谷氨酸生产菌T6—13谷氨酸脱氢酶特性研究

本文对谷氨酸生产菌Te_(-13)谷氨酸脱氢酶的辅酶专一性、热稳定性、最适温度、最适pH、动力学参数和发酵过程中酶活力变化进行了研究。结果表明该酶属胞内酶,以NADP~+为专一性辅酶,脱氨反应的最适pH为9.5,酶的最适温度为35～40℃,酶的热稳定性试验表明50℃保温10分钟,残留活力为50%,60℃保温10分钟残留活力为4%,70℃下则完全丧失活力,对L—谷氨酸和NADP~+动力学参数分别为2.13×10.2mol/L和6.58×10~(-5)mol/L,AMP、ADP对脱氨反应有激活作用,ATP无影响。     

黄色短杆菌ATCC14067生物合成L-谷氨酰胺的条件

本文报道黄色短菌(Brevibacterium flavum)ATCC 14067生物合成L-谷氨酰胺条件的研究结果。试验表明:培养基中的氮源种类,碳、氮浓度以及pH和通气量对L-谷氨酰胺的生物合成均有较大影响;所试金属离子亦有作用。在合适的培养条件下,该菌株可在发酵液中积累L-谷氨酰胺达26.83mg/ml。     

黄色短杆菌原生质体形成和再生条件研究

本文研究提高谷氨酸黄色短杆菌原生质体再生率的措施。按所研究的最适实验条件获得的再生率,比文献[1]报道的高150％,比文献[2]报道的高67％。     

从猪肝中提取谷氨酸脱氢酶

本文报道了以猪肝为原料,经乙酸沉淀,多次硫酸铵盐析,磷酸钙吸附步骤提取谷氨酸脱氢酶的方法,最终收率为17.3％,提纯倍数75.5。     

固定化原生质体产谷氨酸脱氢酶的研究

本文介绍了用海藻酸钙凝胶固定化谷氨酸棒杆菌T_(6-13)原生质体生产谷氨酸脱氢酶GDH,Eel.4.1.4的研究。固定化原生质体培养72h后发酵液中GDH活力可达到1.64×~(-2)U/mL,为游离细胞内产酶的205%.固定化原生质体还可用溶菌酶处理固定化细胞而制得,与直接制得的固定化原生质体具有同样的产酶能力,且制备方便,可重复使用,具有良好的贮藏稳定性。     

谷氨酸脱氢酶(GDH)的性质

考察了GDH催化的最适条件:40℃,pH8.5,磷酸盐缓冲液离子强度为0.25mol/L.酶活性稳定的pH范围为5.5～9.0.甘油对GDH的热变性有明显的保护作用.     

类产碱假单胞菌谷氨酸脱氢酶酶学性质的研究

类产碱假单胞菌的谷氨酸脱氢酶水平受氮源调节,以氮为唯一氮源时酶水平有明显提高,研究表明,该酶的最适反应温度为５０℃,催化氢化反应和脱氨反应的最适ｐＨ值分别为８．０和８．８,金属离子及嘌呤核苷酸对酶活力的影响不显著。     

疏水层析法分离纯化脂肪酶的研究

采用疏水层析法对商业解脂假丝酵母的中性脂肪酶粗制剂进行了分离、纯化,实验以Ｐｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ为固定相,异丙醇－哌嗪为流动相,经一次柱层析,从该粗酶中分离出的单一脂肪酶的比活可提高１０倍以上。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测定其分子量约为２０．８ｋＤ;管状等电聚焦法测其等电点约为４．５０。     

米曲霉(Aspergillus oryzae)植酸酶的分离纯化及性质研究

从5株霉菌中筛选出1株产胞外植酸酶最高的菌株(Aspcrgillusoryxae;简称霉菌3号)。经发酵,硫酸铵分级沉淀,Sephadex G—100凝胶过滤、SE—Sephadex G—50层析和电泳分离,获得2种植酸同工酶.此两种酶的分子量为40000d,等电点分别为4.5和4.8,最适pH为2.7和5.6,最适温度为50℃,K_m值为50μmol/L。SDS、Fe_~(2+)对酶活力无影响;Mn~(2+)、Ca~(2+)、Mg~(2+)有激活作用;Cu~(2+)有抑制作用。     

新生牛肝脏中肝细胞生长因子（cHGF）的分离纯化及性质研究

从新生牛肝脏分离纯化到一种具有刺激肝源性ＳＭＭＣ—７７２１人肝癌细胞和原代培养的人胎肝细胞ＤＮＡ合成的单一组分，命名为小牛肝细胞生长因子（ｃａｌｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｃＨＧＦ），测得分子量为３９．８ｋｄ，蒽酮法测得糖含量极少，部分纯化的ｃＨＧＦ在与胰岛素和表皮生长因子混合使用时活性有一定增加，对ＣＣｌ４处理的肝坏死大鼠有明显的促肝再生功能。     

大蒜鳞茎SOD的分离纯化

利用（ＮＨ４）２ＳＯ４分级沉淀，透析后经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析和ＤＥＡＥ－３２柱层析从大蒜鳞茎中分离并纯了ＳＯＤ，最大比活为９６ｕ／ｍｇ蛋白，最高纯化倍数为４８。     

玉米巯基蛋白酶抑制剂的纯化及部分性质

从玉米种子纯化的两种巯基蛋白酶抑制剂（ＣＰＩ－Ｉ和ＣＰＩ－Ⅱ）分子量分别为９５００和１３０００,经们都只抑制巯基蛋白酶的水解活性,而对丝氨酸蛋白酶则无抑制作用,属于巯基蛋白酶水解抑制剂,它们在ｐＨ３．０～１１．０或１００℃温度范围内保有１００％的抑制木瓜蛋白的抑制活性,表明在这些外界条件下其分子非常稳定。     

酵母海藻糖提取及精制工艺的研究

对酵母海藻糖的提取与纯化工艺进行了研究。在温度80℃、酵母质量浓度70g/L条件下用50%乙醇溶液提取60min,海藻糖提取率可达98.81%;采用大孔阴阳离子交换树脂混合柱纯化提取液,适宜条件为,流速(3～6)mL/min,温度40℃,经浓缩、结晶,海藻糖纯度可达98%以上。     

柞蚕抗菌蛋白纯化及性质

从雄性柞蚕（ Ａｎｔｈｅｒａｅａ ｐｅｒｎｙｉ） 蛹中分离和纯化抗菌蛋白．该抗菌蛋白由大肠杆菌诱导产生,经过 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ５０ 分离纯化,在 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 检测中表现为一条带,分子量在１５ ｋ Ｄａ 左右．纯化产物对大肠杆菌有明显抗菌活性,对血细胞没有凝集作用,是抗菌蛋白．