各种病毒性肝炎患者中庚型肝炎病毒感染状况探讨

目的：探讨各种病毒性肝炎中庚型肝炎（HGV）感染状况及其致病性．方法：采用ELISA方法对111名不同年龄、不同性别的病毒性肝炎患者进行血清中抗-HGV、抗～HAVIGM、HBV—M、抗-HCV、抗-HEV检测．结果：庚型肝炎病毒多以重叠感染为主．结论：HGV可持续存在，重叠感染不加重病情，反而减轻．     

通辽地区不同人群庚型肝炎病毒感染的研究

目的：研究通辽地区蒙古族、汉族，不同年龄人群庚型肝炎病毒感染及致病性情况．方法：采用了LISA对298例健康人群111例肝炎患者中进行抗-HGV检测．结果：健康人群HGV感染率为2．5％，汉族为1．69％．在肝炎患者中蒙古族HGV感染率38．70％，汉族为18．75％，健康人群HGV感染率为2．01％，肝炎患者为24．32％．结论：蒙古族HGV感染在健康人群还是肝炎患者中都明显高于汉族人群．肝炎患者HGV感染明显高于健康人群．     

维持血透患者庚型肝炎病毒感染的临床研究

研究血液净化中心维持血液透析患者庚型肝炎病毒（ＨＧＶ） 感染率、影响因素和临床特点．应用反转录聚合酶链反应法（ＲＴＰＣＲ） ,检测了１４９ 例维持血透患者ＨＧＶ 感染情况．维持血透患者ＨＧＶＲＮＡ 阳性率为４ ．７ ％ ,与ＨＧＶＲＮＡ阴性患者相比,两组在人口统计学资料、维持透析时间、输血量、合并ＨＢＶ 和ＨＣＶ 感染率及肝脏酶谱等方面无统计学差异．维持血透患者ＨＧＶ 感染率高于普通人群,但无明显肝损害表现     

丙肝病毒核心抗原检测临床应用研究

应用酶联免疫法分别检测丙肝病毒核心抗原(HCV-cAg)和抗体(HCV-Ab),了解丙肝病毒核心抗原检测的意义。采用湖南康润公司生产的HCV游离核心抗原试剂盒,对来自门诊或手术前筛查的850例临床样本进行了HCV-cAg和HCV-Ab检测,阳性者用反转录多聚酶链反应(RT-RNA)证实。850例筛查样本HCV-Ab阳性22例,其中HCV-cAg阳性14例,RT-RNA阳性16例;828例HCV-Ab阴性的样本检出HCV-cAg阳性4例,其中RT-RNA阳性3例。HCV-cAg与RT-RNA符合率为83.33%(15/18)。HCV核心抗原检出时间早于抗体,HCV-cAg检测试剂盒可作为HCV抗体检测的补充试剂,敏感性高、特异性好、费用低廉。     

ELISA和PCR法在研究乙肝病毒传播途径中的应用

应用HBV表面抗原酶标试剂盒和诊断HBVDNA的PCR试剂盒分别检测可能污染有HBV的不同来源标本30份,结果ELISA法检出HBsAg阳性5例,检出率16．7％;PCR法检出HBVDNA阳性12例,检出率40％,明显高于ELISA法,提示应用PCR技术探讨乙肝病毒传播途径似乎效果更好。     

PCR法制备地高辛标记探针斑点杂交检测白斑综合症病毒（WSSV）

用PCR法成功制备了DIG标记探针,探针长度为547bp,探针的产量为21．6mg/μL。此探针与随机引物合成探针检测样品灵敏度相近。用此探针核酸斑点杂交法检测了54尾中国对虾。结果表明：此探针在对白斑综合症病毒的检测、对虾暴发性流行病的诊断等方面具有很高的应用价值。     

多聚酶链反应技术在淋病检测上的应用

本文应用多聚酶链反应（ＰｏｌｇｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术对直接涂片镜检淋球菌阴性患者１００例进行淋球菌ｃｐｐＢ基因片段测定。其中ＰＣＲ阳性者高达５４例，占５４％，该组病人中有２０例尖锐湿疣患者，其中ＰＣＲ阳性者１３例，占６５％。以上结果提示：ＰＣＲ技术可明显提高淋病患者的检出率。     

人类疱疹病毒6、7、8型与巨细胞病毒对大肠肿瘤致病的协同作用

目的:检测HHV-6、7、8及CMV在大肠肿瘤中的感染,探讨其致病的协同作用。方法:取20例大肠肿瘤标本,其中10例良性病变(炎性息肉、乳头状瘤和绒毛状腺瘤),10例恶性病变(癌和腺瘤恶变)。应用巢式PCR法,分别检测两组病变组织中HHV-6、7、8和MCV的DNA片段。结果:HHV-6检测结果表明恶性病变组阳性反应率为90%(9/10),良性病变组阳性反应率为60%(6/10),其产物为132bpDNA片段;HHV-7检测结果示恶性病变组阳性反应率为40%(4/10),良性病变组阳性反应率为0(0/10),其产物为92bpDNA片段;HHV-8检测结果示恶性病变组阳性反应率为90%(9/10),良性病变组阳性反应率为20%(2/10),其产物为177bpDNA片段;检测CMV结果示恶性病变样本组阳性反应率为100%(10/10),良性病变样本组阳性反应率为100%(10/10),其产物为85bpDNA片段。结论:CMV在良、恶性大肠肿瘤病变中均有较高的感染率,HHV-6、7、8在恶性病变组中感染率较良性组高,是需要警惕的致病因素。     

应用二温式多重PCR技术鉴别鸡传染性支气管炎病毒和鸡传染性喉气管炎病毒

为了简化聚链反应（PCR）程序和加快检测速度,将二温式PCR与多重PCR结合起来,建立一种同是检测鸡传染性支气管炎病毒（IBV）和鸡传染性喉气炎病毒（ILTV）的二温式重PCR技术,试验根据IBV和ILTV的基因文库,设计2对分别与IBV和ILTV某段基因序列互补的引物。用这2对引物同一样品中的IBV、ILTV核酸模板进行二温式多重PCR扩增,结果均同时得到2条特异性大小与实验设计相符的1720bp(IBV)和647bp(ILTV）的扩增带,而对其他6种禽病病原的扩增结果均为阴性,敏感性测定结果表明明,该二温式多重PCR技术检出10pg的IBV RNA模板和10pg的ILTV DNA模板。     

用聚合酶链反应检测HBVDNA敏感性的探讨

本实验用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对５６例受检者进行乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ检测，并将结果与血清标志物检测结果比较，结果表明，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃＡｇ同时阳性的受检者中，１００％可检测出ＨＢＶＤＮＡ。在血清标志物全阴性受检者中，也有４５％可测出ＨＢＶＤＮＡ。结合其他血清标志物的检测结果，说明用ＰＣＲ技术检测ＨＢＶＤＮＡ是敏感的，在临床应用上也是可行的。     

PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素D基因

根据金黄色葡萄球菌肠毒素Ｄ基因的序列,设计相应的引物,建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素Ｄ基因的ＰＣＲ技术。利用该方法可从含有肠毒素Ｄ基因的金黄色葡萄球菌中扩增出ＰＣＲ产物。扩增产物具有特异性,长为３１６个碱基对。经限制性核酸内切酶ＨｈＩⅠ酶切证实扩增产物为ＳＥＤ基因片段。     

高灵敏度巢式PCR方法扩增HBV全长基因组

探讨一种用于乙型肝炎病毒(HBV)基因组扩增的灵敏度高、广谱性好的巢式聚合酶链式反应(nested PCR)方法,适用于较低病毒拷贝数标本的HBV DNA扩增.通过设计两套通用巢式引物,实现对各基因型(A,B,C,D,E,G)HBV均具有较高的扩增效率;采用两步法分段扩增HBV基因组,对两段目的产物进行测序拼接获得HBV的全基因序列.应用本方法对4组病毒拷贝量(IU/mL)分别为:>1.0×104,1.0×103~1.0×104,2.0×102~1.0×103,<2.0×102的100份血清标本进行全长基因组扩增,其中75份获得阳性结果,各组阳性率依次为:100%,66.7%,60%,25%,有效扩增灵敏度为2.0×102~1.0×103IU/mL;而一步法只在病毒拷贝量>1.0×104IU/mL的标本组中获得15份阳性结果,总的阳性率仅为15%,说明该方法扩增灵敏度明显高于一步法.因此,本方法为HBV流行病学调查研究HBV基因组序列提供了更高的灵敏度,可在流行病学调查中发挥重要作用.     

人野生型抑癌基因PTEN的逆转录PCR法克隆及序列分析

以正常人胎盘组织总RNA为模板，通过优化引物和PCR条件，采用逆转录PCR法扩增出人野生型PTEN基因cDNA片段，并克隆到pMD18-T载体，获得重组子pMD-PTEN．序列分析表明，该cDNA长1212 bp，与GenBank中PTEN基因序列相比有3个碱基发生了变化，但全部为同义突变，证实获得了人野生型抑癌基因PTEN的cDNA克隆，为进一步构建原核表达载体及研究PTEN蛋白的抑癌效果、抑癌机理打下基础．     

Biopanning of HGV epitope from a phage displayed library

Three mouse monoclonal antibodies (mAb) specific to E2 antigen of human hepatitis G virus (HGV) were used to bio-panning of a phage displayed random peptide library of 15 amino acid residues. After 3 rounds of screening, the ratio of output to input increased to 1.1 x 10" and the false positive rate reduced to 0.2% , which means the enrichment was effective. At the third round of screening, 15 plage clones were selected for the use in binding and competitive inhibition tests. Thirteen of them could specifically react with the mAb M6. The inhibition rates of phage 10 clones out of 15 were over 60% . From the deduced insert sequence in the coat protein VIII, the core sequence NPLWP was found in 6 phage clones which are homologeous to the amino acids 301—305 of HGV E2.The sera from the mice immunized with the phage clone C2 containing motif sequence were found positive for anti-HGV. These indicate the possibility that NPLWP motif in the short peptide is the mimic of HGV E2 epitope that can be recognized by HGV mAb M6.     

应用PCR技术检测单纯疱疹病毒

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术,检测２０５例样本,其中单纯疱疹病毒阳性６５例,阳性率３１．７％．ＰＣＲ技术具有高度的敏感性和特异性,为疱疹病毒感染的临床早期准确诊断、判定药物疗效和流行病学研究等提供了有效的手段     

检测一种新的可经输血传播病毒（TTV）156例及分析

应用聚合酶链反应,检测海口地区不同人群中输血传播病毒(TTV)感染状况.结果表明在156例标本中,阳性41例(26.3%),其中一般人群40例中,阳性3例(7.5%),献血员20例中,阳性1例(5.0%),静脉毒瘾3例中,阳性2例(66.7%),非甲-非庚型肝炎46例中,阳性24例(52.2%),乙型肝炎33例中,阳性9例(27.3%),丙型肝炎14例中,阳性2例(14.3%).提示海口地区人群中均存在TTV感染.