冷冻保存对人类附睾精子功能的影响

目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１ 例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后,每例冷冻标本均见活动精子,但精子活动率显著降低,精子活动能力减弱。精子膜完整率显著下降,头膜损伤－ 尾膜完整的精子率（ Ⅲ型精子） 显著升高,精子体外存活时间显著缩短。精子顶体蛋白酶活性降低。去透明带地鼠卵穿透试验检验精子体外授精能力失败的标本,采用显微注射技术可使精子辅助授精。结论：（１） 冷冻保存对附睾精子功能有显著的影响,造成精子功能减弱;（２） 冷冻精子仅用单一尾膜肿胀试验筛选,有可能拾取到的是尾膜完整,但头膜损伤的精子;（３） 建立显微授精技术可有效地对冷冻附睾精子辅助受精。     

人类精子的冷冻生物学特性

人类精子的冷冻保存，精子要经历与冷冻保护剂孵育、降温冷冻、超低温贮存和解冻复温等过程，这过程的化学和物理效应直接作用于精子，精子功能不可避免地受到影响。本研究应用多种方法探讨人类精子的冷冻生物学特性。精子活动率和活力采用Malker精子计算器测定（n=150），精子膜完整性应用低渗膜肿胀试验（n＝60），精子体外存活用培养法观察（n＝8），精子ATP含量用LKB荧光测定仪检测（n＝55），精子穿透宫颈粘液能力采用Kremer试验评估（n＝42），精子受精能力借助去透明带地鼠卵穿透试验检测（n＝30）。精子冷冻采用程序控制生物冷…     

冷冻保存对人类精子顶体蛋白酶的影响

探讨了冷冻保存对人类精子顶体蛋白酶的影响,应用明胶薄层法检测,冷冻保存后精子顶体蛋白酶反应率和成环直径显著减少（ｎ＝３０,Ｐ＜０．０１）．透射电镜观察到冷冻保存后精子（ｎ＝３）头部结构完整性显著降低,提示浆膜、顶体膜超微结构的冷冻损伤与冷冻精子顶体蛋白酶活性丢失和降低有关．冷冻精子穿卵率与顶体蛋白酶反应率不呈相关性（ｎ＝２１,ｒ＝０．３４,Ｐ＞０．０５）,提示两项检测反映的是精子功能的不同方面．     

金黄地鼠卵冷冻保存的初步研究

人精子一去透明带地鼠卵穿透试验（HOPT）在国内外广泛应用于评价人精子的生育潜力,但实施检测尚存在实验周期长,动物超排获得卵子往往难与精子完成制备的时间相一致等问题。为此,应用冷冻保存的金黄地鼠卵可以克服这些不足。本研究应用程序控制生物冷冻仪,探讨金黄地鼠冷冻保存的可行性。冷冻保护剂为二甲基亚砜（DMSO）,降温冷冻为5步程序。卵子解冻后用渗透压递减洗涤脱除DMSO。冷冻保存卵采用卵子形态学和精子穿卵率评价。结果表明,冷冻保存后约47％的卵子保持近似对照组的形态,53％的卵子表现出细胞结构损伤或异常。与对照…     

人类低品质精液的一步冷冻保存

男性不育症有部分病因是由于低品质精液因素所致,对这类精液进行冷冻保存有助于临床结合生殖工程技术实施治疗。近年人类精液冷冻保存方法学有了很大进展,但低品质精液体外处理结合一步冷冻的效果尚无报道。低品质精液按照其低精子参数分成3组：1组（低精子计数组,n二6）,11组（低精子活动率组,n＝11）,皿组（低正常精子形态率组,n＝8）。1组用BWW生理液洗涤、离心制备成精子悬液。3组的精子悬液与冷冻保护剂等量混匀后吸人IInL聚丙烯注射器,直接置一196T一步冷冻和保存。经体外处理精子后的3组标本,解冻后的精子复苏率分别为（…     

冷冻保存对精子运动的影响

目的：观察精子运动状态,其中包括精子折断现象与冷冻损伤的关系。方法：对精液标本进行一步冷冻保存和分步冷冻保存,并用鉴别精子形态湿片法对冷冻前后精子运动状态及折断率进行评价。结果：冷冻保存复温后的精子活动率与冷冻前的精了活动率比较明显下降（P＜0．01）;含冷冻保护剂的实验组与不含冷冻保护剂的对照组比较,精子率呈显著性差异（P＜0．01）,精子折断率无显著性差异（P＞0．05）;一步冷冻和分步冷冻保存的精子之间活动率及折断率相比较,无显著性差异（P＞0．05）。结论：冷冻保存易造成精子活动率下降、运动形态异常,但不能显著地导致精子折断发生率增加。     

小鼠附睾精子的显微受精

目的：建立显微受精的方法,并探讨小鼠附睾精子在显微注射进入卵母细胞后的受精能力。方法：用显微注射法把小鼠附睾头和附睾尾精子注入卵母细胞的胞质内或卵周隙进行显微受精。结果：把单个附睾尾精子注入卵细胞质中,培养后１４个存活的卵细胞中,有５个卵裂为２－细胞期胚胎;将单个附睾头精子注入卵母细胞中,有２５个存活,其中９个受精发育为２－细胞期胚胎;将附睾尾精子注入卵周隙进行带下受精,３０个存活的卵细胞中有４个     

人类精子间期核荧光原位杂交

目的：研究人类精子染色体畸变。方法：Ｅ和３号染色体涂染探针对人类精子间期核进行荧光原位杂交，共检测了１０名正常健康男性，２名涉及３号染色体平衡易位携带ｔ（３：７）、ｔ（３：９）的精子。结果：正常男性精子间期核中３号染色数目和（或）结构畸变率〈２％，涉及３号染色体平衡易位携带的畸变率〉１０％。结论：荧光原位杂交技术可秀于检测精子间期核染色体的畸变．     

卵黄缓冲液4℃保存3种低品质精液后的穿卵率变化

临床上采用手术、药物或激素调节疗法，对相当一部分不育患者的精液质量改善不明显。国外人类生殖临床目前趋向于借助体外的方法，对低品质精液作优化精子功能处理，但国内有关报告尚少，对不同低品质精液类型的处理效果未见详细评价。本研究探讨3种低品质精液经卵黄缓冲液冷保存后，精子受精能力的变化。参照世界卫生组织精液分析手册的精子参数标准，实验标本分为3组：低精子活动率组（n＝13），低精子密度组（n＝7）和低正常精子形态组（n＝9）。标本与卵黄缓冲液以等体积比混匀，置冰箱4℃；冷水浴24－48h。用去透明带地鼠卵穿透试验检…     

可公度处组装膜原子尺度黏—滑摩擦特性研究

使用经典分子动力学模拟的方法研究了金（111）上自组装膜的挤压和摩擦过程。计算结果表明摩擦力对应于表面的几何结构而周期变化。膜中不同单体粒子（头基和尾基）以有序的黏滑和跳跃的方式运动。静止下层膜的头基都有2－3个准稳态位置。黏带阶段头基在其中一个准稳态处振荡，两层相对滑动膜的尾基一起被拖动。而在滑动阶段头基同时跳动到一个新的准稳态，上层膜的尾基相对下层向前跳动晶格常数的一半。由此建立起摩擦过程中自组装膜链分子完整的运动模式并和Tomlinson模型所预测的进行了比较。     

人类精子功能检则的现状（综述）

人类精子功能检则的现状（综述）朱伟杰（暨南大学生殖免疫研究中心，５１０６３２，广州）精子功能检测是男性生育与不育基础研究和临床评估必需实施的检查，广义而言，精子功能检测包括标准精液分析和特定精子功能测试。前者了解精液、精子和精浆的一般性状，后者评价精...     

人类睾丸精子和附睾精子的顶体蛋白酶活性

精子形成过程最明显的条件之一是顶体的发育，顶体蛋白酶则是顶体内发育的重要酶类。人类射出精子的顶体蛋白酶活性已有研究，但在人睾丸和附睾水平，顶体蛋白酶的活性状态国内外尚无报道。本文探讨顶体蛋白酶在人睾丸和附睾部位的活性和变化。先天性双侧输精管缺如者取睾丸精子和附睾精子；精索静脉曲张结扎者取睾丸精子和射出精子。睾丸精子从常规睾丸活检组织中分离；附睾精子在阴囊探查术或人工贮精囊术时获取。射出精子为手淫法取精。应用明胶薄层试验、去透明带地鼠卵穿透试验和透射电镜观察顶体蛋白酶活性及其影响。实验结果表明，睾…     

准弹性光散射测量机理及其应用

准弹性光散射技术是生物学中一种新颖的技术，具有测量速度快，精度高等 优点。准弹性光散射测量原理是基于经典的多普勒效应，利用 Ｒａｙｌｅｉｇｈ－Ｇａｎｓ－Ｄｅｂｙｅ （ＲＧＤ）近似方法推导出微粒运动速度和频率变化之间关系。对生物微粒（精子与四膜 虫）进行测量表明 ＲＧＤ近似方法完全适用。     

真鲷精液和精巢超低温冷冻保存

以精子的活率和游动时间为指标，研究了福建南部沿海秋冬季真鲷生殖群体精液和精巢超低温冷冻保存的方法和鲜精在不同盐度或酸碱度条件下的生理特性．结果表明，以０．８％的ＮａＣｌ和０．０５％的ＫＣｌ配制的稀释液适合于真鲷精液的冷冻保存．Ｋ＋有助于提高精子的活率．添加甘氨酸可延长精子的游动时间．甘油、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）和甲醇均可作为真鲷精液的抗冻保护剂，但以甘油和ＤＭＳＯ混合使用时的抗冻效果较好．冷冻精液的效果优于冷冻精巢．鲜精在弱碱环境和盐度为３０时平均活率最高，游动时间最长．     

芦笋汁的抗突变作用

用微核（MN）试验、姐妹染色单体交换（SCE）及精子畸形试验探讨芦笋汁对环磷酰胺（CTX）致突变作用的影响,结果表明,单纯芦笋汁对小鼠骨髓细胞MN和SCE及精子畸形均无明显影响,但一定剂量芦笋汁可使CTX诱发的MN率（6．00％）降低（5．03％－2．66％）,SCE（29．22次／细胞）减少（26．40－13．37次／细胞）,精子畸形率（6．10％）下降（5．12％－2．86％）,均呈现剂量－效应关系。     

人类精液一步冷冻法的研究

自Sherman（1963）成功创立液氮冷冻保存人类精液以来,人类精液的冷冻普遍应用程控冷冻仪或人工操作的多步控制降温方法,对将精液从室温直接置-196℃液氮冷冻保存的“一步冷冻法”,迄今报道和评价尚少。本文选用聚丙烯1mL注射器作精液冻贮容器,实验建立一种简便有效的人类精液一步冷冻方法。冷冻保护剂以BWW精子培养液为基液,添加入10％体积比甘油、甘氨酸、蔗糖和人血清白蛋白等制备而成。精液冻贮容器为聚丙烯一次性使用的IInL注射器。精液与冷冻保护剂等体积混匀后,直接投入一196T液氮“一步冷冻”和保存。解冻为37℃水浴5ban…     

合浦珠母贝精子发生过程的超微结构观察

报道了透射电镜下合浦珠母贝精子发生过程超微结构的观察结果。描述了精子发生过程中线粒体，中心体（鞭毛），顶体泡和细胞核的演变过程。精子细胞核内染色质以颗粒状形式凝集，精子核呈圆桶状，圆形的顶体泡迁移到顶体部位后变形成为圆锥形顶体。合浦珠母贝精子经过精度原细胞，精母细胞和精子细胞，最终发育成为成为成熟的精子，成熟的精子由头部（长约２μｍ），中段（长约０．６８μｍ，宽约１．６μｍ）和尾部（长约５０－６０     

岩溶地基岩质单元的划分依据及fr的确定

根据岩心观察与描述，岩心采取率、岩石质量指标（Ｒ、Ｑ、Ｄ）、岩石的块度指标、声波值及声波曲线、岩体回弹检测等方法确定岩体的完整性。结合岩体风化、溶蚀、地质构造背景正确地划分岩体的岩质单元。同时采用岩石单轴抗压强度试验、点荷载试验、静载荷试验等方法按单元提供各岩质单元地基承载力的标准值（ｆｒ）。实践证明，通过上述方法，尤其是静载荷试验后，地基承载力比经验数据或其它方法间接确定的承载力有较大幅度的提高     

润滑条件下钢/钢滑动摩擦副P-V图的研究

在球盘式摩擦磨损试验机上，采用阶梯加载方式，测定了润滑条件下钢／钢滑动摩 擦副的临界载荷－速度（Ｐ－Ｖ）图，分析了Ｐ－Ｖ图各区域的摩擦磨损特性。试验发现， 边界润滑不仅出现在低速下，在高速下也同样存在。根据俄歇能谱及铁谱分析结果，可 以证明氧化膜对润滑状态转化起着决定性的作用。     

自由基对人精子功能调控

人类精液中存在两种产生活性氧（ＲＯＳ）的来源－－精子和白细胞。这些ＲＯＳ在不同水平对精子结构和功能具有不同效应。结合本室成果,综述了ＲＯＳ及其清除剂对人精子存活率、运动性和获能等功能的调控及可能的作用机理,提示ＲＯＳ在男性生殖生理及病理过程中可能具有重要的生理病理作用,并为ＲＯＳ清除剂用于治疗男性不育症及抗男性生育提供理论和临床依据。