猪胸腺激素肽PT_3的研究

本文报导从猪胸腺素注射剂中,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分离精制得猪胸腺激素活性肽PT_3的方法。该肽PT_3经反复聚丙烯酰胺凝胶园盘电泳,呈单一区带。经测定,此肽主要由酸性和中性氨基酸组成。用Sephadex-G-50测定其分子量的结果。E-玫瑰花环法测定,有活性。     

鼠肾纤维蛋白溶酶原激活酶的纯化和部分鉴定

采用肝素—Sepharose亲和层析和凝胶过滤自鼠肾提取纤维蛋白溶酶原激活酶,产率5.1×10~(-5)％。在还原和非还原状态下SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳及电泳酶谱分析均呈单一区带,证实产物仍保持单链状态。测得其分子量为70000。纤维平板试验和无纤维蛋白溶酶原纤维平板试验证实其活性依赖于纤维蛋白溶酶原。     

黄鳝超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究

黄鳝超氧化物歧化酶粗酶液，经过正丁醇脱脂，丙酮分级沉淀，DEAE-琼脂糖离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤，从黄鳝中分离纯化获得铁超氧化物歧化酶(Fe-SOD)，并对其性质进行研究，最终该酶的比活力为1500U／mg，提纯倍数为368．5．回收率为24．7％．该酶对KCN不敏感．而对H2O2敏感，对热较稳定，对酸碱有较强的耐受性，抗胃蛋白酶的破坏，聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电点聚焦电泳结果表明：纯化酶蛋白呈一条带，酶分子量约为85kD，亚基分子量约为16．5kD，等电点为7．15。     

人类绒毛膜促性腺激素（HCG）的高分辨双向聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

采用高分辨的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D—PAGE)对人类绒毛膜促性腺激素(~bCG)进行分析。第一向等电点聚焦电泳(IEF)后,在第二向SDS—聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直板上电泳(SDS)—PAGE),电泳结束,用银染色法染色,电泳图谱上得到三条主要的蛋白区带,即A,B和C带,并测定了它们的pH值和分子量,A带分子量是36K为未裂解的~hCG,B带分子量是23K为~hCG的β—基亚,C带分子量是17K为~hCG的α—亚基,通过双向电泳的分析和鉴定,为~hCG的分子结构在双向电泳中的特性提供了初步参考数据。     

汾酒大曲根霉糖化酶的研究：Ⅴ： 纯酶的某些理化性质

用汾酒大曲根霉糖化酶的纯酶制剂,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和萄聚糖凝胶过滤法均表明其外观分子量为78,400,经二硫苏糖醇还原和碘乙酸烷化后,凝胶电泳区带并无变化,说明该酶链间无双硫键存在,是只具一条多肽链的蛋白质。聚丙烯酰胺等电聚焦法测定该酶等电点为pH7.8。糖分析表明酶的含糖量为14.55%,相当于约63单糖分子。从氨基酸组成分析表明,该酶含赖氨酸较多。而谷氨酸较少,是一个典型的根霉型糖化酶。     

文昌鱼酸性磷酸酯酶的化学修饰

用DEAE-纤维素(DE-22)并改进酶的提纯方法,聚丙烯酰胺凝胶电泳为单一蛋白区带的酶制剂比活力为359μM/mg(E)/min(Npp为底物)·用凝胶过滤法测得该酶分子量为58600,氨基酸组成有20种,共467个氨基酸残基。10~(-4)M pCMB使酶活力丧失98％;1×10~(-3)M PMSP该酶活力丧失96％,2×10~(-4)M NBS以及1×10~(-2)M BrAc酶活力均丧失90％·酶修饰失活呈一级反应,修饰过的酶紫外280nm吸收峰消失·初步判断文昌鱼AcPase分子上的Cys,Trp,His,Ser等氨基酸残基可能是酶的活力必需基团。     

果胶酶的分离提纯及某些性质研究

本文报导了一种制备高纯度果胶酶的方法,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得其分子量为32000,用等电聚焦电泳法测得其等电点为pH8.0～8.2,用圆二色谱测得此酶呈无规则卷曲构象。     

红酵母苯丙氨酸解氨酶的分离纯化及性质研究

采用玻珠破壁 ,硫酸铵分级沉淀 ,凝胶过滤和离子交换等方法 ,从L 苯丙氨酸工业生产菌株红酵母中分离纯化苯丙氨酸解氨酶 (PAL) ,纯化倍数为 1 39,收率为 1 2 6%,纯化到的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳均为单一蛋白带 ,其亚基分子量约为79.4kD该酶最适反应温度为 40℃ ,最适反应pH为 8.5 ,以L Phe为底物 ,40℃ ,pH 8.5的Km值为 3 87× 1 0 - 4 mol/L 除了Mg2 +和Na+,其它金属离子如Fe3+,Cu2 +,Co2 +,Hg2 +等对其都有明显的抑制作用 .     

猪脾血红素加氧酶的纯化和某些性质研究

通过DEAE——纤维素层析.羟基磷灰石层析及Sepharose CL-6B层析,从猪脾中获得了纯的血红素加氧酶。纯化的酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳及SDS-聚丙烯酰胺电泳中均呈现现单一条带。测得该酶分子量约为30500道尔顿,含272个氨基酸残基。氨基酸组成分析表明该酶中谷氨酸、谷氨酰胺含量丰富,而半胱氨酸和色氨酸含量低。在280nm处具有较低的消光系数(E1%1cm=8.12),而在406nm处具有强烈的光吸收。Triton×-100和EDTA对酶有稳定作用。     

PAG中RNA电泳区带的快速染色方法

本文对聚丙烯酰胺凝胶(PAG)中RNA电泳区带的亚甲兰染色,提出一种新方法,根据需要可在0.5或1～2小时内直接显带,无须背景脱色程序,染色灵敏度为10~(-8)g。     

微量农药和大肠杆菌诱导蓖麻蚕产生抗菌物质的研究

用微量除虫菊酯类农药和大肠杆菌(E·coli)诱导蓖麻蚕(Philosamiacynthia ricini)蛹后,其血淋巴经聚丙烯酰胺凝胶电泳测活和葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶层析分离后,在蛹血淋巴中至少可分离到4种具有抗菌活性的物质,3种为偏碱性的抗菌蛋白和抗菌多肽,1种为偏酸性的大分子抗菌蛋白。蓖麻蚕蛹免疫血淋巴中的抗菌物质以抗菌蛋白为主,其分子量为7万-7.5万和2.3万-2.4万道尔顿。两种小分子抗菌物质的含量较少,按其电泳位置推测,分子量为4000道尔顿左右。诱导前和诱导后3hr内注射放线菌素D均能抑制抗菌物质的合成。     

花生几丁质酶的纯化及酶学性质研究

本课题利用亲和色谱和凝胶过滤色谱法从花生种子中分离得到了几丁质酶.经SDS-PAGE鉴定,该酶蛋白已达电泳纯,分子量约34.4 kD.在还原和非还原状态下均显示单一区带,表明其为单体蛋白.此外,通过等电聚焦法可测得该酶等电点为5.1.而酶学性质的相关研究则表明:该酶最适pH为5.4,最适反应温度为40～50℃.     

罗氏沼虾肝胰腺几丁质酶分离纯化及部分性质

报道罗氏沼虾（Macrobrachium rosenbergii)经抽提,再生几丁质亲和层析,Sephadex G-100凝胶过滤,CM－Sephadex C-25凝胶离子交换层析,获得了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的酶制品,SDS－聚丙酰胺凝胶电泳法测得其分子量约为38kDa,等电聚焦测得其等电点为5.7,该酶的最适pH值为4,在pH3.0-8.0间表现稳定。最适温度55℃,高于65℃稳定性降低。     

甘薯糖蛋白和多糖的分离纯化及其鉴定

经水溶提取、乙醇沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等步骤,成功从广薯98中分离到两种甘薯糖蛋白组分SPG-1、SPG-3和一种甘薯多糖组分SPPS-2.经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶过滤层析鉴定,均为单一的甘薯糖蛋白、甘薯多糖组分.     

赤小豆胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及其性质研究

用酸抽提、2.5％TCA热处理、硫酸铵盐析、凝胶层析和DEAE纤维素离子交换层析等方法,从中药赤小豆中分离得到一种胰蛋白酶抑制剂。聚丙烯酰胺凝胶电泳呈单一谱带。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定,其分子量为7400。N-末端分析和氨基酸组成测定结果表明,赤小豆胰蛋白酶抑制剂不含半胱氨酸和胱氨酸,是以酪氨酸为N-末端,由54个氨基酸残基组成的单一多肽链。它仅对胰蛋白酶有较强的抑制作用,对胰凝乳蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶均无明显的抑制活力,对热及酸碱亦较稳定。     

黑豆中抗真菌蛋白的纯化及活性鉴定

利用硫酸铵分级沉降、亲和色谱Affi-gel和离子交换色谱SP-Toyopearl从黑豆种子中分离出一种抗菌蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定达到电泳纯.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准蛋白迁移率与分子量对数的关系,计算出该抗菌蛋白的分子量为93.3 kDa,还原和非还原状态下均显示单一区带,说明该抗真菌蛋白为单倍体蛋白.抑菌试验结果表明,此纯化的蛋白对植物致病菌瓜果腐霉病菌、棉花枯萎病菌、苹果轮纹病菌、葡萄灰霉病菌和菜豆根腐病菌等5种真菌的生长具有不同的抑制作用.     

幼年和成年小白鼠胸腺LDH同工酶谱变化的电泳分析

用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳方法分析了不同时期幼鼠和成年鼠胸腺的 LDH同工酶谱变化 .结果表明 ,成年鼠胸腺 L DH酶谱的 5种带是以 LDH4和 L DH5 带占主要优势 ,幼鼠胸腺 LDH酶谱只显现 LDH1 和 LDH2 两条带 .同工酶谱的变化说明 ,幼鼠胸腺 L DH同工酶显现的为心型酶谱 ,它与 B基因表达有关 ;成年鼠胸腺 L DH同工酶显示的是肌型酶谱 ,它与A基因表达为主有关 .     

牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶的纯化及性质

牛血红细胞铜锌超氧物歧化酶经氯仿－乙醇混合液处理，丙酮沉淀，凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析等步骤提取和纯化．纯化酶在聚丙烯酰胺凝胶电脉（ＰＡＧＥ）图谱上的两条蛋白染色带和活性染色带相互对应，在ＳＤＳ—ＰＡＧＥ聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈现单一区单一区带，说明该酶已纯化到均一程度．此酶分子量为３４０００，亚基分予量为１７０００，在紫外区最大吸收值为２５８ｎｍ．该酶对ＫＣＮ和Ｈ２Ｏ２均敏感，在０～７５℃温度范围内对热稳定．纯化酶的比活性为７４６３Ｕ／ｍｇ，纯化１００９倍，酶的回收率为７９％．     

花生蛋白质的主要种类和等电点的研究

花生蛋白等电聚焦显１１条区带，其中６条很明显，说明花生至少有１１类不同等电点的蛋白质。等电点分别为４，３、４．５、５．１、５．４、６．５、６．７的蛋白质是主要的，他们的聚丙烯酰胺凝胶电泳和花生蛋白乳状液的醋酸纤维薄膜电泳的结果都有３条区带，其中两条比较明显，说明花生蛋白有两种主要组分和一种次要组分；这三种组分可有多种等电点，一种等电点可同时有这三种组分。     

我国眼镜蛇科四个种蛇毒的电泳鉴定

近十多年来,从眼镜蛇等科的毒蛇中先后分离出多种具有神经毒性及膜毒性的旦白质毒素。可是有关眼镜蛇类蛇毒对比的电泳图谱,在国内、外均未见报导;眼镜蛇科中的金环蛇与眼镜王蛇的电泳图谱亦未见报导。从蛇毒中提纯的旦白质毒素,其分子量大多数都较小。以突触后神经毒旦白为例,其分子量在7000至8000之间,并具强碱性,等电点位于pH九至pH十之间。一九七一年Bonilla等(1)报导了一种酸性缓冲系统聚丙烯酰胺电泳法,用于鉴