TNF—α诱导的蛋白质因子与淋巴毒素基因5‘端上游区特异性…

淋巴毒素（ＬＴ）是由活化的Ｔ淋巴细胞分泌的一种糖蛋白，凝胶迟滞电泳分析发现，ＴＮＦ－α诱导３０ｍｉｎ的Ｊｕｒｋａｔ细胞核抽提物下ＬＴ基因５＇上游片段可形成多种ＤＮＡ－蛋白质复合物。ＤＮａｓｅⅠ足迹法实验发现，ＬＴ基因５＇端上游－１０６￣－８３ｂｐ（共２４ｂｐ）序列具有蛋白保护足迹；此２４ｂｐ的序列中存在一个ｋＢ样结合位点：－１００￣－９０ｂｐ（５＇－ＧＧＧＧＧＣＴＴＣＣＣ－３＇）。以此蛋白保护足迹     

西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌TNF-α的影响及机制探讨

目的研究西洛他唑对脂多糖诱导的人THP-1单核细胞分泌TNF-α的影响,探讨西洛他唑对单核细胞的炎症调控作用。方法体外培养人THP-1单核细胞,分为对照组(A组)、LPS组(B组)、西洛他唑组(C组)、西洛他唑+SQ22536组(D组),C组和D组加入LPS刺激24 h。应用ELISA法检测各组细胞培养上清TNF-α水平,并测定各组细胞内c AMP浓度。结果西洛他唑能抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌TNF-α,同时升高细胞内c AMP浓度。结论西洛他唑可抑制LPS刺激的人THP-1单核细胞分泌TNF-α,这种作用可能与升高细胞内c AMP浓度有关。     

COPD大鼠肺组织TNFα及mRNA表达的实验研究

目的探讨TNFα及TNFαmRNA在COPD发病中的作用.方法采用熏香烟加气管内注射内毒素法复制大鼠COPD的动物模型,并测定了大鼠的肺功能及血气变化结果,用免疫组织化学及原位杂交法观察了TNFα及Mrna在肺组织中的表达情况.结果模型组动物均发生了不同程度的COPD,与正常对照组比较,模型组动物的MVV,PEF,FEV0.3,CL显著低于正常对照组,两者比较差异显著,P<0.05;模型组动物PaCO2高于对照组,PaO2及SaO2低于对照组,发生了明显的呼吸性酸中毒;TNFα及Mrna在正常对照组动物支气管上皮细胞中仅见微量的表达,在模型组的支气管上皮细胞、支气管周围的淋巴滤泡炎性细胞及肺泡间质炎性细胞可见到强阳性表达.结论TNFα及Mrna参与了COPD的发生及发展.     

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白生物仿制药对大鼠类风湿性关节炎的治疗作用

目的:评价重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白(TNFR-Fc)生物仿制药对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用.方法:将大鼠随机分成6组:阴性对照组(生理盐水)、阳性药物组(Enbrel)和TNFR-Fc高、中、低质量分数组,空白组(无炎症),每组6只,弗氏完全佐剂(CFA)建立类风湿性关节炎模型.给药13 d后,分别测量大鼠体重、后足足垫厚度,关节炎指数评分,ELISA法测量细胞因子水平.结果:与阴性对照组相比,Enbrel组和TNFR-Fc大、中、小质量分数组的大鼠体质量明显增加(P0.05)、继发性足肿胀减弱(P0.05)、关节炎评分分值、IL-1β、TNF-α、IL-6含量均减小(P0.05),IL-10含量升高(P0.05).结论:TNFR-Fc通过降低炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平以及升高IL-10水平来发挥治疗类风湿性关节炎的作用.     

两歧双歧杆菌抗福氏痢疾杆菌感染的机制研究

目的：以福氏痢疾杆菌感染大鼠为模型,研究两歧双歧杆菌对福氏痢疾杆菌感染大鼠肿癌坏死因子-α（TNF-α）水平的影响,从而探讨其抗福氏痢疾杆菌感染的机制。方法：先用硫酸链霉素给正常大鼠灌胃,出现菌群失调症状,再通过福氏痢疾杆菌灌胃感染大鼠,使用两歧双歧杆菌液干预治疗福氏痢疾杆菌感染大鼠,检测干预治疗后各组大鼠血及脾中TNF-α的含量。结果：福氏痢疾杆菌感染各组与正常组相比,大鼠体内血及脾中TNF-α的含量均有明显差异;福氏痢疾杆菌感染各组中,未干预组、生理盐水组及双歧杆菌组脾中TNF-α的含量有显著变化。其中,双歧杆菌组的TNF-α水平升高更明显。结论：两歧双歧杆菌对福氏痢疾杆菌感染机体的TNF-α分泌有一定促进作用,是其抗福氏痢疾杆菌感染的可能机制。     

人肿瘤坏死因子α在鱼腥藻7120中的表达

通过三亲结合转移方式,将含人肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）ｃＤＮＡ和ｐｓｂＡ启动子的鱼腥藻－大肠杆菌穿梭质粒ＰＤＣ－ＴＮＦ导入单细胞丝状鱼腹藻７１２０中。     

柱层析法纯化重组人肿瘤坏死因子α及其抑癌作用

半合成人肿瘤坏死因子ＴＮＦ－α在大肠杆菌中高表达．发酵后收集菌体经超声破碎，然后在１２０００ｒ／ｍｉｎ４℃离心１０ｍｉｎ，上清经６０℃热处理３０ｍｉｎ，离心上清用６０％饱和度的硫酸铰沉淀，再依次经过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ—２５、ＤＥＡＥ—５２纤维素和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ—７５柱层析，得到的纯化ｒｈＴＮＦ—α比活性为２×１０７ｕ／ｍｇ，回收率为２４％．经过ＳＤＳ—ＰＡＧＥ电泳和ＨＰＬＣ鉴定，纯度达９５％左右，分子量为１７×１０３．ｒｈＴＮ—α对热稳定性试验表明，—２０℃下贮存一年或者０℃下贮存一个月，ｒｈＴＮＦ—α活性仍保留５０％．人胃癌和肝癌细胞株的体外抑瘤试验和接种小鼠的活体抑瘤试验表明，本实验取得的ｒｈＴＮＦ—α具有明显的抑瘤生长作用．     

口腔扁平苔藓中TNF-α表达及其与肥大细胞的关系

目的:探讨TNF-α及肥大细胞在口腔扁平苔藓疾病发生发展过程中的作用及两者间的关系。方法:采用S-P免疫组化方法对31例口腔扁平苔藓及5例正常口腔黏膜中TNF-α的表达及肥大细胞的数量进行检测。结果:口腔扁平苔藓病损中TNF-α的阳性表达率是70 97%,与正常口腔黏膜相比,有显著性差异(P<0 05)。口腔扁平苔藓黏膜固有层肥大细胞数每5个视野为51 00±11 41,与正常口腔黏膜(21 21±4 27)比较,差异有显著性(P<0 05)。TNF-α的表达与肥大细胞的数量具有相关性(r=0 399,P<0 05)。结论:TNF-α及肥大细胞参与口腔扁平苔藓的发病及病变发展过程,且两者之间有相关性。     

γTNFβ体外杀伤肿瘤细胞的研究

用ＭＰＧ吸附层析法所制备的ＨｕＩＦＮ－γ／ＨｕＴＮＦβ重组双功能杂交蛋白（简称γＴＮＦβ）［１］去处理人宫颈癌细胞株ＭＥ１８０、胃癌细胞株７９０１和肺癌细胞株Ｇ６，结果表明此杂交蛋白对这三个细胞株都有明显的杀伤作用，其杀伤率显著高于同剂量的ＩＦＮ－γ或ＴＮＦ－β；用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察γＴＮＦβ在不同时间、不同剂量条件下对Ｇ６的增殖抑制，可得到同样的结论。用γＴＮＦβ与丝裂霉素Ｃ（Ｍｉｔｏ－Ｃ）一起处理胃癌７９０１细胞，结果表明在Ｍｉｔｏ－Ｃ１．０μｇ／ｍＬ浓度以下、γＴＮＦβ５０ｕ／ｍＬ浓度以下，两者具有良好的抑病协同效应。用γＴＮＦβ处理胃癌、肺癌细胞以及ｙγＴＮＦβ与化学细胞毒性药物协同抑癌尚未见有报道。本文的结果为深入研究γＴＮＦβ可能具有更有效的抗癌效应提供了实验依据。     

TNF与IFN协同诱导癌细胞凋亡机制的研究进展

综述了肿瘤坏死因子(TNF)与干扰素(IFN)协同诱导肿瘤细胞凋亡的机制.分别从受体、细胞周期、相关基因及凋亡途径4个方面进行阐述,以期为细胞因子的游离及固定药物的机制研究提供理论参考,并对肿瘤细胞因子治疗的临床用药有指导意义.     

富硒乳酸菌抑制镉诱发小鼠血浆NO和TNF-α释放作用

选择48只健康成年雄性小鼠,随机分为对照组(C组)、镉暴露组(Cd组)、镉 低剂量富硒乳酸菌组(Cd-LSe组)、镉 高剂量富硒乳酸菌组(Cd—HSe组)．腹腔注射CdCl2进行镉暴露实验,连续6d．研究富硒乳酸菌对镉暴露小鼠血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)水平及一氧化氮合酶(NOS)活性的影响．结果显示,镉染毒暴露第6d,Cd组血浆NO含量明显高于C组,Cd-LSe和Cd—HSe组与C组无明显差异,低于Cd组;Cd组NOS活性高于C、Cd—LSe和Cd-HSe组;Cd-LSe和Cd-HSe组NOS活性与C组无显著差异性;Cd组iNOS活性明显高于C、Cd-LSe和Cd-HSe组,Cd—LSe和Cd-HSe组iNOS活性与C组无显著差异;Cd组血浆TNF-α升高．而Cd—LSe和Cd-HSe组未见升高,且低于于C组．提示富硒乳酸菌在有效缓解镉诱导血浆iNOS活性上升,NO、TNF-α释放增加介导损伤过程中可能起重要作用．     

肺癌患者手术前后血清SIL—2R和TNF—α的水平

采用ＥＬＩＳＡ法对４０例肺癌患者血清可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）手术前后表达水平进行动态及临床观察。结果为：（１）ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α术前均显著高于正常对照组（Ｐ＜００１）;（２）术后１周,ＳＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦ－α水平与术前比较,差异无显著性意义（Ｐ＞００５）;（３）术后４周,ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α水平较术前显著降低（Ｐ＜００１）,接近对照组水平。结果提示,血清ＳＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α可作为肺癌患者免疫功能的监测指标之一,并可作为疗效判断的参考。     

TNF-α的生物学功能及与ACS的关系

肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)是一种重要的细胞因子,它参与冠心病的形成,并且在急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的发病中起重要的作用.针对ACS的抗TNF-α治疗有待于进一步研究.     

α-Enolase抑制人泡沫病毒反式激活因子Bell介导的反式激活作用

泡沫病毒能在宿主细胞内长期潜伏感染,且不伴随任何病理现象.为了阐明这一病毒潜伏感染机制关键要研究病毒与其宿主之间的相互影响,尤其是宿主对病毒基因转录水平的影响.Bell是人泡沫病毒的反式激活因子,它能够激活该病毒LTR和IP两个转录启动子.该研究利用酵母双杂交技术筛选到Bell的相互作月蛋白α-Enolase,并用免疫共沉淀技术确定了这两个蛋白的结合涉及α-Enolase的243～372位氨基酸及Bell的223～275位氨基酸.细胞转染实验发现α-Enolase蛋白能够抑制Bell介导的反式激活作用.     

脑胶质瘤患者血清IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的表达及临床意义

[目的]探讨血清中白介素6（IL-6）、IL-8、IL-10和肿瘤坏死因子（TNF-α）对于脑胶质瘤的诊断价值。[材料与方法]分别检测健康对照组、低级别脑胶质瘤组和高级别脑胶质瘤组中IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α的含量。[结果]与健康对照组比较,低级别脑胶质瘤组的IL-6、IL-8和TNF-α有统计学差异,高级别脑胶质瘤组的IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α均具有统计学差异。与低级别脑胶质瘤组相比较,高级别脑胶质瘤组的IL-6、IL-10和TNF-α有统计学差异。其中区分低级别脑胶质瘤和高级别脑胶质瘤的诊断价值最好的指标为IL-10,其诊断灵敏性和特异性分别为74.90%和65.80%。IL-6、IL-10和TNF-α联合检测时其灵敏性和特异性分别为92.30%和93.10%。[结论]证实IL-6、IL-10和TNF-α联合诊断价值优于单项指标,为脑胶质瘤的临床诊断提供辅助方法。     

慢性宫颈炎的病毒病原研究和重组人α1b型干扰素的治疗作用

阐明人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）、巨细胞病毒（ＣＭＶ）和单纯疱疹病毒２型（ＨＳＶ－２）感染与慢性宫颈炎的关系,考核重组人α１ｂ型干扰素治疗慢性宫颈炎的疗效和阻断ＨＰＶ－１６母婴传播的作用。方法：采用ＤＮＡ分子杂交技术、病毒分离技术,ＰＣＲ扩增技术检测标本。标本采自糜烂、正常宫颈,妊娠３９周的孕妇宫颈以及新生儿咽拭子。结果：通过对正常宫颈和糜烂宫颈ＨＰＶ－１６,ＨＳＶ－２和ＣＭＶ病毒检出率的比较,证明病毒感染与慢性宫颈炎高度相关;采用重组人α１ｂ型干扰素（ｒｈＩＦＮ－α１ｂ）治疗慢性宫颈炎一个疗程后,有效率达９３８％,显效率达６０％;ＨＰＶ－１６和ＨＳＶ－２的病毒检出率也相应明显下降。在干扰素治疗后,ＨＰＶ－１６的母婴传播率从８０％下降至２９４％。中药黄芪与干扰素有协同作用。结论：１）慢性宫颈炎与ＨＰＶ－１６,ＨＳＶ－２和ＣＭＶ病毒感染有关;２）ｒｈＩＦＮ－α１ｂ对治疗慢性宫颈炎有明显疗效;对阻断ＨＰＶ－１６的母婴传播有明显作用;３）中药黄芪与干扰素对治疗慢性宫颈炎有协同作用     

PI-3K转导通路在Ⅱ型糖尿病发病机制中作用的研究进展

胰岛素是通过胰岛素信号的转导通路来发挥其调节血糖并且促进其代谢合成的,其中磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）在胰岛素信号转导中起关键性作用,而胰岛素信号转导通路障碍所引起的胰岛素抵抗在Ⅱ型糖尿病治疗中有着至关重要的作用．从胰岛素抵抗的发病机制、影响PI-3K的因素等几个方面综述了PI-3K在Ⅱ型糖尿病发病机制中的作用．     

社区获得性肺炎患者肿瘤坏死因子α-308位点基因多态性与多药耐药菌感染的相关性

目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因启动子区域308位点G/A多态性与社区获得性肺炎(CAP)患者多药耐药菌感染的相关性.方法 选取140例社区CAP感染患者(120例多重耐药菌感染者(CAP多重耐药组),20例单纯性CAP患者(CAP组))及97例健康体检中心的受试者为研究对象(对照组),采用Taqman探针荧...     

AMPK-α表达变化在糖尿病患者骨骼肌脂肪酸代谢和胰岛素抵抗中的作用

目的探讨腺苷酸活化蛋白激酶α(AMPK-α)表达变化在糖尿病患者骨骼肌脂肪酸代谢和胰岛素抵抗中的作用.方法在骨科行髋关节和下肢手术的患者中选取Ⅱ型糖尿病病程≤5 a的患者20例为研究组,另选取行骨科手术的非糖尿病患者20例为对照组.抽取空腹静脉血检测血生化指标;骨科术中留取骨骼肌组织,测定骨骼肌TG、长链脂酰辅酶A(LCACo A)水平;RT-PCR法检测骨骼肌AMPK-α1,AMPK-α2 mRNA水平;Western blotting法检测骨骼肌AMPK-α1,AMPK-α2和磷酸化AMPK-α蛋白水平.结果研究组空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素、TG、FFA水平均明显高于对照组,ISI明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);研究组骨骼肌TG,LCACo A含量均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05).研究组和对照组AMPK-α1 mRNA拷贝数之间差异无统计学意义(P0.05);研究组AMPK-α1 mRNA拷贝数明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05).研究组和对照组AMPK-α1蛋白表达量之间差异无统计学意义(P0.05);研究组AMPK-α2和磷酸化AMPK-α蛋白水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05).结论Ⅱ型糖尿病患者易发生脂肪酸代谢异常和胰岛素抵抗,AMPK-α2表达和AMPK-α活性改变在骨骼肌脂质堆积和胰岛素抵抗中发挥关键作用.     

新疆维吾尔族人TNFβ-804基因多态性与乙型肝炎易感性的相关性研究

目的：研究TNF-β基因单核苷酸多态性（SNP）804位点与新疆地区维吾尔族人乙型肝炎之间的关系。方法：用套式PCR（nested PCR）和等位基因特异性PCR（allele一speciicfic PCR,AS-PCR）法,对120例乙肝患者和120例正常对照者TNF-β基因SNP804多态性位点进行基因分型。结果：SNP804多态性位点C/C基因型和C/A＋AA基因型频率在病例组为77%和23%,正常对照组为88%和12%,两组间基因型和等位基因频率分布差异有显著性（p〈0.05）。结论：TNF-β804多态性位点与新疆维吾尔族人乙肝有明显相关性。