脂肪间充质干细胞冻存及成骨诱导的实验研究

研究了脂肪间充质干细胞(ADMSCs)冻存的条件,观察低温冻存对ADMSCs的一般生物学特征及成骨分化潜能的影响。酶消化法分离培养人ADMSCs,液氮中冻存6月,复苏后倒置相差显微镜下观察细胞形态及生长状况,台盼蓝染色检测存活率,MTT法绘制生长曲线,地塞米松、左旋抗坏血酸、β-甘油磷酸钠、1,25-(OH)2VitD3成骨诱导,免疫细胞化学染色行成骨鉴定。人体脂肪组织中存在ADMSCs,经冻存复苏后,细胞存活率较高,细胞形态及生长曲线与冻存前无明显差别,经成骨诱导后仍可表达骨钙素(OC)和I型胶原。证实人ADMSCs可以耐受体外低温冻存,且能够保持稳定的一般生物学性状及成骨分化潜能。     

兔和牛角膜上皮、基质及内皮细胞体外培养和增殖的研究

目的：研究兔和牛角膜上皮、基质及内皮细胞等3种细胞体外培养的生物学特性，探索和改进这3种细胞体外培养的方法，为组织工程角膜奠定基础。方法：采用消化法分离培养兔和牛角膜上皮、内皮和基质细胞，观察细胞贴壁生长情况，同时对生长良好的原代细胞进行消化传代，进一步观察传代细胞的形态和生长情况。结果：角膜上皮、内皮和基质细胞均在培养48～72h贴壁生长，培养6～9d能形成良好单层，细胞形态典型，进行多次传代后细胞仍维持原有形态和功能，获得的细胞能进行长期培养。结论：为兔和牛角膜上皮、内皮和基质细胞体外培养，提供了简单高效经济的方法。     

不同胰酶消化方法用于制备猴胚肾细胞的评价

为了提高猴胚肾细胞的产量和质量,对生物制品生产中常规使用的四种细胞制备方法进行实验性评价,结果表明热消化法和冷消化法较适合于猴胚肾细胞的制备,冷消化法又优于热消化法,细胞产量高稳定性好,细胞活力强,上述两种方法也适合于幼兔肾和胎猴肺细胞的制备．     

猪前脂肪细胞增殖与分化的初步观察

从新生仔猪颈部皮下采集脂肪组织,用胶原酶Ⅳ消化分离前脂肪细胞,于37℃,5%CO2、饱和湿度下培养前脂肪细胞,通过MTT法、油红O染色及脂蛋白脂酶(LPL)活性测定对培养细胞进行鉴定.结果表明:培养3 d后,细胞增殖进入对数增长期,其生长曲线呈S形;分化的脂肪细胞内充满脂肪滴,细胞形态由梭形逐渐变为圆形;随着前脂肪细胞的分化,LPL活性显著下降.     

兔骨髓基质细胞的分离培养研究

目的分离培养兔骨髓基质细胞,观察其体外生长特性.方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离兔骨髓基质细胞,进行体外培养,传代扩增,测定其生长曲线,用相差显微镜、细胞化学染色观察细胞生物学性状及功能特点.结果密度梯度离心结合贴壁培养法可有效分离并且纯化兔的骨髓基质细胞.传代细胞均一性较好,呈纺锤形,细胞增殖快,加入地塞米松(Dxm 10-5 mmol/L),β-甘油磷酸钠(β-GP 2 mmol/L)、L-抗坏血酸(AA 50 mg/L)可诱导BMSCs分化为成骨细胞,von kossa法检测骨钙素阳性.结论体外培养的骨髓基质细胞生长稳定,增殖力强,可诱导分化.     

草菇子实体不同部位组织分离繁殖菌种研究

本文对草菇子实体的7个不同部位分别进行组织分离和繁殖菌种,通过现察、测定其细胞的形态、菌丝生长势、纤维素酶活性和利用不同世代的菌种,从多次栽培出菇和生物学效率比较试验,并经在生产实践上应用,研究表明以菌盖边缘部位作分离材料,能获得种质更优良的草菇种,提高草菇栽培的生物学效率.     

兔心房来源非心肌细胞的分离培养

建立一种兔心房组织来源的非心肌细胞体外培养模型,为心血管药理实验、病毒学实验及组织工程的研究提供实验平台.无菌条件下取兔心房壁组织,将组织分离成2 mm×1 mm小块,采用植块法以5行4列的形式种植于培养瓶中,加入M199或MEM培养基对兔心房组织进行原代培养.待长成单层时胰酶消化收集细胞,并进行传代培养和细胞冻存.该方法获得了大量活力良好的兔心房壁组织来源的非心肌细胞,倒置镜下观察细胞多呈短梭形,以及少量的三角形、柱形和卵圆形细胞,细胞核部位隆突,胞浆均匀清亮.经体外传代培养至16代,冷冻复苏以后,细胞仍生长良好.     

绵羊毛囊细胞分离培养的观察

应用0．25％与0．125％的胰酶分离绵羊毛囊细胞，获得2种不同形态的毛囊细胞；其次，对比分析了热消化法与冷消化法对分离毛囊细胞的影响，结果表明：热消化法优于冷消化法；同时，观察到新疆细毛羊与阿勒泰羊的毛囊细胞形态基本一致。     

威灵仙不同提取部位对脂多糖诱导的RAW264.7细胞NO生成及iNOS和TNF-α表达的影响

研究了威灵仙不同提取部位对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞NO生成及iNOS和TNF-α分泌的作用.通过ELISA方法检测25、50、100μg/mL的威灵仙不同提取部位对LPS(1μg/mL)诱导RAW264.7细胞产生NO、iNOS和TNF-α的影响;实时定量PCR方法检测威灵仙不同提取部位对LPS诱导iNOS和TNF-α基因表达的影响.结果表明,LPS能够明显诱导RAW264.7细胞产生NO、iNOS和TNF-α,威灵仙不同提取部位(25、50、100μg/mL)均能抑制其活性和基因表达,并呈现明显的剂量依赖性,其作用强弱依次为威灵仙乙酸乙酯部位、石油醚部位、正丁醇部位和水部位.因此得出,威灵仙不同提取部位的抗炎作用效果不同;抑制炎症因子的分泌和释放可能是威灵仙发挥抗炎作用机制之一.     

3种方法提取花锚不同部位的挥发性成分分析

采用索氏提取法(SE),同时蒸馏萃取法(SDE)和顶空固相微萃取法(HS-SPME)提取花锚不同部位(根、茎、叶、花)的挥发性成分,并运用GC-MS技术对所提取到的挥发性成分进行分析,同时结合NIST2012谱图库检索出其主要化学成分.分析结果表明,采用3种不同提取方法从花锚的根、茎、叶、花4个不同部位共分离得到69个挥发性成分.采用同一方法提取不同部位得到的主要挥发性成分大致相似,主要差异表现在含量上.不同方法提取的主要挥发性成分略有差异,SE法和SDE法提取的花锚不同部位的主要挥发性成分大致相同,主要是苯类、芥酸酰胺、酯类、酮类等,但其含量相差较大,而HS-SPME法提取的花锚不同部位的主要挥发性成分与SE、SDE法提取的挥发性成分存在明显差异,主要是醛类、酸类、酮类等.     

一种组织细胞图象的分割

自动、时实、计算机视学细胞追踪系统需要一种非常有效的细胞图象分割方式．通常一些文献介绍的分割算法在运用于未染色活细胞图象分析时,由于灰度变化和不均匀的光照等,显得非常虚弱．我们研究了分割的两步策略即：（１）选出含有细胞和一部分细胞周围背景的近似区域;（２）从这个区域内的背景中分割出细胞．这种方式能有效降低周围背景灰度和细胞区域上纹理的影响．实验结果表明这种方法作为细胞图象的分割时既快又省力．     

微重力细胞培养与组织工程

组织工程主要致力于组织和器官的形成和再生，其核心就是建立细胞与生物材料的三维复合体，形成具有生命力的活体组织，用于对病损组织进行形态结构和功能的重建并达到永久性替代。目前有关微重力和模拟微重力条件下细胞体外生长的研究提示微重力培养环境有利于细胞体外增生，维持有功能的细胞长期生长，并且有助于形成组织样结构，使培养得到的组织更接近于活体组织。因此微重力细胞培养为组织工程的研究开辟了新的前景。     

辽宁北票龙骨组织中类似血细胞结构的研究

在我国辽宁北票下白垩统义县组下部地层中出土的北票龙(Beipiaosaurus inexpectus)化石由部分椎骨和肢骨碎片构成,其中保存有血管和类似血细胞的结构。在肢骨周围有褐色细丝状的皮肤衍生物的印痕。细丝状皮肤衍生物无分枝,大约0.1mm宽,50～60mm长。在光学显微镜下观察到其肱骨的纵切面上有褐色血管结构,一些管腔中有褐色小圆球,它们沿着管腔分布。这些小圆球的形状和大小显示它们有可能是恐龙血细胞的遗迹。另外,图像分析法结果显示北票龙骨组织有较高的血管密度,表示它具有较高的新陈代谢率。从骨组织特征及作为体表隔热层的细丝状皮肤衍生物的存在来看,北票龙可能为恒温动物。     

In vitro differentiation of human adipose-derived mesenchymal stem cells into endothelial-like cells

The neovascularization of ischemic tissue is a crucial initial step for the functional rehabilitation and wound healing. However, there is lack of a potential source of cells for the foundation of a vascular network. The re- cent studies indicate that hum…     

人参组织和细胞培养研究进展

回顾人参组织和细胞培养研究的历史，介绍了人参组织和器官的离体培养、胚状体的诱导、毛状根的培养、花药的培养、原生质体培养、细胞培养、细胞的工业化生产的最新进展。     

DiI荧光标记示踪兔皮肤成纤维细胞修复前交叉韧带损伤的研究

体内采用组织工程方法构建前交叉韧带种子细胞筛选研究,提供了一种理想的细胞标记的方法.体外分离培养兔皮肤成纤维细胞(SF),比较皮肤成纤维细胞使用荧光染料CM-DiI体外标记前后细胞的生长状态、增殖活性以及检测SF复合纤维生物蛋白胶植入前交叉韧带上12周后的荧光表达情况.结果表明CM-Dil标记SF效果良好,标记阳性率高于95%.而标记前后SF增殖活性无明显变化,荧光标记在体内实验12周后仍有表达.从而证实CM-DiI是筛选前交叉韧带组织工程种子细胞筛选研究中细胞标记、示踪的良好标记物.     

水牛乳腺上皮细胞的体外培养

对水牛乳腺上皮细胞进行了原代培养，培养液由４０％的１９９、４０％的ＤＭＥＭ加２０％的犊牛血清组成。乳腺组织块接种在铺有鼠尾胶原的培养瓶中，在ＣＯ＿２培养箱中３７℃封闭培养一周后，可分生出多边形单层上皮细胞，培养过程中，成纤维细胞逐渐减少，二周后呈现以上皮细胞为主的不规则生长区域。在培养２５天的单层上皮细胞中，出现拉网（ｎｅｔｔｉｎｇ）结构。以上结果表明，利用乳腺组织块在体外培养可获得较纯的单层乳腺上皮细胞。     

壳聚糖植入兔角膜的生物学反应

目的：探讨壳聚糖植入兔角膜的生物相容性，以评价其作为人组织工程角膜材料的可行性。方法：将壳聚糖材料制成的膜植入新西兰兔角膜的板层内，进行裂隙灯观察并进行组织病理学检查。结果：术后1周有结膜睫状充血，角膜水肿；2周后充血水肿逐渐消失。兔眼的情况稳定，术后2周角膜半透明；术后8周新生血管消退，材料与角膜的生物相容性好，材料部分吸收溶解，角膜透明。电镜超微结构检查可见兔角膜标本中材料内有角膜基质细胞长入，细胞胞浆较多，细胞器丰富，有大量的新生胶原。结论：壳聚糖与角膜组织具有良好的生物相容性，且能自然溶解吸收，可用作组织工程角膜的载体材料。     

三十烷醇对无菌苗生根及愈伤组织细胞繁殖的影响

通过对三十烷醇在无菌苗及愈伤组织细胞培养中的试验,得出三十烷醇对植物的生根及愈伤组织细胞的繁殖具有促进作用。     

植物细胞工程进展

概要介绍了植物细胞工程的主要分支学科及其研究进展。包括原生质体培养、细胞融合与体细胞杂交、胚胎培养和试管受精、组织和细胞培养生产有用物质、单倍体育种、体细胞无性系变异、细胞突变体的筛选、植物快速繁殖技术、体细胞胚胎发生和人工种子、组织细胞培养物的超低温保存以及转基因植物等。