坛紫菜多糖的分离纯化和结构分析(Ⅱ)

对广东产坛紫菜沸水提取多糖采用Sevag法脱蛋白 ,冻干后得粗多糖 ,得率为 8%.在粗多糖溶液中加入CTAB以沉淀除去酸性多糖PP1,超滤以纯化中性多糖PP2 ,PP2经DEAE 纤维素、葡聚糖凝胶G2 0 0进一步纯化 .经纸层析、凝胶过滤及紫外光谱分析鉴定为纯品 .通过红外光谱、气相色谱对PP2进行组成分析 ,再用化学方法测定其总糖 ,3,6 内醚 L 半乳糖及硫酸基的含量 ,分别为 86 .33%、5.4 2 5%和 12 .2 %.最后通过高碘酸氧化 ,Smith降解等方法测定PP2的化学结构 ,结果表明 ,PP2由半乳糖、3,6 内醚 L 半乳糖、甘露糖、葡萄糖、木糖和阿拉伯糖组成 ,具有α ,β型糖苷键 ,连接方式有 (1→ 3)、(1→ 4 )、(1→ 2 ) 3种 .PP1分子量通过凝胶过滤法初步测得为 16 .2万左右 .     

紫菜多糖的提取及抗流感病毒活性研究

采用4种方法提取坛紫菜多糖,其中综合法提取率高达16.58%.气相色谱及化学分析表明其单糖主要由半乳糖、3,6-内醚-L-半乳糖、甘露糖和少量木糖组成.可溶性多糖经DEAE-23柱层析进一步纯化,得到蒸馏水洗脱组分———中性多糖和1.0-2.0mol LNaCl梯度洗脱组分———酸性多糖,各占4.12%和95.88%.酸性多糖经硫酸降解和超滤膜分离得到多糖组分F1(350030000),二者比例为4∶1.鸡胚实验表明,紫菜多糖具有抗甲1型流感病毒活性,且F1>F2>中性多糖.     

不同提取水温对龙须菜多糖的得率、组成和免疫活性的影响

系统研究了不同提取水温（30～100℃,温度梯度10℃,共8组）对龙须菜非胶体粗多糖的得率、多糖、蛋白、硫酸基、3,6内醚半乳糖、半乳糖含量的影响,并进一步比较了各组多糖的体外免疫活性和抗病毒能力。结果表明：不同提取水温对龙须菜非胶体粗多糖的得率影响显著（P〈0.01）,50℃提取水温组的粗多糖得率较高,蛋白含量较低（P〈0.01）,在30～50℃提取水温范围内,总糖含量显著上升;50℃水温组非胶体粗多糖的硫酸基含量显著高于40℃组,各组非胶体多糖的3,6内醚半乳糖含量在15%～20%之间,而半乳糖的含量则在30%～40%;各组非胶体多糖均表现出显著的体外免疫活性,其中50℃提取水温组的免疫活性显著高于其它各组,各组非胶体多糖均没有表现出抗疱疹病毒（HSV-Ⅰ和Ⅱ）活性。因此,综合多糖得率、生化组成及免疫活性,建议龙须菜免疫多糖的最佳提取水温为50℃。     

琼枝和异枝麒麟菜中硫酸酯基多糖不同提取方法的化学分析比较

采用“直接水提法”以及“KCl分级法”来提取琼枝和异枝麒麟菜中的多糖．分别用蒽酮-硫酸法、间苯二酚法、明胶-BaCl2分光光度法测定多糖样品的总糖质量分数、3,6-内醚半乳糖质量分数、总硫酸基质量分数;用凝胶色谱法测定各多糖样品的相对分子质量分布情况：用GCMS测定麒麟菜硫酸酯基多糖的单糖种类及含量．结果显示采用“直接水提法”以及“KCl分级法”比传统的“碱处理法”产率高,而且硫酸基质量分数也明显增高．两种麒麟菜多糖均为硫酸酯基多糖,大部分都属于k-卡拉胶类．各多糖样品的相对分子质量分布在10^5左右．麒麟菜多糖主要是由半乳糖和3,6-内醚半乳糖组成,此外还含有少量的葡萄糖、木糖、塔罗糖和艾杜糖等,不同方法提取的多糖样品其单糖种类基本一致．     

白阿魏菇菌丝体多糖分离纯化工艺的优化和结构分析

对白阿魏菇菌丝体多糖的提取和纯化进行了优化设计，粗多糖经DEAE—cellulose及SephadexG-100柱层析，纯化得纯多糖(PNMP)，该多糖经聚丙烯酰胺凝胶电泳，SephadexG-100柱层析和紫外光谱分析鉴定纯度；通过红外光谱，气相色谱对PNMP进行组分分析；再用高碘酸氧化，Smith降解和测硫酸基法来鉴定其化学结构．结果表明，白阿魏菇菌丝体多糖提取最佳工艺为，用水浸提3h，pH7．O，温度90℃，搅拌，料水比为1／15，浸提2次，醇析浓度70％；蛋白质去除中，V氯仿：V正丁醇=2：V样品：V氯仿-正丁醇=2：1，萃取时间为40min，得粗多糖CPNMP，纯度为59．2％；在结构分析中，纯多糖(PNMP)纯度为83．22％，硫酸基含量为7．5％；该多糖至少由半乳糖、甘露糖、葡萄糖、阿拉伯糖等组成，糖苷键连接方式为1→3，1→6。     

柘树根多糖的分离纯化及组成初步研究

以柘树（Cudrania tricuspidata （Carr.） Bur.）的根为材料,经热水抽提、木瓜蛋白酶-Sevag法除蛋白、乙醇沉淀和凝胶柱层析分离纯化,得到1种水溶性的柘树根多糖（CTP）并研究了其单糖组成. 采用紫外光谱和红外光谱法对柘树根多糖进行了定性分析,结果表明,柘树根多糖具有多糖特征性的紫外和红外吸收峰,不含糖醛酸;高效凝胶渗透色谱法测定结果表明,柘树根多糖的峰值分子量为18881;采用气相色谱法测定柘树根多糖中单糖的种类和构成比例,结果表明,柘树根多糖主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖等4种单糖组成,并计算出4种单糖的摩尔组成比例.     

金樱子果实中多糖的提取与分离纯化

目的：从金樱子果实中提取与纯化多糖。方法：用热水提取金樱子果实粗多糖，经Sevage脱蛋白，透析后经DEAE-Sepharose Fast Flow，和CM—Sepharose Fast Flow柱色谱分离纯化金樱子粗多糖；经高效液相色谱法测定其相对分子量；进行完全酸水解研究多糖的组成。结果：得到两个金樱子多糖组分RLPSⅠ、Ⅱ，其相对分子量分别为22712和16051；初步确定RLPS Ⅱ由D—半乳糖、D—甘露糖和木糖组成。结论：从中药金樱子中提取分离出了两个多糖。     

沙棘叶水溶性多糖SJ21的研究

热水提取乙醇沉淀获得沙棘叶粗多糖，经酸性乙醇分级和DEAE-SephadexA-25纯化得多糖SJ21．纯度鉴定表明多糖SJ21为均一多糖，分子量约为70KD．单糖组成为Xyl、Ara、Man、Gal、Glc．摩尔比为1．0：2．1：5．3：3．7：2．9．多糖SJ21结构分析采用了UV、IR、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析、GC、GC-MS和NMR等方法．结果表明：多糖SJ21主链由β-（1→4）Man基、β-（1→6）Gal基、β-（1→4）Glc基构成，其中Man在6-O处有分枝；Gal在3-O处和4-O处有分枝；支链由（1→4）、（1→3）Xyl基和（1→4）或（1→5）Ara基和（1→2、4）或（1→2、5）Ara；末端基为Glc、Gal、Ara．沙棘多糖SJ21是一新结构多糖，为首次从该植物中分离得到．     

κ-卡拉胶寡糖的酶解制备及其体外抗病毒活性

 利用Pseudoalteromonas sp.AJ5-13菌株所产生的κ-卡拉胶酶降解κ-卡拉胶制备κ-卡拉胶寡糖,通过电喷雾离子化飞行时间质谱（ ESI-TOF-MS）和核磁共振波谱（¹³C-NMR）分析,该酶的水解产物主要是硫酸κ-新卡拉二糖、硫酸κ-新卡拉四糖、硫酸κ-新卡拉六糖、硫酸κ-新卡拉八糖和硫酸κ-新卡拉十糖,确定该κ-卡拉胶酶专门水解κ-卡拉胶3,6-内醚-D-半乳糖和4-硫酸-D-半乳糖之间的β-1,4糖苷键,产生3,6-内醚-D-半乳糖作为非还原端,D-半乳糖作为还原端的κ-新卡拉寡糖。采用体外Vero细胞培养法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法研究了寡糖抗标准单纯疱疹病毒1型(HSV-1)活性 。结果表明,κ-新卡拉寡糖对Vero细胞毒性极低,可干扰HSV-1毒株向Vero细胞的吸附。     

碱提虎奶菇菌核多糖的分离纯化及结构分析

采用热碱浸提法从虎奶菇菌核中提取多糖,经醇沉、离心、透析、浓缩、冷冻干燥,得到虎奶菇菌核碱提粗多糖.通过DEAE—52纤维素柱层析,Sephadex G—150柱层析纯化,得到虎奶菇菌核碱提多糖(Pleurotus tuber-regium(Fr.)Sing Sclerotium polysaccharide,简称PP1).经紫外分光法和高效液相色谱(HPLC)检测PP1为均一多糖,并计算出PP1的分子质量为5.96×105 Da.对PP1进行高碘酸氧化,Smith降解,通过气相色谱(GC)、红外光谱(IR)对其结构进行分析,得出PP1的单糖组成中仅有葡萄糖,化学结构是以β-D-吡喃葡萄糖为单元连接的多糖.     

牛舌菌(Fistulina hepatica)水溶性多糖FHP-2P的分离与理化特征

牛舌菌(Fistulinahepatica)子实体经热水抽提,乙醇沉淀,蛋白酶法和Sevag法去蛋白后得粗多糖FHP.FHP经DEAE-纤维素和SephadexG-200柱进一步纯化得到牛舌菌多糖纯品FHP-2P.经测定该多糖为均一组分,相对分子质量为7.6×104.红外扫描呈现出典型的多糖吸收峰,并含有β-型糖苷连接键;紫外扫描无核酸和蛋白质的特征吸收峰.纸层析和气相色谱分析结果表明FHP-2P的单糖组成为D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和D-木糖,其摩尔比为13.9∶2.85∶3.25∶0.48.     

太子参多糖的提取纯化及其单糖组分的鉴定

目的:通过提取纯化得到太子参精制多糖,并对其单糖组成进行鉴定分析。方法:水提醇沉后的多糖采用Sevag法除去蛋白,再经Sephadex G-100凝胶柱层析进一步纯化,透析冻干后制得纯度较高的精制多糖。高温强酸条件下将多糖进行水解,加入1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)溶液衍生化后采用HPLC法分析单糖组成。结果:精制太子参多糖的含量为82.30%,主要由葡萄糖、半乳糖、木糖、鼠李糖等单糖组成。结论:本研究可为太子参药材质量标准的提升完善提供基础。     

长白山小刺猴头子实体多糖结构的研究

从长白山小刺猴头子实体中提取多糖,其组成是以葡萄糖为主,并夹有少量的半乳糖和甘露糖。经纯化与鉴定得单一葡聚糖,其平均分子量为4万。经结构分析表明该葡聚糖具有多分枝结构。主链由β(1→3)D—葡萄糖残基组成,侧链由β—(1←6)键连结,在分枝或末端有少量β—(1→4)糖甘键。     

弯斑蛸多糖纯化及对小鼠脾细胞增殖的影响

将弯斑蛸粗多糖COG经精制得POG,再通过离子交换和凝胶柱层析纯化,经化学法和红外光谱确定主要组成和结构特征,用MTT比色法测定脾细胞的增殖.结果表明:柱层析得到的POGⅠ、POGⅡ和POGⅠ-1总糖含量在26.3%~42.2%之间,总糖胺聚糖含量均高于30%,葡萄糖醛酸含量接近20%,红外光谱提示均具有典型的糖胺聚糖特征;各多糖对小鼠脾细胞增殖均有明显的促进作用,纯度最高的POGⅠ-1促进作用最强.该弯斑蛸多糖为氨基己糖和葡萄糖醛酸组成的多糖,具有增强免疫作用.     

拟康氏木霉产胞外多糖的分离纯化及组成初步研究

以拟康氏木霉（Trichoderma pseudokoningii SDTP1）产胞外多糖粗品为材料,经木瓜蛋白酶-Sevag法除蛋白、凝胶柱层析分离纯化,得到一种水溶性的拟康氏木霉产胞外多糖纯品（TPP-0）,并研究了其单糖组成.采用紫外光谱和红外光谱法对拟康氏木霉产胞外多糖进行了定性分析.结果表明,拟康氏木霉产胞外多糖具有多糖特征性的紫外和红外吸收峰 高效凝胶渗透色谱法测定结果表明,拟康氏木霉产胞外多糖的峰值分子量为1.8×104 采用气相色谱法测定拟康氏木霉产胞外多糖中单糖的种类和构成比例,结果表明,拟康氏木霉产胞外多糖主要由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖等3种单糖组成,含有葡萄糖醛酸,并计算出3种单糖的摩尔组成比例.     

穿心莲多糖的研究(Ⅲ)——穿心莲果胶的结构

穿心莲果胶是一种酸性杂多糖的混合物,经分离纯化得均一的 P_(A_1),它含半乳糖、半乳糖醛酸、阿拉伯糖、鼠李糖的分子比为3.6:1.7:1.8:1。P_(A_1)的结构分析用高碘酸氧化、Smifh 降解、甲基化等方法,经 HPLC,G、C 及 G、C—MS 联用鉴定。结果表明 P_(A_1)为多分枝结构,分子主链由β(1→3)D—半乳糖基组成,部分半乳糖基 C_6位有支链,尚有部分半乳糖基以(1→6)键连按。分子的支链由半乳糖醛酸(1→4),鼠李糖基(1→3或1→2,4),阿拉伯糖基(1→5或1→3,5)组成。     

蕨麻水溶性多糖的提取及其单糖组分的分析

本文采用热水提取、乙醇沉淀、a-淀粉酶法脱淀粉、链酶蛋白酶和Sevag法联合除蛋白,得到蕨麻多糖.对提取的蕨麻多糖进行了总糖含量及糖醛酸含量的测定.粗多糖(P1)总糖含量为41.8%,糖醛酸含量为11.1%.脱淀粉脱蛋白多糖(P2)总糖含量为39.4%,糖醛酸含量为35.9%.经纸层析和高效液相色谱分析,表明该多糖主要由阿拉伯糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、半乳糖醛酸组成,说明蕨麻多糖为酸性杂多糖.     

蛹虫草多糖分离纯化及性质的研究

以蛹虫草菌丝体粗多糖为材料进行分离纯化及性质的研究.提取液浓缩用3倍体积乙醇沉淀,等电点Sevag法除蛋白,10%H2O2脱色,得到的粗多糖经DEAE-DE52纤维素柱层析,用0～0.2mol/L的NaCl洗脱,可以得到未完全分离的多糖.将此多糖经Sephadex-G200柱层析,用蒸馏水洗脱.将多糖用Sepharose CL-6B柱层析进行纯度鉴定,经验证是单一多糖.对多糖进行纸层析,证明组分是D-葡萄糖和D-半乳糖.用高效液相色谱法测定多糖分子质量为3.76×104ku.以昆明种小鼠对多糖进行生物活性研究,多糖对小鼠S180肉瘤抑制率达到71.92%.     

极大螺旋藻多糖的分离纯化及化学结构分析

极大螺旋藻干粉经热水提取、醇析、Ｓｅｖａｇ法脱蛋白得粗多糖ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶柱层析得白色粉末状多糖纯品（Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｏｆ Ｓｐｉｒｕｌｉｎａ ｍａｘｉｍａ,ＰＳＭ）。纸层析、凝胶柱层析、高效液相色谱分析表明为均一组分,硫酸－咔唑法、硅胶薄层层析和气相色谱分析表明ＰＳＭ是一种由Ｌ－鼠李糖、Ｄ－木糖、Ｄ－葡萄糖、Ｄ－半乳糖、Ｄ－阿拉伯糖Ｄ－甘露糖和葡萄糖醛酸组成的酸性杂多     

树舌、茯苓多糖的提取分离及组成

对树舌(Ganoderma apparatus)、茯苓(poria cocos)多糖的提取、纯化和单糖的组成成分进行了研究.认为树舌子实体和茯苓菌核经热水提取、脱色和乙醇沉淀分别得到相应多糖(树舌多糖Ga,茯苓多糖Pc)粗品,多糖粗品经脱蛋白,乙醇分级沉淀、Sephadex G-15葡聚糖凝胶柱层析纯化得Ga-1、Ga-2、Ga-3和Pc -1、Pc -2、Pc -3 3个级分,并应用薄板层析技术,确定树舌多糖3个级分均由葡萄糖、树胶醛糖、甘露糖、果糖及一种未知单糖组成,茯苓多糖3个级分均由葡萄糖、甘露糖、核糖及一种未知单糖组成.