-ordered folding intermediate, poised to fold by docking helices and breaking some non-native interactions. It unfolds relatively progressively with increasingly denaturing conditions, and so superficially resembles a denatured state with properties that vary with conditions. Such ill-defined unfolding is a common feature of early folding intermediate states and accounts for why there are so many controversies about intermediates versus compact denatured states in protein folding.     

小米蛋白的营养消化性研究

采用体外模拟消化法分别对小米乳、小米醇提蛋白、小米分离蛋白进行营养消化性分析.研究发现,与对照大豆乳相比,小米乳中的蛋白质表现出较低的消化率,仅为35.2％.其中,小米蛋白主要成分之一醇溶蛋白是导致小蛋白消化率较低的主要原因.醇溶蛋白本身形成的二硫键以及其强烈的疏水性是导致其不被消化的关键因素.     

低频超声波对大豆胰蛋白酶抑制素的处理效果

采用２０ｋＨｚ的低频超声波对大豆胰蛋白酶抑制素（ＳＴＩ）进行了处理。结果表明,超声波对经纯化了的鲍曼－贝尔克抑制素（ＢＢＩ）几乎不起钝化作用,对生豆奶中天然存在的ＳＴＩ的钝化效果要比对从大豆中提取纯化的ＳＴＩ好得多,说明纯化了的ＳＴＩ似对超声处理较稳定;豆奶中大分子蛋白组分１１Ｓ和７Ｓ的存在有助地ＳＴＩ的纯化;低频超声波对生豆奶中的ＢＢＩ似乎有轻微的激活作用;在生豆奶中添加半胱氨酸、亚硫酸钠的胃液     

海藻酸钠微囊对蛋白质控制释放的分析

研究一种蛋白质类药物的控缓释系统的工艺条件及其体外释放行为;以牛血清白蛋白(BSA)为模型药物,海藻酸钠(Alg)为包埋材料制备微囊,研究不同的阳离子、不同BSA浓度时,测定微囊的形态、粒径和包埋率的影响,并对该微囊包埋前后的完整性和体外溶出速度进行了测定;用Ba2 制备的微囊成型稳定,粒径均一,具有良好的包埋率;发现微囊在制备过程中,BSA没有受到破坏,BSA蛋白分子保持了结构的完整性;用海藻酸钠作为包埋材料对蛋白有一定的缓释效果,突释效应也并不十分明显.     

Determination of the total concentration of casein and β-lactoglobulin by indirect competitive ELISA in milk and dairy products

The main purpose of this work was to develop an assay as a means of quality control in milk and dairy products. As specific and high abundant proteins in milk and diary products, casein and β-lactoglobulin were chosen as the targets, and an indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was developed for determination of the total concentration of casein and β-lactoglobulin. The detection limit of the assay was 79.07 ng/mL, and a working range of the calibration curve was from 140.6 to 36,000 ng/mL. The intrassay and inter-assay coefficients of variations were 4.7 % and 6.5 %, respectively. The recoveries ranged from 94.1% to 106.6 %. The developed ELISA assay was used to detect the total con- centration of casein and β-lactoglobulin in liquid milk and milk powder. The results indicated that the developed assay was very specific, and the addition of nonprotein nitrogen （such as melamine, cyanuric acid, and urea） and vegetable protein did not affect the detection. The good performance of the assay makes it suitable for use in the quality control of milk and dairy products.     

不同贮藏温度对UHT乳品质的影响

UHT乳作为一种经超高温瞬时灭菌、无菌灌装生产的长货架期液态乳,具有品质优良,饮用方便等优点.但是在贮藏过程中,UHT乳经常会因残留酶或微生物作用而产生蛋白质凝块、沉淀或脂肪上浮等缺陷,从而影响UHT乳的品质.本研究通过UHT中试生产线无菌灌装制备PET瓶装UHT乳,将其分别置于7,25,37℃下保温观察,定期测定色泽、酪蛋白胶体粒径、蛋白质水解度及理化指标等变化.结果表明,贮藏过程中UHT乳发生的主要反应为蛋白质水解、脂质氧化和美拉德反应,UHT乳的pH值、游离钙离子含量和酪蛋白胶体粒径呈下降趋势,b*值、蛋白水解度、脂质氧化程度呈上升趋势.120 d保温试验结束后,除37℃贮藏下的UHT乳色泽从第90 d开始发生明显变化外,各UHT乳样品并未产生明显的脂肪上浮和蛋白沉淀等现象.     

人尿胰酶抑制剂部分生化性质

用自制人尿胰酶抑制剂（HUTI）,研究了它的部分生物化学性质。经HPLC和凝胶排阻层析表明,纯HUTI的表观分子量与牛血清白蛋白相当,约为66kD。然而,10％SDS－PAGE分析表明,它的分子量约为40kD,这一差异可能与蛋白分子具有高含量 的糖链有关。另外,对HUTI的氨基酸组成、糖含量和抑制类型等亦进行了研究。     

胰蛋白和木瓜蛋白酶酶解酪蛋白产物的免疫活性

通过给小白鼠注射胰蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解酪蛋白产物,测定免疫器官重量、外周血白细胞数和E-玫瑰花环形成率研究酶解产物的免疫活性.结果发现两种酶的酶解物对由环磷酰胺所引起的免疫器官重量下降以及白细胞数的减少具有一定的抑制作用;并且两种酶解物也能够抑制环磷酰胺所引起的花环形成率下降.提示两种酶的酶解物对小鼠的免疫活性可能具有增强趋势.