催化杀虫剂西维因水解的抗体酶制备(Ⅰ)抗原的分子设计、合成与优选

以杀虫剂西维因酯解反应中间过渡态的结构信息进行分子设计，合成了α－萘基磷酸氢酯半抗原，将其与载体蛋白牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和鸡卵清蛋白（ＣＥＡ）偶联，制得了具有不同抗原价（４～２２）的合成抗原．经小鼠免疫学实验，优选出了可产生滴度高、特异性强之抗血清的免疫用抗原（Ｈａｐ－ＢＳＡ）．经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定，用该免疫原制得的鼠抗血清滴度可达１∶３２０００．优选抗原Ｈａｐ－ＢＳＡ可被用作产生催化西维因水解之抗体酶的免疫原．     

抗紫杉醇抗体的制备方法

用化学方法将紫杉醇（Ｔａｘｏｌ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联制成全抗原Ｔａｘｏｌ－ＢＳＡ。以Ｔａｘｏｌ－ＢＳＡ免疫家兔后收集抗血清，分离纯化抗体，经酶联免疫吸附法测定证实抗血清中有特异性抗紫杉醇抗体，将纯化的抗体进行免疫双扩散鉴定，结果表明其有较高滴度（３．２×１０＾２）。     

抗紫杉醇抗体的制备方法

用化学方法将紫杉醇（Ｔａｘｏｌ）与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联制成全抗原Ｔａｘｏｌ－ＢＳＡ．以Ｔａｘｏｌ－ＢＳＡ免疫家兔后收集抗血清，分离纯化抗体，经酶联免疫吸附法测定证实抗血清中有特异性抗紫杉醇抗体，将纯化的抗体进行免疫双扩散鉴定，结果表明其有较高滴度（３．２×１０２）．     

催化杀虫剂西维因水解的抗体酶制备(Ⅱ)多克隆催化抗体的制备、纯化及检测

以优选的合成抗原（Ｈ(ａｐ)－ＢＳＡ）免疫动物产生了滴度为１：５５０００（１号兔,Ｒｔ－１）的兔抗多克隆催化抗体．采用盐析和ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＳｅｐｈａｘｏｓｅＣＬ４Ｂ亲和层析法,从兔抗血清中分离出了具有电泳纯度的多克隆催化抗体．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测,ＩｇＧｓ相对分子质量为１４８０００．纯化后的多克隆抗体,经ＥＬＩＳＡ法测定,其最低检出活性为２×１０(－６)～４×１０(－６)ｇ／Ｌ．     

用酶联免疫印渍技术分析绵羊东毕血吸虫成虫抗原

采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、电泳转印技术和固相免疫标记技术结合的酶联免疫印渍技术（ＥＴＩＢ），首次分析东毕血吸虫成虫抗原。抗原蛋白组分显示：ＳＤ－ＰＡＧＥ共将绵羊东毕血吸虫成虫抗原分离出４２条带；经ＥＴＩＢ分析，与阳性血清反应有１２条带，其中主带有４条，分子量分别为３５、８０、９２和９４ｋＤ，试验表明，这四个分子量的蛋白质具有较强的反应原性，可做为东毕血吸虫的诊断抗原。     

红细胞生成素单克隆抗体制备及初步鉴定

为获取高效价的红细胞生成素（ＥＰＯ）单抗,以建立重组人红细胞生成素（ｈＥＰＯ）测定方法。用基因重组的ｈＥＰＯ与小鼠血清白蛋白经Ｎ－羟基琥珀酰亚胺基－３（２－吡啶基二硫）丙酸酯（ＳＰＤＰ）交联后,常规免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠,并用细胞融合技术制备分泌ｈＥＰＯＭｃＡｂ杂交瘤细胞;用间接ＥＬＩＳＡ和免疫印迹技术将ｈＥＰＯＭｃＡｂ与白色念珠菌胞质抗原的ＭｃＡｂ、嗜肺性军团病杆菌ＭｃＡｂ、ＨＣＶ核心肽ＭｃＡｂ、人μ链ＭｃＡｂ、ＩＦＮ－γＭｃＡｂ的间接ＥＬＩＳＡ同时进行特异性鉴定。经融合后检测,获取一株分泌ｈＥＰＯＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系。初步鉴定,ｈＥＰＯＭｃＡｂ针对ｈＥＰＯ间接ＥＬＩＳＡ效价为１０－７（对照腹水为１０－３）;免疫印迹结果显示：此ＭｃＡｂ与基因重组的ｈＥＰＯ在分子量３０００～４０００之间有一条显色带,而其它几种ＭｃＡｂ均为阴性结果。小分子物质经与同种动物（免疫用动物）血清白蛋白交联后用作免疫抗原,可提高小分子物质的免疫原性,容易获取高效价的单克隆抗体。     

甲型肝炎病毒(H2株)在三种细胞中的感染性滴度比较

本文用恒河猴胚肾传代细胞（ＭＥＫ）、人胚肺成纤维二倍体细胞（ＫＭＢ１７和２ＢＳ）对ＨＡＶ－Ｈ２株感染性滴度进行了初步研究,结果显示Ｈ２株在ＭＥＫ上感染性滴度（ＣＣＩＤ５０／ｍＬ）最高,ＣＣＩＤ５０／ｍＬ比ＫＭＢ１７,２ＢＳ平均ＣＣＩＤ５０／ｍＬ高１．２８ｌｏｇ和１．５９ｌｏｇ．经统计学分析,Ｐ＜０．０５,有显著性差异,证实ＭＥＫ对Ｈ２株最敏感．ＭＥＫ可能是测定ＨＡＶ感染性滴度和繁殖ＨＡＶ较理想的细胞     

缺氧对脑星状细胞内皮素系统基因的影响

目的：内皮素－１（ＥＴ－１）广泛存在于中枢神经系统（ＣＮＳ）并通过其受体Ａ和Ｂ（ＥＴＡＲ，ＥＴＢＲ）产生众多的血管和非血管活性作用，内皮素转移酶（ＥＣＥ）－２ＣＮＳ中主要的ＥＣＥ形式，它将几乎无活性的ＥＴ－１转换成活性的ＥＴ－１。脑星状细胞（ＡＣ）是ＣＮＳ重要组成部分，可产生ＥＴ－１并合有其受体结合点。缺氧可使ＡＣ分泌ＥＴ－１水平增高，但是否对ＡＣＥＴ－１ｍＲＮＡ水平有调节作用则尚无报道。也未见有     

红细胞生成素单克隆抗体制备及初步鉴定

为获取高效价的红细胞生成素（ＥＰ）单抗,以建立重组人红细胞生成素（ｈＥＰＯ）测定方法。用基因重组ｈＥＰＯ与小鼠血清白蛋白经Ｎ－羟基琥珀酰亚胺基－３（２－吡啶基二硫）丙酸酯胞;用间接ＥＬＩＳＡ和免疫印迹技术将ｈＥＰＯＭｃＡｂ与白色念珠菌胞质抗原的ＭｃＡｂ,嗜肺性军团病杆菌ＭｃＡｂ,ＨＣＶ核心肽ＭｃＡｂ,人μ链ＭｃＡｂ,ＩＦＮ－γＭｃＡｂ的间接ＥＬＩＳＡ同时进行特异性鉴定。经融合后检测获取一株分泌ｈＥ     

混合模板剂合成钛硅分子筛

以钛酸正丁酯为钛源，正硅酸乙酯为硅源，在４４３Ｋ用罩丙基溴化铵和四乙基氢氧化铵的混合物的为模板剂，合成了Ｔｉ－Ｓｉ分子筛。经ＸＲＤ，ＦＴ－ＩＲ，ＳＥＭ以及ＢＥＴ比表面积分析，证实了在以ＴＰＡＢｒ＋ＴＥＡＯＨ为模板剂合成的样品中钛已进入ｓｉｌｉｃａｌｉｔｅ－１的骨架，而以ＴＰＡＢｒ＋二乙胺或三甲胺为模板剂则合成不出Ｔｉ－Ｓｉ分子筛。ＳＥＭ的结果表明用氨水和ＴＥＡＯＨ调节反应液的碱度，对晶体的生长和形     

时间分辨荧光免疫分析法测定牛血清白蛋白

用Ｅｕ－ＴＴＡ络合物标记了牛清白蛋白和抗牛血清白蛋白的兔血清。分另用竞争法和夹心法测定了牛血清白蛋白。研究结果表明ＴＴＡ－ＳＯ２Ｃｌ是一种标记效率较高的的双功能络合剂,可获得较高的结合比（ＴＴＡ：ＢＳＡ＝３５：１;ＴＴＡ：ａｎｔｉ－ＢＳＡ＝１００：１）。用时间分辨荧光免疫分析法测定了牛血清白蛋白。竞争法和夹心法的检测下限分别为１５０ｎｇ／ｍＬ和５０ｎｇ／ｍＬ。     

从虫体提纯HBsAg基因表达产物的新方法

感染含乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）基因的粉纹夜蛾重组核型多角体病毒ＴｎＮＰＶ－Ｈｈｓ８５－ＯＣＣ￣＋的粉纹夜蛾幼虫先经匀浆澄清处理后，再用单克隆抗体亲和柱层析的方法提纯ＨＢｓＡｇ蛋白．提纯的蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，出现３条电泳带，分子量分别为２４ＫＤ，２７ＫＤ和４５ＫＤ．用此法从虫体提纯ＨａｓＡｇ基因表达产物，具有简单、快速、高效的特点．     

血栓素A2在抗原引起气道嗜酸性粒细胞浸润中的作用

为观察血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）合成酶抑制剂ＯＫＹ－０４６及ＴＸＡ２受体拮抗剂Ｓ－１４５２对嗜酸性粒细胞（ＥＯＳ）浸润气道的影响,探讨ＴＸＡ２在ＥＯＳ浸润过程的作用,应用鸡卵白蛋白（ＯＶＡ）致敏和反复雾化吸入刺激小鼠以复制过敏性气道炎症模型。除对照组外,各实验组小鼠于每天ＯＶＡ刺激前分别给予不同剂量ＯＫＹ－０４６或Ｓ－１４５２腹腔注射,计数支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＥＯＳ数量并测定ＢＡＬＦ中ＴＸＢ２和６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α）水平。结果,致敏小鼠给予ＯＶＡ刺激后ＢＡＬＦ中ＥＯＳ数,ＴＸＢ２和６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α水平均显著升高,当以ＯＫＹ－０４６或Ｓ－１４５２处理后,ＢＡＬＦ中的ＥＯＳ明显减小,并呈剂量相关性,而且ＯＫＹ－０４６尚能引起ＴＸＢ２水平呈剂量相关性降低。表明,ＴＸＡ２对于ＥＯＳ浸润到呼吸道具有明显的趋化作用,其合成酶抑制剂或受体拮抗剂对于临床治疗哮喘者可能会具有重要的价值。     

溴化苄对二乙基胺甲基膦酸锆的季铵化及三相催化反应

首次制得二乙基胺甲基膦酸锆－亚磷酸锆Ｚｒ（ＨＰＯ＿３）＿（２－ｘ）·（Ｏ＿３ＰＣＨ＿２ＮＥｔ＿２）＿ｘ·Ｈ＿２Ｏ（ＺＤＥＡＭＰ－ＺＰ，ｘ＝０．７５，０．６０，０．５０）．将ＺＤＥＡＭＰ－ＺＰ用溴化苄季铵化，得到部分季铵化的产物：溴化苄基二乙基铵甲基膦酸锆－二乙基胺甲基膦酸锆－业磷酸锆Ｚｒ（ＨＰＯ＿３）＿（２－ｘ）·（Ｏ＿３ＰＣＨ＿２ＮＥｔ＿２）＿（ｘ－ｙ）·（Ｏ＿３ＰＣＨ＿２Ｎ￣＋Ｅｔ＿２·ＣＨ＿２Ｐｈ·Ｂｒ￣－）＿ｙ·Ｈ＿２Ｏ（Ｙ＜Ｘ，ＺＢＤＥＡＭＰＢ－ＺＤＥＡＭＰ－ＺＰ）．ＺＢＤＥＡＭＰＢ－ＺＤＥＡＭＰ－ＺＰ用于进行液／固／液或固固／液三相催化的亲核取代成醚、卤代烃和羧酸盐合成酯及二氯卡宾加成反应，均得到良好的结果。催化剂易于分离和回收，通常回收７０％～１００％，催化剂重复使用１０次以上无明显失活。     

T7启动子促发下的人尿激酶原在大肠杆菌中的高效表达

将人工全化学合成的尿激酶原（ｐｒｏ－ｕｒｏｋｉｎａｓｅ）ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＥＴ３ｄ中，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ＬｙｓＳ，经ＩＰＴＧ诱导，获得了占菌体总蛋白１８％的高表达。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ鉴定，表达产物主要为单链尿激酶，并且在菌体内基本以无活性的包涵体形式存在。经体外变复性，从ＩＬ培养基中可获得３０００００单位的活性尿激酶原。     

沙门氏菌鞭毛蛋白共同抗原的诊断价值探讨

用肠炎、鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白分别免疫５６日龄ＩＣＲ小鼠,经间接ＥＬＩＳＡ和直接凝集试验测定证实,产生了血清分型Ｈ抗原的抗体,亦产生了针对鞭毛蛋白共同抗原组分的抗体。同时,用灭活全菌抗原免疫３日龄伊莎鸡,经单抗ＣＢ８＋ｄｅ７竞争ＥＬＩＳＡ测定,灭活肠炎、鼠伤寒沙门氏菌免疫组同样测出较高滴度共同抗原表位的抗体。进一步用都柏林、鼠伤寒和肠炎沙门氏菌活菌分别人工感染５６日龄ＩＣＲ小鼠、３日龄伊莎鸡和１４     

THESYNTHESIS AND CHARACTERIZATION OF CROSSLINKED GELATIN WITH HYDROPHILIC/ HYDROPHOBIC GRAFTS

以过硫酸钾（ＫＰＳ）－亚硫酸氢钠（ＮａＢＳ）为引发体系，甲基丙烯酸甲酯（ＭＭＡ）及甲基丙烯酸（ＭＡＡ）为接枝单体，制得了具有亲水性与疏水性接枝支链交联明胶．用红外光谱确证了产物结构．实验结果表明，当［ＫＰＳ］＝［ＮａＢＳ］＝６×１０－３Ｍ，［ＭＭＡ］＝６×１０－１Ｍ，Ｇｅｌｘ－ｇ－ＰＭＡＡ＝４ｇ，ＳＬ＝４１００，６０℃反应５小时，接枝率Ｇ％及接枝效率Ｅ％均出现最大值．研究了此类两亲性接枝交联明胶的溶胀行为．     

TS—1分子筛的合成条件和催化反应性能的研究

用硅胶（或硅溶胶）和钛酸酯在四乙基氢氧化铵（ＴＥＡＯＨ）和四丁基氢氧化铵（ＴＢＡＯＨ）为模板剂的条件下制备出钛硅分子筛ＴＳ－１,骨架红外（ＩＲ）,紫外浸反射（ＤＲＳ）,电子能谱（ＸＰＳ）等,测试结果证实钛进入分子筛骨架;讨论了合成分子筛的条件对分子筛催化性能的影响。     

双（正辛基亚磺酰）乙烷萃取铂的性能和机理

用正辛基硫醇与１，２－二溴乙烷合成双（正辛基硫代）乙烷，继而制得双（正辛基亚磺酰）乙烷（ＢＯＳＥ）．研究题示试剂用于溶剂萃取铂的性能和机理．实验表明，在ＫＩ存在下２～６ｍｏｌ／Ｌ盐酸介质，ＢＯＳＥ—乙酸丁酯能定量萃取铂（Ⅳ）．研究萃取与反萃取的最佳条件，ＩＣＰ—ＡＥＳ分析表明常见贱金属离子不被萃取，一定量的贵金属离子不干扰（除钯外）．斜率法测得萃合物的组成为ＰｔＩ２（ＢＯＳＥ），红外光谱指出ＢＯＳＥ的亚砜硫原子与Ｐｔ（Ⅱ）配位，萃合物为一混型配位络合物．提出一种铂与普通金属和贵金属（除钯外）的分离方法     

抗牛免疫缺陷病毒（BIV）穿膜蛋白gp45杂交瘤细胞株的建立

编码牛免疫缺陷病毒（ＢＩＶ）穿膜蛋白的一个４００ｂｐ的基因片断被克隆到ｐＡＴＨ表达载体上，此 重组的融合蛋白ＴｒｐＥ－Ｅｎｖ８在大肠杆菌中得到高效表达，而且包含有与ＢＩＶ抗体特异性反应的抗原决定簇。我们用此融合蛋白免疫ｂａｌｂ／ｃ小鼠得到与ＢＩＶ穿膜蛋白特异性反应的杂交瘤。此单克隆抗体在蛋白印迹法分析中与重组的ＴｒｐＥ－Ｅｎｖ８有特异性反应，用免疫酶染色法可检测ＢＩＶ在体外的复制。