绿色荧光蛋白在细胞标记及活体示踪领域的应用

随着生命医学研究的不断深入,在微观世界探讨个体细胞的生理功能以及在人体内环境中观察和研究目的细胞与其他细胞间的相互作用时,就离不开细胞标记和活体示踪技术。而在众多细胞标记方法中,绿色荧光蛋白（GFP）凭借其标记细胞效率高,标记强度野强、示踪灵敏度高等优点近年来已经成为越来越多的科研工作者的首选细胞标记和示踪方法。现就绿色荧光蛋白在细胞标记及活体示踪领域的应用作一综述。     

基于核壳荧光纳米颗粒的一种新型纳米pH传感器

改进了一种基于新型的荧光染料——二氧化硅的核壳荧光纳米颗粒的纳米pH传感器，以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人免疫球蛋白IgG为核材料，采用实验条件简单的油包水的微乳液方法制备荧光纳米颗粒，该方法有效地防止了荧光染料在二氧化硅壳层中的泄露。这种FITC的核壳荧光纳米颗粒对pH敏感，在pH值5．5—7之间呈线性响应，且能被单个小鼠巨噬细胞吞噬，借此用于单细胞中pH的实时监测。     

脂筏特异蛋白荧光标记及在PC12细胞中的功能

采用PCR技术从小鼠cDNA文库中扩增出编码caveolin-1和flotillin-1基因片断,通过TOPO载体将基因克隆到表达载体pEGFP,转化至大肠杆菌DH5α中,抽提、纯化后将重组质粒转入PC12细胞中表达,用TIRFM观察高K 刺激下胞内标记蛋白的动态分布情况.实验结果显示重组质粒caveolin-1-pEGFP和flotil-lin-1-pEGFP在PC12细胞中具有一定的功能,而且caveolin-1和flotillin-1在发挥功能时可能有一个向膜转运的过程.     

基于Ag-Pt纳米颗粒标记型C-反应蛋白免疫传感器的研制

通过置换反应水热合成法合成中空银铂纳米材料,并对其进行表征,利用它的催化活性制备了一种灵敏的标记型C-反应蛋白免疫传感器.传感器首先以中空石墨烯为固定材料将C-反应蛋白抗体固定在电极上,采用中空银铂纳米颗粒标记C-反应蛋白抗体,通过夹心法检测C-反应蛋白.在最优的实验条件下,对C-反应蛋白进行检测,其线性范围为 0.1~150ng/mL,线性相关系数为0.9643,检测限为0.02ng/mL.     

纳米金标记细胞的荧光寿命成像及其三维重建

为了研究在基于纳米金的肿瘤光动力学疗法以及肿瘤热疗中纳米金在细胞中的分布及代谢,利用多光子荧光显微镜技术对在热疗中纳米金结合的肿瘤细胞进行了多次扫描成像,并采用一种基于区域的活动轮廓模型图像分割算法,对与纳米金结合的细胞的多光子荧光显微图像进行处理,在一幅具有多个细胞的图像中分割出单个细胞的轮廓。根据细胞断层切片图像的轮廓采用移动立方体算法,对细胞进行三维重建,绘制出细胞表面的三维模型,再利用纳米金的荧光寿命和光强来标定纳米金在细胞具体位置的分布。结果表明,在一定时间内,纳米金会进入细胞并在不同的区域内呈现一定的分布。这与抗原抗体结合会导致抗体的内化,从而使纳米金进入细胞内的事实相符。这种技术将会为更加直观、全面地研究纳米金与细胞的相互作用以及纳米金在细胞内具体位置(比如某个细胞器内的分布)提供一种可行的方法。     

绿色荧光蛋白在分子细胞生物学研究中的应用

绿我荧光蛋白具有优良的特性,在蓝光或长紫外光的激发下,不需要任何外源底物或内源辅助因子的参入就能发出绿色荧光,绿色荧光蛋白基因的表达可用来监控活细胞或生物体中基因表达和蛋白质的定位,这是一个革命性的进展,而且,对基因ＤＮＡ序列的改造可能使绿色荧光蛋白的发光特性更加优良,从而共应用范围会更加广泛。     

二氧化硅荧光纳米颗粒的性质及应用

二氧化硅壳核型荧光纳米颗粒有良好的水溶性,易于制备、分离和表面修饰,具有无法比拟的特性,己经在生物分析的很多领域得到了广泛的应用,具有广泛的应用前景。     

嗅蛋白对铕纳米颗粒荧光增强效应的研究

以单宁酸做还原剂,在表面活性剂十二烷基苯磺酸钠（sodium dodecylbenzene sulfonate,SDBS）形成的微乳环境中将硝酸铕还原成铕（europium,Eu）纳米颗粒,通过修饰剂硫辛酸与嗅蛋白结合,分析铕纳米颗粒结合嗅蛋白前后的荧光变化与嗅蛋白含量的关系及机制。结果发现铕纳米颗粒与嗅蛋白结合后荧光强度明显增强,在优化条件下,荧光强度与嗅蛋白的浓度在0.020～8.0mg/L范围内呈良好的线性关系,检出限为0.012mg/L,对5.0mg/L 嗅蛋白进行11次平行测定,其相对标准偏差为2.4%。嗅蛋白主要通过分子间能量转移使铕纳米颗粒的荧光强度增强,利用该变化测定嗅蛋白含量,结果灵敏、准确,令人满意。     

NaGdF_4:Yb;Er纳米颗粒的合成及对HeLa细胞的生物标记

以稀土硬脂酸盐为前驱体,采用溶剂热法合成了单分散的NaGdF4:Yb,Er上转换荧光纳米颗粒.通过透射电子显微镜(TEM)、X射线衍射仪(XRD)、荧光(FL)光谱仪、磁滞回线(MHL)等对合成的样品进行了表征.所合成的纳米颗粒粒径均一,平均粒径为20 nm左右,形状规则,结晶度高,发光性能良好,同时具有优越的顺磁性.利用经典的Stober法对纳米颗粒进行了表面氨基修饰,将修饰后的纳米颗粒与转铁蛋白结合制成探针,实现了对HeLa细胞的标记与成像.标记结果表明:该方法特异性较好,且红外光激发可有效避免来自生物样品的自体荧光干扰.     

一种新的席位公平分配方法

定义了席位余额的概念,基于此设计了一种新的席位分配方法,证明了该方法在一些条件下满足分配方法3条理想化原则,并说明这种分配方法具有很好的几何解释.通过仿真对该方法与其他方法作了对比.     

一种基于边缘检测的图像融合新方法

提出一种新的基于边缘检测的图像融合方法.该方法利用Canny算子进行边缘检测,将边缘检测图像的逻辑值与小波变换进行结合.在小波变换域内,对低频和高频子图像采用区域融合的方法.最后,进行小波逆变换得到融合图像.通过主观评价和包括熵、均方根误差、峰值信噪比和互信息等客观评价标准进行评价,结果表明,基于边缘检测的图像融合方法融合效果较好,对于模糊部分不同的源图像进行融合具有一定的通用性.     

基于模糊集理论的汉语指令识别

以模糊集理论为基础，提出了一种汉语指令识别的模糊语音描述和模糊匹配算法，在语音信号的时间规整中，使用一种改进的非线性帧数规整算法，在４０条指令的识别实验中，正确率达９３％以上。     

基于混合特征提取的手写体数字识别方法的研究

文章对用ＢＰ神经网络实现手写体数字的识别进行了研究，提出混合特征提取的方法，提高了特征提取的效率和识别率，对一些不能识别的样本做了分析和研究，采取在样本集中增加相近样本的方法改善神经网络对这些样本的识别效果。     

基于PP-YOLO深度学习模型的赣南脐橙目标检测方法

果实检测在研究脐橙采摘机械化发展中有着重要作用,然而不良天气条件将对目标果实的检测和识别产生不利影响。针对雾天和雨天情形下脐橙果实图像模糊、噪声复杂,检测速度较慢和准确率较低的问题,通过采用单阶段目标检测网络PP-YOLO来研究不良天气条件下赣南脐橙果实的识别。通过主干网络ResNet提取特征并结合FPN（特征金字塔网络）进行特征融合实现多尺度检测,且基本实现端到端检测。实验结果表明,所提出的PP-YOLO检测模型可实现雾天和雨天情况下赣南脐橙检测任务,mAP分别为89.06%和91.01%,识别效率分别可达到75.30 fps和75.44 fps,可以尝试在脐橙采摘机器人的研制中加以应用。     

新型带荧光基团蒽的偶氮双酚类杯芳烃的合成研究(Ⅱ)

报道新型带荧光基团蒽的偶氮双酚类杯芳烃：５、１１、１７、２３－四对苯甲酸蒽甲酯偶氮基杯〔４〕间苯二酚芳烃的合成，研究关键因素对反应的影响，产物通过ＵＶ、ＩＲ、＾１Ｈ－ＮＭＲ、ＭＳ和荧光光谱进行表征。     

新型带荧光基团蒽的Resorcinarenes 的合成

以蒽为反应起始原料,首先合成高产率的９－蒽甲醛,后者再同间苯二酚反应合成一种新型的在亚甲基桥上带光基团蒽的Ｒｅｓｏｒｃｉｎａｒｅｎｅｓ。     

基于粗集方法的一种文字识别

文字识别作为模式识别的一个重要方面，其研究获得广泛重视。本文基于粗集理论的观点，把文字识别问题看作是模式识别中简化知识表达与信息分类处理问题，提出一种新的文字识别方法，这不仅对模式识别中如何提取有用特征是一种新的探索，而且对简化信息处理也是一种新的方法。本文介绍了基于粗集理论的文字知识表达的方法，探讨了模式识别中的特征提取及最小决策算法，并给出一个文字识别的例子来说明这种有效的方法。