新型磁性高分子多孔微球固定化木瓜蛋白酶活性与稳定性研究

以亲水性甲基丙烯酸环氧丙酯为单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,在致孔剂存在下通过悬浮聚合法将经过表面改性的Fe3O4磁性纳米粒子包埋其中,合成了一种高亲水性、粒度均匀、分散性好、表面富含功能环氧基的磁性高分子多孔复合微球.并以木瓜蛋白酶为模式酶,进行固定化酶研究.探讨了木瓜蛋白酶的最佳固定化条件,并在优化条件下制备出了高活性、性能好的固定化酶且证明其催化活性与游离酶相比不受显著影响.以酪蛋白为底物,研究了固定化酶的酶学性质和动力学参数.结果表明:固定化酶的最适反应温度80℃,最适反应pH值为7.5,Km值4.25,酶活回收率为55.2%.固定化酶在热稳定性、pH稳定性和操作稳定性上较游离酶均得到了较大幅度的提高.     

高活力天冬氨酸酶的分离提纯及性质

采用基因工程技术构建具有较高活性突变菌株Ｔ３３，以它为产酶菌株分离提取天冬氨酸酶，并研究它的酶学特性。结果表明，分子量为１９００００。最适反应ＰＨ＝８．０，最适反应温度为３７℃。     

水相胶束体系对辣根过氧化物酶活性及构象的影响

报道不同胶束体系中辣根过氧化物酶的活力变化，实验表明，ＨＲＰ在水相胶束体系中活力半衰期比在有机相中长；在聚合过程中可以保持较高活力，使酶用量减少，胶束体系不同，对酶分子构象影响也不同，其影响程度低于非水有机相。     

相转移催化(PTC)在二茂铁合成中的应用

(一)相转移催化(Phase Transfer Catalysis)反应是有机化学一种新发展的有效实验方法。由于它具有反应条件温和、操作简便、节省时间、副反应少、产品纯、产率高等显著优点而被广泛应用。 相转移催化反应是在催化剂作用下,反应物由一相转入另一相中进行的有机化学反应。在非均相中(特别是水与有机溶剂的两相中)的有机化学反应,往往因为分别在两相中的反应物难以接触而反应慢,收率低。若在其中加入一些催化剂,例如季胺盐等,能使水中反应物以离子对方式进入有机相中,反应便迅速进行。(图1)这些催化剂称为相转移催化剂,这种反应称为相转移催化反应。     

一种高性能硼酸酯型汽车制动液的制备

以甲醇与环氧丙烷反应合成聚丙醇甲醚,制得的聚丙醇甲醚与硼酸反应,合成聚丙醇甲醚硼酸酯,合成聚丙醇甲醚硼酸酯的最佳工艺条件为硼酸与聚丙醇甲醚的质量比为1∶26、反应温度为130 ℃、时间3 h,收率达93%.对合成产品进行了红外分析,推测出合成产品的结构.以合成的聚醇醚和硼酸酯为主体材料,制备了高性能硼酸酯型汽车制动液,对其质量检测表明,其性能指标已达到DOT4规格要求.     

花生几丁质酶的纯化及酶学性质研究

本课题利用亲和色谱和凝胶过滤色谱法从花生种子中分离得到了几丁质酶.经SDS-PAGE鉴定,该酶蛋白已达电泳纯,分子量约34.4 kD.在还原和非还原状态下均显示单一区带,表明其为单体蛋白.此外,通过等电聚焦法可测得该酶等电点为5.1.而酶学性质的相关研究则表明：该酶最适pH为5.4,最适反应温度为40～50℃.     

香菇紫金Ⅰ号产木聚糖酶固体发酵条件及酶学性质研究

以啤酒糟作为主要原料,以香菇紫金Ⅰ号为菌种进行木聚糖酶发酵研究,通过单因素和正交试验确定最佳培养基组分及其配比,并对其粗酶的酶学性质进行了研究.结果表明:最适合的固态发酵培养条件为:碳源为啤酒糟:玉米芯:麸皮=6∶2∶2,1.5％的酵母膏作为氮源,pH为5是最适反应,三角瓶装装瓶量为5 g/125 mL,25％的接种量,为期8d的培养,1∶3.2的料水比.粗酶液的最适反应温度为50℃,最适pH为5,相对酶活在30～60℃范围内仍保持在80％以上,适应的温度范围较宽.     

一种DOT5.1硼酸酯型汽车制动液的制备

以正丙醇和环氧丙烷反应合成聚丙醇丙醚,考察了反应温度、压力的影响,确定合成聚丙醇丙醚最佳反应温度为160～180 ℃;再采用脱色吸附过滤及减压蒸馏工艺处理得到四、五(六)聚丙醇丙醚,收率为80%.以硼酸和1,3 丙二醇合成六元环硼酸酯,再加入四、五(六)聚丙醇丙醚继续合成,最佳工艺条件为硼酸与醇和醚的质量比为 1∶1.23∶28,前阶段反应温度120 ℃,反应时间2 h,酯收率达81.35%;后阶段反应温度150 ℃,反应时间1 h,酯收率达89.68%.对合成产品进行了红外分析,推测出合成产品的结构.以合成的四、五(六)聚丙醇丙醚和六元环聚醚硼酸酯为主体材料,复配添加剂,制备了高性能硼酸酯型汽车制动液.对该制动液产品的质量检测表明,其性能指标达到美国DOT5.1规格要求.     

壳聚糖固定α—淀粉酶的研究（Ⅰ）

用壳聚和载钵，戊二醛为交联剂，采用吸附交联法将α－淀粉酶固定化，研究了固定化条件和固定化酶的性能，在酶浓度８ｇ／Ｌ，６￣８℃，ｐＨ６．８，吸附１２ｈ，１％戊二醛交联４ｈ的固定化条件下，固定化效果较优，固定化酶的酸碱稳定性，热稳定性，贮存稳定性较好，最适作用ｐＨ较自由酶酶移，最适作用温度及Ｋｍ值较自由酶高，同时显示出一定的操作稳定性。     

壳聚精固定α－淀粉酶的研究（I）

用壳聚糖作载体，戊二醛为交联剂，采用吸附交联法将α－淀粉酶固定化，研究了固定化条件和固定化酶的性能．在酶浓度８ｇ／Ｌ，６～８℃，ｐＨ６．８，吸附１２ｈ，ｌ％戊二醛交联４ｈ的固定化条件下，固定化效果较优．固定化酶的酸碱稳定性、热稳定性、贮存稳定性较好．最适作用ｐＨ较自由酶酸移，最适作用温度及Ｋｍ值较自由酶高，同时显示出一定的操作稳定性．     

酶性DNA（Ⅱ）：蜘蛛和小牛胸腺DNA具有酯酶活性

发现虎纹捕鸟蛛和小牛胸腺ＤＮＡ具有酯酶活性，其与底物作用后最大吸收波长范围在５２０ｎｍ－５８０ｎｍ；具有一般酶促反应动力学的特点。认为ＤＮＡ酯酶活性可能与ＤＮＡ结构有关。     

壳聚糖酶的理化性质初步研究

对壳聚糖酶理化性质进行初步实验研究,通过测定不同条件下酶的活力来研究酶的性质.实验结果表明,所用菌种所产壳聚糖酶最适反应温度和pH值分别为50℃和5.6,NH+对该酶有明显的促进作用,而Na+,K+,Mg2+,Cu2+,Ag+,NH+,Mn2+对该酶有一定的抑制作用.Fe3+,Ca2+对酶的抵制作用最明显.     

聚苯乙烯固载季铵盐相转移催化活性比较

合成了几种不同类型的聚苯乙烯固载季铵盐,并利用丙醇异戊酯的水解反应,苯基丁基醚的合成反应及卤素交换反应筛选出活性最佳的催化剂。     

β-蒎烯环氧化重排制水芹醛

以松节油中分出的β－蒎烯为原料，经过氧乙酸环氧化和固体酸催化重排合成了水芹醛，考察了催化剂、溶剂、反应时间等反应的影响。优化条件下β－烯可完全转化，其环氧化的选择性达８２％。     

米曲霉（Aspergillus oqyzae）A—9005酸性蛋白酶的初步…

米曲霉Ａ－９００５菌株的麸曲培养物，经水浸泡抽提其酸性蛋白酶活力为６０００ｕ／ｇ左右。硫酸铵分段沉淀中，饱和度为７０％，８０％和９０％时沉淀的比活率高，得率在７０％以上。该酸性蛋白酶的最适作用温度为５０℃，最适ｐＨ为３．５－４．７时酶活力稳定，ｐＨ超过６时酶活力迅速丧失。     

麻蜥乳酸脱氢酶同工酶酶学性质比较研究

本利用垂直极聚丙烯酶胺凝胶电沪分离麻蜥乳酸脱氢酶同工酶。研究了ＰＨ值、温度及底物浓度对同工酶的影响。比较了各同工酶的最适ＰＨ值，最适温度及米氏常数。     

Co^2＋对植物酯酶法测定蔬果农药残留的活化作用的研究

系统研究了酶液用量、激活剂Co^2＋的浓度及用量、吸收波长、反应时间,反应温度对酶促反应的影响以及固蓝B盐用量和显色时间对显色体系的影响。实验结果表明,在植物酯酶抑制法测蔬菜农药残留时加入Co^2＋,可以提高检测的灵敏度,降低敌敌畏农药残留的最低检测限。     

复合酶法提取香菇多糖

研究了复合酶法提取香菇多糖的最佳工艺.采用木瓜蛋白酶、纤维素酶复合处理,对酶量的配比、作用温度、最适pH值、作用时间进行正交实验.确定了酶法提取香菇多糖的最佳工艺:加酶比例为2∶1(木瓜蛋白酶∶纤维素酶),酶解反应温度55℃,pH值6.5,反应时间3 h,多糖的提取率为16.1%,与传统水提法相比较提取率提高了8.6%.     

米曲氨基酰化酶的纯化及固定化酶法拆分D,L—丙氨酸

利用硫酸铵分级与双水相萃取结合的方法从米曲霉中提取米曲氨基酰化酶,并将其固定在ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ａ－２５上,用于拆分Ｄ,Ｌ－丙氨酸,并对该酶及固定化酶的酶学性质进行研究。     

米曲霉（Aspergillusoryzae）A－9005酸性蛋白酶的初步研究

米曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｏｒｙｚａｅ）Ａ－９００５菌株的麸曲培养物，经水浸泡抽提其酸性蛋白酶活力为６０００ｕ／ｇ左右。硫酸铵分段沉淀中，饱和度为７０％，８０％和９０％时沉淀的比活最高，得率在７０％以上，该酸性蛋白酶的最适作用温度为５０℃，最适ｐＨ为３．５～４．７．在ｐＨ３．５～５．５时酶活力稳定，ｐＨ超过６时酶活力迅速丧失。在４０～６０℃下该酶的活力相对稳定，在７０℃下酶活力半衰期仍达７４ｍｉｎ，这一结果表明该酶为一耐热性酶种。Ｍｎ~（２＋）对酶有激活作用，其它多数金属离子如Ｚｎ~（２＋），Ｆｅ~（２＋），Ｋ~＋，Ｍｇ~（２＋），Ｌｉ~＋及Ｃａ~（２＋）等对酶有轻度抑制作用或无影响。