糙皮侧耳裂殖过程中几种碳源胞外酶系活性变化规律的研究

本文主要研究了糙皮侧耳菌丝静态繁殖过程中及断裂繁殖过程中胞外酶活性变化.测定了淀粉酶、羧甲基纤维素酶、半纤维素酶及滤纸纤维素酶的活性变化.结果表明,断裂繁殖对于淀粉酶、FP酶的活性的提高有积极的影响.这对纤维素的分解与利用具有重要的意义.     

茶碱对美味侧耳胞外多酚氧化酶和纤维素酶活性的影响

本文以美味侧耳为实验菌研究了茶碱对胞外多酚氧化酶和纤维素酶活性的影响.多酚氧化酶活性测定是用邻甲氧基苯酚为底物,用分光光度法测定.纤维素酶活性测定是以微晶纤维素和 CMC 为底物,用 DNS 法测定还原糖生成量.结果表明:当棉子壳培养基中茶碱浓度为0.5～2ppm 时,酶活提高极为显著,这一结果与茶碱促进菌丝生长和子实体形成的效应相吻合.     

彩绒革盖菌CV-8胞外酶活性研究

测定了彩绒革盖菌在PDY液体培养基中的过氧化物酶、漆酶、邻苯二酚氧化酶和意创木酚氧化酶的活性。结果发现,4种酶均有酶活性,产酶高峰也不尽相同。     

不同培养料对鸡腿菇胞外酶活性影响的研究

实验设计了6个不同鸡腿菇培养基配方,分别提取其在菌丝半袋、菌丝满袋、原基、幼菇、成熟5个生长阶段粗酶液,通过测定纤维素酶、漆酶和淀粉酶活性,初步揭示出不同培养基对鸡腿菇纤维素酶、漆酶、淀粉酶活力的影响及规律．结果表明：不同培养基配方对各种酶的活力大小有影响,但各种酶活性在不同基质中变化规律一致,基质成分对酶活性的变化规律无影响．     

L-肾上腺素对侧耳的生理效应

以侧耳(Pleurotus SP.)8405为实验菌株,研究了 L-肾上腺素对菌丝生长、子实体形成及多酚氧化酶、纤维素酶和呼吸强度的影响.实验结果表明:当培养基中 L-肾上腺素的浓度为5.5×10~(-7)～5.5×10~(-5)mol/L 时,侧耳8405菌丝生长快、生物学效率高,原基形成早,子实体数目和鲜重增加.当浓度为5.5×10~(-4)mol/L 时,对菌丝生长和子实体形成则有抑制作用.L-肾上腺素促进侧耳生长发育的效应同胞外多酚氧化酶、纤维素酶和呼吸强度之间有一定的联系.     

昆虫酚氧化酶研究综述

酚氧化酶广泛存在于动物、植物、微生物等有机体内,是生物体内黑色素合成的关建酶,在昆虫的免疫、防御系统中起重要的作用,可以作为害虫控制的一个重要的作用靶标.通过对昆虫体内酚氧化酶的激活方式,组织定位,生物学特性和功能的研究,为筛选新型的抑制剂提供理论依据.     

灵芝液体发酵过程中检测指标的研究

采用液体发酵法研究了灵芝培养过程中发酵液pH值、菌丝体生物量、胞外胞内多糖含量及漆酶和羧甲基纤维素酶活性的变化规律,结果表明:菌丝体生物量、胞外胞内多糖含量及漆酶和羧甲基纤维素酶活性在整个培养过程中均呈先升后降趋势,pH值前3天下降,之后基本不变;菌丝体生物量、胞内多糖含量及漆酶和羧甲基纤维素酶活性具有相同时间效应和变化趋势,均在发酵4d后达到峰值.漆酶和羧甲基纤维素酶活性可以反映灵芝菌丝体生长状况,且相对于其它检测指标更为灵敏、简便,可用于发酵过程指示和控制.     

白灵侧耳木质素酶、纤维素酶高活性菌株的诱变选育

通过对白灵侧耳进行原生质体制备和紫外线诱变处理,筛选出1株木质素酶、纤维素酶高产菌株B203,与出发菌株相比, 羧甲基纤维素酶活力在营养生长期和子实体形成期分别是出发菌株的2.2倍和2.47倍, 滤纸酶活力分别是出发菌株的1.75倍和1.68倍,漆酶、愈创木酚氧化酶和邻苯二酚氧化酶活力在营养生长期分别是出发菌株的1.54倍、1.21倍和1.25倍;在现蕾期分别是出发菌株的1.49倍、1.81倍和1.15倍,对木质素、纤维素的降解率分别比出发菌株提高了6.87%和5.65%.     

紫孢侧耳多糖的提取、纯化及性质的研究

从紫孢侧耳「Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ （Ｐａｕｌ：Ｐｅｒｓ．）Ｒｏｌｌ．」子实体中加微量酶提取水溶性多糖，经脱蛋白，ＣＭ－纤维素层析柱分离纯化，得到２个组分多糖：ＰＣ－Ⅰ和ＰＣ－Ⅱ，层析分离后，用醋酸纤维薄膜和聚丙烯酰胺电泳鉴定均为单一组分。红外史收光谱分析，ＰＣ－Ⅰ为β－糖苷键型，ＰＣ－Ⅱ为α－糖苷键型。     

糙皮侧耳C1诱变菌株F-13漆酶催化染料脱色

为了探究漆酶对染料的脱色作用,用糙皮侧耳C1诱变菌株F-13漆酶对偶氮类染料刚果红、甲基橙,苯胺类染料中性红,苯甲烷类染料孔雀石绿、碱性品红,蒽醌类染料茜素红,杂环类染料次甲基兰进行脱色,研究了pH、温度和反应时间对脱色效果的影响。结果表明,孔雀石绿、碱性品红和茜素红在2 h时的脱色率超过90%,次甲基蓝和中性红脱色率超过80%。可见此种漆酶对苯甲烷类、蒽醌类、杂环类和苯胺类染料有很好的脱色作用。     

糙皮侧耳Ax3产漆酶条件及部分酶学性质研究

对糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)Ax3菌的漆酶产生条件进行了研究，该菌产漆酶较高的条件是：培养温度25℃，培养基pH5．5，每升C／N含量0．252g／0．021g；加入0．05％～0．1％的吐温可提高漆酶酶活12倍。对漆酶的部分生化性质研究表明：最适反应温度25℃；最适反应pH2．8；琥珀酸缓冲液效果最好；金属离子：Mn^2 ，Cu^2 ，Zn^2 对漆酶有较强的激活作用，其中Mn^2 相对活性最高，Ag^ ，K^ ，Ca^2 ，Fe^2 对漆酶活性有抑制能力，其中Ag^ 的抑制作用明显。     

平菇与香菇原生质体融合新菌株的生物学特性研究

以平菇与香菇的原生质体进行融合,经初筛获得5个新菌株,其茵丝生长速度、纤维素酶活力(FPA酶活、CMC酶活)、木质素酶活力(漆酶酶活)得到明显提高,其中R23菌株在26℃下培养茵丝生长速度最快,且漆酶产酶能力显著高于亲本,R8茵株最耐高温,R24菌株的纤维素酶活力表现最优;酯酶同工酶谱分析结果显示R4、R15、R24新菌株含有香菇和平菇双亲的酶谱条带.     

不同培养基对平菇菌丝体生长的影响研究

设计10种合成培养基,用常见的佛罗里达菇P 13菌株分别接种于10种固体和液体培养基中试验研究。通过对菌株在固体培养基中菌丝生长情况以及在液体培养基中培养收集所得菌丝干重进行比较,试验结果表明,1号,5号,10号培养基是适合平菇菌丝体生长的培养基。     

外源因子对平菇深层发酵玉米秸秆木质素酶系分泌的影响

研究了1%-4%的豆渣、1%-3%的(NH4)2SO4和酵母菌(酿酒酵母、热带假丝酵母、产朊假丝酵母)对平菇深层发酵玉米秸秆木质素酶系活性的影响.结果表明:与对照相比,所试浓度的豆渣、(NH4)2SO4均显著提高漆酶、锰过氧化物酶的活性.其中2%、4%的豆渣分别对漆酶、锰过氧化物酶活性的促进作用最大,是对照的1.8和8.4倍;3%、2%的(NH4)2SO4分别对漆酶、锰过氧化物酶活性的促进作用最大,是对照的1.46和7.05倍.在平菇接种的同时及其培养的第2天分别接种3种酵母菌,均显著提高锰过氧化物酶的活性,其中酿酒酵母的促进作用最大,接种的同时及其培养的第2天接种分别是对照的5.97、10.2倍;平菇培养第2天接种产朊假丝酵母可显著提高漆酶的活性,是对照的1.32倍.     

平菇原生质体制备、再生及灭活研究

紫孢侧耳、糙皮侧耳和佛罗里达侧耳的原生质体制备与再生的最佳条件为：用１％溶壁酶＋０．５％蜗牛酶的混合酶液酶解培养３～４天的菌丝体，１．５小时后，原生质体产量均可达１０￣（１０）个／Ｌ；三种侧耳的最佳再生培养基分别为ＳＭ、ＭＰ和ＲＰ，再生率分别为０．６１％、０．６７％和０．７６％。随着紫外线对原生质体处理时间的加长，再生率逐渐下降，当处理４ｍｉｎ时，再生率接近零。     

秀珍菇废渣中木质素降解酶系的研究

【目的】重点研究秀珍菇废渣中的木质素降解酶系。【方法】对秀珍菇废渣中可能存在的3种木质素降解酶:锰过氧化物酶(Manganese peroxidase,MnP)、木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,LiP)及漆酶(Laccase,Lac)进行活力测定,并对漆酶的最适pH值和最适温度进行考察。【结果】在秀珍菇废渣中未检测到锰过氧化物酶活力,检测到漆酶和木质素过氧化物酶活力。漆酶的最适pH值为6.2,最适温度为30℃。【结论】较一般食用菌不同,秀珍菇废渣中同时具有木质素过氧化物酶和漆酶活力,并且木质素过氧化物酶活力还较高。     

真菌纤维二糖水解酶基因的克隆与表达研究

采用能够转化细菌和真菌的双功能质粒ｐＤＬ１，与部分酶切的糙皮侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｏｓｔｒｅａｔｕｓ）基因组ＤＮＡ片段进行体外重组。再用重组质粒ＤＮＡ转化玉米黑粉菌（Ｕｓｔｉｌａｇｏ，ｍａｙｄｉｓ）的原生质体，在平皿上筛选抗新霉素的转化子，转化率达８００转化子／μｇＤＮＡ，由此在玉米黑粉菌中建立了糙皮侧耳的基因文库。随机选出１５个转化子提取其ＤＮＡ，以３２Ｐ标记的ｎｅｕｒ基因酶切片段作为探针进行打点杂交，全部显示阳性，证明抗性菌落不是来源于敏感细胞的回复突变。以李氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）的纤维二糖水解酶（Ｃｅｌｌｏｂｉｏｈｙｄｒａｓｅｓ，简称ＣＢＨ）ＣＢＨⅡ基因末端片段为探针，从阳性克隆菌株中提取ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移并杂交，结果证明本研究已成功地克隆了糙皮侧耳纤维二糖水解酶ＣＢＨⅡ基因。基因的表达检测证明，克隆菌株具有纤维二糖水解酶活力。