单克隆抗体亲和层析法纯化人尿激酶

含抗人尿激酶单克隆抗体的腹水经ＰｒｏｔｅｉｎＡ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ４Ｂ柱纯化得到ＩｇＧ纯品,分子量为１５０ｋＤ（重链５５ｋＤ,轻链２０ｋＤ）,与ＣＮＢｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制成抗人尿激酶单克隆抗－体－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析介质。尿激酶粗品经单抗－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析柱纯化后,所得尿激酶制品比活为９×１０－４～１．７×１０－３ｍｏｌ／ｓ·ｍｇ－１,纯化倍数为１５～３０倍,酶活性回收率在５０％以上。     

亲和层析法制备人血浆白蛋白

低温乙醇法FIV沉淀中含有白蛋白96．00±13．52g／kg．15倍生理盐水磷酸缓冲液可溶解其中的87．44％(约83．94±11．119／kg)．通过DEAE Affi-Gel Blue 亲和层析及DEAESepharose FF 离子交换层析两步分离的纯化工艺，可从FIV溶解液中回收白蛋白48．18±1.118／kg FIV，回收率为57．40±1.94％．白蛋白溶液呈淡黄色，澄清透明，纯度为98．28±1．68％，单体含量97．00±2．19％，吸收度为0．028±0．006．白蛋白试制品能耐受57℃50h热稳定性试验．各检测指标显示，通过亲和层析综合阴离子交换层析回收纯化的白蛋白制品各主要生化指标符合质检要求．     

层析法分离纯化大豆卵磷脂

本文以大豆油脚为原料,用有机试剂提取制得粗品,后经柱层法分离纯化,获得大豆卵磷脂,经化学和红外等分析,证实其结构。     

抗人尿激酶单克隆抗体的制备

采用常规免疫和脾内免疫相结合的方法，利用杂交瘤技术得到两个能分泌抗人尿激酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株１０Ｈ１０，１０Ｄ１２。它们分泌的单克隆抗体主要识别Ｍｒ．５４，０００的高分子量尿激酶和Ｍｒ．１８，０００的尿激酶Ａ链。两种单克隆抗体与胰蛋白酶，胰蛋白酶原，胰凝乳蛋白酶和胰凝乳蛋白酶原等丝氨酸蛋白酶和酶原无交叉反应。     

用柱层析法分离纯化蛋黄卵磷脂

对25％的蛋黄卵磷脂法应用柱层析法进行纯化分离，以硅胶为固定相，氯仿、甲醉作为梯度洗脱剂；应用硅胶G薄层层析法进行定性鉴定，薄层扫描仪定量分析，结果显示柱层析法纯化的卵磷脂经薄层层析分析呈单一斑点，经过薄层扫描仪测定纯度达97．5％，5g粗卵磷脂得到卵磷脂1．07g。     

利用胶体金层析法快速检测尿样中的甲基苯丙胺

采用炭化二亚胺法制备甲基苯丙胺全抗原。将获得的免疫抗原注射至小鼠体内获得抗甲基苯丙胺单克隆抗体，在此基础上制备甲基苯丙胺肢体金层析快速检测条，利用检测条快速检测吸食者尿样中的甲基苯丙胺。该法可以广泛地用于被检测样本的大量和快速筛选，能有效地解决迅速检测出吸食者尿样中含量大于500ng/mL甲基苯丙胺。     

用脾内免疫法制备抗人尿激酶单克隆抗体

用常规免疫法制备抗人尿激酶单克隆抗体费时、费样品。本文采用脾内直接注射的免疫方法,利用杂交瘤技术制备了3C_6抗尿激酶单克隆抗体,3C_6单克隆抗体属IgM亚类,主要识别MW 54,000的高分子量尿激酶和MW 33,000的低分子量尿激酶。3C_6单克隆抗体与结构类似的胰蛋白酶和纤溶酶原无交叉反应,与胰凝乳蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶有一定程度的交叉反应。     

利用氨基苄脒为配基的亲和层析法纯化t—PA

利用氨基苄脒修饰的硅胶为亲和吸附剂纯化组织纤溶酶原激活剂（ｔ－ＰＡ），讨论了亲和柱体积对纯化效率的影响。由于氨基苄脒对ｔ－ＰＡ的高度特异性，根据ｔ－ＰＡ的上柱量适当调整柱体积，可使纯化倍数达到１４０以上，远高于利用其它亲和吸附剂的结果。     

免疫亲和层析法从兔杂交瘤培养上清液中纯化兔抗烟草花叶病毒的单克隆抗体

报道一种较为简易的免疫亲和层析技术,从兔杂交瘤培养上清中分离纯化单克隆抗体。先用过碘酸钠活化层析柱填料Sepharose4B,然后加入碱性碳酸钠缓冲液与羊抗兔IgG于4℃偶联过夜,冲洗后加硼氢化钠使偶联稳定,经1％BSA-PBS溶液封闭,冲洗后即得到免疫亲和层析柱。将兔抗烟草花叶病毒（TMV）杂交瘤细胞2E2和3C6的培养上清加入亲和柱中,37℃下吸附1h,冲洗后用pH3稀盐酸溶液洗脱,洗脱液用Tris溶液调至pH中性,供SDS-PAGE分析和Westernblot实验。洗脱液中存在分子量约为60000与52000的二条蛋白条带。Westernblot结果显示,纯化抗体对纯化TMV样品,以及TMV侵染的烟草病叶中的TMV都具有非常好的识别能力。利用所报道的免疫亲和层析技术,从兔杂交瘤培养上清中成功分离纯化到兔抗TMV的单克隆抗体。