甜瓜多聚半乳糖醛酸酶基因cDNA的克隆和序列分析

以甜瓜品种河套蜜瓜成熟果实mRNA为模板，经反转录合成和PCR扩增得到编码多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase，PG)基因全长cDNA，将其克隆于pUC19质粒中获得重组质粒pCMPG．此cDNA长1183bp，包括一个393个氨基酸残基组成的开放阅读框架，与已报道的甜瓜PG基因cDNA核苷酸序列比较同源性为99．3％，相应的氨基酸的同源性为98．5％．     

猪肝脏和肌肉肉碱脂酰转移酶I基因片段克隆及序列分析

分别从金皮F2代猪的肝脏、第十肋背最长肌中提取总RNA,并根据报道的猪L—CPT I cDNA和M—CPT I cDNA序列分别设计引物1和引物2,用反转录一聚合酶链式反应（RT—PCR）进行cDNA扩增,获得两条长度分别为733bp和510bp的片段,克隆于pUCm-TVector后进行序列分析。结果表明,长度为733bp的片段为L—CPTI基因cDNA的部分序列,编码243个氨基酸,而长度为510bp的片段则为M—CPTI基因cDNA的部分序列,编码169个氨基酸。得到的两条基因片段与报道的猪L—CPT IcDNA和M—CPT IcDNA部分序列同源性分别为99.59％和99．61％。     

青海牦牛与云南牦牛乳球蛋白基因5''''调控区核苷酸序列同源性比较

利用一对PCR引物，寡聚核苷酸序列的上游引物为5’-gCg，AAT，TCA，TCC，CAC，gTg，CCT，gC-3’；下游引物为5’-gAg，AAT，TCC，Tgg，ggA，ggg，ACC，TT-3’。经68℃退火及30轮循环的PCR程序后，分别克隆来自我国青海和云南地区牦牛的乳球蛋白基因的5’调控区1447bp的DNA片段。将该片段从琼脂糖凝胶中回收，克隆在pMD1S-T Vector后进行序列测定。序列分析结果表明，青海牦牛该序列的核苷酸序列与文献报道的奶牛该基因的同源性为97．65％，云南牦牛该序列的核苷酸序列与奶牛该基因的同源性为96．8％，青海牦牛与云南牦牛该基因片段的核苷酸序列同源性为99．4％。     

猪肝脏和肌肉肉碱脂酰转移酶Ⅰ基因片段克隆及序列分析

分别从金皮F2代猪的肝脏、第十肋背最长肌中提取总RNA,并根据报道的猪L-CPT ⅠcDNA和M-CPT Ⅰ cDNA序列分别设计引物1和引物2,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得两条长度分别为733 bp和510 bp的片段,克隆于pUCm-T Vector后进行序列分析.结果表明,长度为733 bp的片段为L-CPT Ⅰ基因cDNA的部分序列,编码243个氨基酸,而长度为510 bp的片段则为M-CPT Ⅰ基因cDNA的部分序列,编码169个氨基酸.得到的两条基因片段与报道的猪L-CPT Ⅰ cDNA和M-CPT ⅠcDNA部分序列同源性分别为99.59%和99.61%.     

新疆绵羊种布鲁氏菌GroEL基因的克隆及序列分析

参考牛种布鲁氏菌的GroEL（热休克蛋白）基因设计引物,扩增出新疆绵羊种布鲁氏菌GroEL基因片段,将其片段克隆到T载体上测序。结果表明：新疆源布鲁氏菌GroEL基因片段长1641bp,编码546个氨基酸,与羊种（B．melitensis）、猪种（B．suis）以及牛种（B．abortus）GroEL基因的核苷酸序列同源性分别为99．88％、99．82％、99．88％,推导的氨基酸序列同源性在99％以上,显示了很强的保守性。     

牦牛催乳素受体基因部分片段的克隆与序列分析

扩增出牦牛催乳素受体（尸碰尺）基因部分保守序列,为研究牦牛乳腺组织中朋三尺基因表达水平奠定基础．提取牦牛乳腺组织总RNA,根据NCB1的奶牛Jp月￡只基因cDNA序列的保守区设计特异性引物,采用RT-PCR技术扩增牦牛尸胜尺基N,结果获得577bp的片段,将该片段连接于pMD18-Simple质粒中,转化大肠杆菌,菌液PCR鉴定阳性克隆子,测序并分析氨基酸序列．分析序列与氨基酸与其他物种同源性,结果表明该序列与水牛、奶牛、绵羊、人、小鼠的尸RLR基因mRNA的对应序列的同源性分别为97．40％、99．13％、93．41％、71．07％、60．20％,编码的氨基酸同源性分别为97．40％、100％、95．83％、82-38％、72-22％．     

小拟南芥几丁质酶基因cDNA的克隆与序列分析

通过合成1对特异引物，应用RT-PCR技术从小拟南芥总RNA中经反转录克隆出几丁质酶基因，该cDNA基因全长985bp，含有1个963bp的开放阅读框(ORF)，编码321个氨基酸，推测分子量为35．53kD，序列同源性分析表明，该基因与拟南芥几丁质酶基因有93％的同源性。     

我国不同地域牦牛BLG基因部分核苷酸序列同源性分析

设计一对PCR引物，寡聚核苷酸序列的上游引物为5’-gCg，AAT，TCA，TCC，CAC，gTg，CCT，gC-3’，下游引物为5’-gAg，AAT，TCC，Tgg，ggA，ggg，ACC，TT-3’。经68℃退火及30轮循环的PCR程序后，分别克隆了来自我国甘肃、青海和云南地区牦牛β乳球蛋白基因的5’调控区1447bp的DNA片段。将该片段从琼脂糖凝胶中回收，克隆在pMD18-T Vector后进行序列测定。序列分析结果表明，甘肃牦牛与青海牦牛该序列的核苷酸同源性为98、13％，与云南牦牛该序列的核苷酸同源性为97．65％，青海牦牛与云南牦牛该基因片段的核苷酸序列同源性为99．45％。     

南方鲇促生长激素释放激素基因的部分cDNA克隆及序列分析

促生长激素释放激素（GHRH）是一种重要的内分泌激素,主要功能是调节脑垂体分泌生长激素（OH）．实验旨在克隆分析南方鲇GHRH基因的cDNA序列．从南方鲇的脑组织中提取总RNA并反转录成cDNA,再根据已知GHRH基因的保守区域序列设计引物,通过反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）实验,获得了一条334bp的片段并进行了测序,序列信息分析表明,该序列与沟鲇的GHRH基因同源,相似性达99％．根据同源性检索结果推测该序列编码110个氨基酸,并基于该编码序列分析了南方鲇GHRH的功能结构域以及南方鲇同其他物种的遗传发生关系,     

新疆果用瓜产业发展优势及对策分析

新疆果用瓜的栽培有着悠久的历史和丰富的经验,在国内外水果市场上享有极高的声誉,近几年果用瓜产业得到了很大的发展,不仅成为新疆的优势产业,同时,也是增加农民收入的特色主导产业之一。大力发展果用瓜产业,对新疆经济繁荣和人民生活水平提高有非常重要意义。     

甜瓜成株抗感枯萎病品种过氧化物酶同工酶研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析比较了甜瓜花期和座果期不同抗感枯萎病品种的ＰＯＤ同工酶酶谱。结果表明：在二个时期甜瓜ＰＯＤ同工酶在酶带数目、相对活性上存在明显差异，ＰＯＤ同工酶与品种抗病性相关，通过成株期ＰＯＤ同工酶分析为抗病新品种选择提供了依据     

花粉管通道法转基因技术在甜瓜品种河套蜜瓜上的应用

为建立甜瓜(Cucumis melo L.)简便易行转化频率高的转基因技术,以甜瓜品种河套蜜瓜为受体材料,以含gus基因的植物双元表达载体pPZP221为外源基因供体,进行了花粉管通道法转基因研究.自交授粉后分别于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 h,切去柱头上端1/3部分,立即滴加质粒DNA溶液,果实成熟后收获转化种子.对T0代植株进行PCR检测,结果表明不同时间处理所得到的T0代植株均具有较高的转化频率,其中授粉后7 h滴加DNA溶液所获得的转化率为28.3%.对一部分PCR阳性的T0代植株基因组DNA进行Southern杂交分析,结果表明所有样品均出现特异性杂交条带,证明外源基因已整合到受体植物基因组中.     

甜瓜枯萎病滤液对抗性不同哈密瓜品系愈伤组织形成的影响

甜瓜枯萎病的粗提毒素对哈密瓜幼茎愈伤组织的形成有一定的抑制作用,对抗性不同的品系,这种作用呈现出一定的差异,抗病品系所受的抑制作用小于感病的品系。另外,基培养基中毒素的浓度不同,其对愈伤组织的抑制作用也不相同,浓度越高,抑制作用越大,这说明哈密瓜对枯萎病的抗性在一定的程度上可以离体表达。     

外源激素诱导甜瓜下胚轴愈伤组织的效应

在1/2MS的基本培养基中附加2,4-D1.0毫克/升、6-BA2.0毫克/升或2,4-D0.1毫克/升和6-BA1.0毫克/升,都能诱导甜瓜下胚轴发生愈伤组织。但是,不同激素作用下,甜瓜下胚轴愈伤组织的起源不同。2,4-D诱导维管束中薄壁细胞和紧靠维管束的一圈皮层细胞启动。6-BA诱导维管束中发生形成层以及诱导皮层细胞启动。不仅如此,2,4-D和6-BA对甜瓜下胚轴中可溶性蛋白的含量以及过氧化物酶活性影响也明显不同。在过氧化物同工酶谱的分析中发现附加6-BA时,形成的愈伤组织存在着特有的酶带。     

甜瓜子叶不定芽分化过程中PAL活性和木质素含量变化研究

用组织培养的方法使甜瓜子叶脱分化形成愈伤组织，继而在分化培养基上形成不定芽。以此为系统，测定不定芽发生过程中ＰＡＬ活性变化和木质素含量变化。以肉桂酸、香草酸、苯甲酸、阿魏酸和咖啡酸为抑制剂，研究它们对不定芽发生的影响以及对系统中ＰＡＬ活性变化和木质素含量变化的影响。结果表明，五种抑制剂均抑制不定芽的发生。ＰＡＬ活性，木质素含量和愈伤组织分化成管胞、不定芽发生四者之间有密切的关系。     

遗传标记在甜瓜遗传育种中的应用

综述了遗传标记在研究甜瓜起源地、分类、遗传多样性、图谱构建及分子辅助育种等方面的应用。     

Establishment of in Vitro Regeneration System of Bitter Melon （Momordica Charantia L. ）

0　IntroductionBittermelon (MomordicaCharantiaL .)belongstoMomordicaofCucurbiteae .Itisnotonlyavegetablecropbutalsoanimportantmedicalherb (Hoetal.1991)inChinaandeastAsia .Inrecentyears ,phytochemistshaveisolatedanumberofpotentialmedicalcomponentsfrombittermelon ,suchastheα momorcharininactivatingribo some (Fengetal.1990 ;Leungetal.1997) ,MAP30(Momordicaanti Hivprotein) ,whichsuppressesHIV(humanimmunodeficiencyVirus)activity (Lee Huangetal.1990 ,1995 ) ,andmomordicosideAandB ,bothofwh…     

苦瓜籽中抗真菌蛋白MAP13的分离纯化与表征

将苦瓜籽粗提液分别经阴离子色谱柱、阳离子色谱柱交换后,得到一个具有抗真菌活性的蛋白MAP13.该蛋白经鉴定达到电泳纯,相对分子量为12.7 kDa.经还原剂处理后,电泳结果表明该蛋白由分子量分别为7和6 kDa的两个亚基组成,亚基之间通过二硫键连接.体外抑菌实验表明该蛋白对苹果轮纹病菌、瓜果腐霉病菌和棉花枯萎病菌具有较强的抑制作用.     

香蕉瓜的营养成分及黄色素的稳定性研究

对香蕉瓜的营养成分及其色素的提取和稳定性进行了系统研究，结果表明，此瓜含有丰富的胡萝卡素、糖、蛋白质和氨基酸等，尤其是皮中胡萝卡素含量特别高，瓜皮中还含有丰富的黄色素，该色素对酸、碱、热、食品基质、金属离子等稳定性良好，但对光照的稳定性较差。