无胶毛细管电泳分离碱基对范围宽的DNA片段

提出一种无胶毛细管电泳分离碱基对范围宽的ＤＮＡ片段的方法。用ＤＢ－１气相色谱毛细管柱，以羟乙基纤维素为筛分介质，研究了λＤＮＡ－ＥｃｏＲⅠ＋ＨｉｎｄⅢ限制性片段的分离，分离效率达１．２×１０＾６板／ｍ，检测限为２．１×１０＾－１７ｍｏｌ。应用于一种鲤鱼种族鉴别基因的聚合酶链反应扩增产物的分离鉴定，结果与实际相符，分离速度比传统电泳方法提高２０倍。     

科学家首次实现DNA片段置换

毛毛雨为什么可以在短时间内形成？科学家最近提出了一个新的解释。目前科学家用三个物理过程——成核、凝结及碰撞合并来说明成云及降水的过程。在杨核过程中，自由的水气分子彼此靠近聚公证机关形成凝结核，此时需要能量以突破成核的限制。     

毛细管电泳分离DNA片段的研究

以羟丙甲基纤维素作为筛分介质，３７ｃｍ×７５μｍ涂层石英毛细管，在 ７ ｋｖ电压下，毛细管电泳分离了 φ１７４ ＤＮＡ／ＨａｅⅢ Ｍａｒｋｅｒｓ．     

限制性酶切DNA片段的计算机辅助测量

文中对几种测量限制性内切酶解DNA片段大小方法的测量精度进行了比较。在所讨论的方法中有手工半对数作图法、线性回归、组合线性回归、拉格朗日插值法、Southern法及改进的分段函数法和其计算机计算程序。用以上方法检验了λDNA/HindⅢ+EcoRⅠ酶切片段的测量精度,并测量了pSaA基因限制性内切片段大小。结果表明改进的分段函数法给出最小标准方差(Sd)及最优测量一致性。     

酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）同源DNA片段的克隆

利用作者克隆的酿酒酵母基因启动子片段Ｙ８为探针和菌落原位杂交方法，从构建的Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ ＹＮＮ２７基因组文库中共筛选８个阳性克隆。根据这些克隆中插入片段大小和限制酶切结果，可将其划分为６种，分别命名为ＹＮ１－ＹＮ６．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果表明，这６种ＤＮＡ片段不仅能与６．５ｋｂ的全长Ｙ８探针我，而且均能与ＰｓｔＩ酶切Ｙ８所得的３段ＤＮＡ探针杂交。     

从微量血中快速制备线粒体DNA片段

目的　建立并鉴定用于从微量血中快速制备线粒体DNA片段的技术 .方法　采用微量血样品 ,改进提取线粒体DNA的方法 ;以不同的方法提取的血DNA为模板 ,同时扩增nDNA上的基因片段和mtDNA上的基因片段 ,PCR相对定量分析比较各种方法提取的mtDNA片段的纯度 ;结果　用华美公司生产的ReadyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统和作者的方法都得到了mtDNA ,而用作者的方法获得的mtDNA的纯度较高 ;结论　由于线粒体DNA与核DNA存在有同源片段 ,ReadyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统和常规酶解法提取DNA不适合用于对mtDNA的鉴定 ,作者的方法简便快捷地排除了核DNA的污染 ,非常适合于对mtDNA进行PCR分析 .     

琼脂糖电泳凝胶中回收微量DNA片段的新方法

对现有的DNA片段回收方法进行了改进.琼脂糖凝胶中目的DNA片段条带切割后,浸入适量的TE溶液(0.2～0.4 mL/g 琼脂糖胶),在37 ℃水浴保温15 min,以溶出凝胶中的DNA,利用相应的引物对浸出的微量DNA样品进行与原PCR反应相同条件下的PCR扩增,直接用75 %乙醇沉淀后,适量TE溶解得到回收的目的DNA样品.此法回收的DNA片段可用于分子克隆,特别是适用于TA载体的克隆与测序,适合大批量微量样品的准确回收,防止了因试剂盒回收造成的微量DNA片段的丢失.     

靶标替换消减SELEX技术筛选小鼠IgG Fc片段的DNA配基及其活性鉴定

建立高特异性和亲和力的小鼠IgG Fc片段DNA配基筛选方法.采用几种小鼠IgG亚类(鼠抗HBV-IgG、小鼠IgG的Fc,IgG1,IgG2a)作为靶分子,利用靶标替换消减SELEX筛选方法进行16轮筛选.利用dot-blot,高压液相色谱以及凝胶阻滞(EMSA)方法对所得配基进行活性鉴定.经过16轮筛选,得到了与小...     

电子显微镜分离小鼠染色体的研究

本实验把小白鼠的骨髓细胞，制成电镜染色体样品，探索了利用电子显微镜所产生的高度聚焦的电子束，将目标染色体或染色体片段与其他染色体或染色体片段分离、切割开的过程，检验了电子束分离、切割染色体的可行性的有效性，开发出了一套较为成熟的电子束分离、切割染色体的新技术或方法，使之成为染色体及基因研究的有效手段。     

用原位杂交技术对玉米中期染色体中rRNA的研究

本文以玉米１７ＳｒＲＮＡ的ｃＤＮＡ作探针，采用缺口平移技术，用Ｂｉｏ－ｄＵＴＰ对该探针进行生物素标记。在Ｋ４Ｍ树脂包埋的玉米根尖超薄切片上进行原位杂交。杂交后，在电镜下通过与１０ｎｍ金颗粒相连的亲合素对杂交子进行检测，首次直接证实了除核仁，核质和细胞质外，ｒＲＮＡ在中期染色体上的存在。其分布特点是随机的，均匀的，并在数量上明显高于细胞质。     

卡介苗中具启动子活性片段克隆及分析

利用启动子探针型质粒ｐＫＫ２３２－８从卡介苗染色体ＤＡＮ的ＢａｍＨＩ酶切片段中克隆到４个具启动功能的ＤＮＡ片段,测定各重组子对氯霉素（Ｃｍ）的抗性,其中含３．３Ｋｂ外源片段的重组质粒ｐＢＣＧ２大肠杆菌转化子在ＬＭ培养基上对Ｃｍ抗性可达１７０×１０－６ｇ／ｍＬ,作了该片段的限制性酶切图谱．对ｐＢＣＧ２利用ＳａｌⅠ位点,亚克隆出４种部分重叠的具启动功能的ＤＮＡ片段,这４种重组质粒分别命名为ｐＢＣＧ２－１,ｐＢＣＧ２－２,ｐＢＣＧ２－６和ｐＢＣＧ２－８,并分析了其中插入片段的大小及其转化子对Ｃｍ的抗性．将ｐＢＣＧ２－２的ＳａｌⅠ外源片段插入到分枝杆菌启动子探针型穿梭质粒ｐＥＱ３,获得一个可在卡介苗中表达ｌａｃＺ基因的重组子ｐＥＢ２２．斑点杂交实验证明,具有启动功能的ＤＮＡ片段来源于卡介苗的染色体ＤＮＡ．结果表明克隆到一个对大肠杆菌和卡介苗均具启动子活性的ＤＮＡ片段     

Comparative analysis of A,B,C and D genomes in the genus Oryza with C_0t-1 DNA of C genome

The genus Oryza includes two cultivated species, O. sativa L. and O. glaberrima Steud. and comprises more than 20 species[1]. The genomes of Oryza are classified into 10 types: AA, BB, CC, BBCC, CCDD, EE, FF, GG, HHJJ and HHKK[2,3]. Morphological variatio…     

Comparative analysis of A, B, C and D genomes in the genus Oryza with Cot-1 DNA of C genome

Fluorescence in situ hybridization （FISH） was applied to somatic chromosomes preparations of Oryza officinalis Wall. （CC）, O. sativa L. （AA）xO. officinalis F1 hybrid （AC）, backcross progenies BC1 （AAC and ACC）, O. latifolia Desv. （CCDD）, O. alta Swallen （CCDD） and O. punctata Kotschy （BBCC） with a labelled probe of Cot-1 DNA from O. officinalis. In O. officinalis, the homologous chromosomes showed similar signal bands probed by Cot-1 DNA and karyotype analysis was conducted based on the band patterns. Using no blocking DNA, the probe identified the chromosomes of C genome clearly, but detected few signals on chromosomes of A genome in the F1 hybrid and two backcross progenies of BC1. It is obvious that the highly and moderately repetitive DNA sequences were considerably different between C and A genomes. The chromosomes of C genome were also discriminated from the chromosomes of Dand B-genome in the tetraploid species O. latifolia, O. alta and O. punctata by Cot-1 DNA-FISH. Comparison of the fluorescence intensity on the chromosomes of B, C and D genomes in O. latifolia, O. alta, and O. punctata indicated that the differentiations between C and D genomes are less than that between C and B genomes. The relationship between C and D genomes in O. alta is closer than that of C and D genomes in O. latifolia. This would be one of the causes for the fact that both the genomes are of the same karyotype （CCDD） but belong to different species. The above results showed that the Cot-1 DNA had a high specificity of genome and species. In this paper, the origin of allotetraploid in genus Oryza is also discussed.     

小马包的染色体数目和核型

首次对黄瓜属植物小马包进行了染色体数目和核型的研究，结果表明，其染色体数目为２ｎ＝２４，核型公式为Ｋ（２ｎ）＝２４＝２２ｍ＋２ｓｍ，核型为“１Ａ”型。     

胎盘绒毛细胞的培养及其基因组DNA的分离纯化

从采集到的微量胎盘绒毛，经过组织细胞培养，获得了大量的绒毛细胞，对其进行了基因组ＤＮＡ的分离纯化，提取到足够量的ＤＮＡ。经过０．８％琼脂糖凝胶电泳，结果显示出完整的绒毛细胞ＤＮＡ带，得到了典型的大分子ＤＮＡ电泳图谱。