化学发光酶免疫分析法测定血清前列腺特异性抗原的研究

目的建立化学发光酶免疫分析法测定血清前列腺特异性抗原,用于临床前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎患者病情的监测和预后.方法化学发光酶免疫分析法(CLELA)采用辣根过氧化酶(HRP)-鲁米诺竞争法.结果该方法的灵敏度为0.01μg/L,在0.5～80μg/L的范围内线性良好.CLEIA测定血清前列腺特异性抗原的批内、批间与日间变异系数分别为5.0%,4.97%和4.93%.在血红蛋白浓度<2.4g/L、总胆红素浓度<342μmol/L、甘油三酯浓度<9.9mmol/L时的干扰率无临床意义.与放射免疫分析法有较好的相关性(r=0.9472).结论CLEIA法测定血清前列腺特异性抗原能及时有效地满足前列腺癌、前列腺增生、前列腺炎患者的临床需要,有助于进一步对检测试剂盒的研制.     

胰岛素化学发光免疫测定法的建立

目的建立化学发光免疫法测定胰岛素及临床糖尿病患者胰岛素治疗跟踪与稳定性的可行性评估.方法 CLIA采用竞争法.结果该方法的灵敏度为1.24 mIU/L,在2.5～160 mIU/L的范围内线性良好.CLIA测定胰岛素的批内与日间变异系数分别为3.05%,4.61%和4.80%,4.92%.在血红蛋白浓度<2.4 g/L、总胆红素浓度<342 μmol/L、甘油三酯<9.9 mmol/L时的干扰率无临床意义.与放射免疫分析法有较好的相关性(r=0.915 6).结论 CLIA法测定胰岛素能及时有效地满足糖尿病患者的临床需要,有助于进一步对检测试剂盒的研制.     

AOZ化学发光酶联免疫检测试剂盒的研制

以呋喃唑酮代谢物(AOZ)和卵清蛋白(OVA)偶联物为包被抗原,与AOZ样品或标准品竞争呋喃唑酮多克隆抗体,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗兔抗体(IgG),研制AOZ的化学发光酶联免疫检测试剂盒。以鲁米诺-过氧化氢为发光底物进行化学发光酶联免疫检测。结果表明:试剂盒分析灵敏度为0.005μg/L,比传统的ELISA试剂盒高出一个数量级,拥有更低的检测限,批内变异系数为2.1%～7.9%,批间变异系数为5.2%～9.5%,批内回收率为93%～113%,批间回收率为94%～110%。与呋喃西林代谢物(SEM)、呋喃它酮代谢物(AMOZ)及呋喃妥因代谢物(AHD)之间无明显交叉反应。此试剂盒可用于水产品中AOZ的检测。     

不同厂家试剂盒检测人血清乙肝表面抗体浓度值相关性分析

目的:分析不同厂家试剂盒检测乙型肝炎病毒表面抗体浓度值差异,并探讨用化学发光法检测表面抗体浓度值对乙肝疫苗注射效果监测的意义。方法:选取中国生物制品检定所提供的国家参比品3份,国家临检中心质控品2份,表面抗体混合阳性稀释标本2份,特殊模式血清4份,表面抗体有反应性的血清39份,分别用雅培(Architect)全自动化学发光试剂、罗氏(Roche2010)全自动电化学发光试剂、安图生物化学发光试剂盒和化学发光仪测定乙型肝炎病毒表面抗体浓度。结果:不同厂家试剂盒检测表面抗体浓度存在一定的偏差,但相关性良好(相关系数R>0.95)。结论:由于化学发光法做为一种高灵敏、高特异、高准确的定量检测方法,定量检测表面抗体对评估乙肝疫苗注射效果的监测具有重要的意义。     

黔金丝猴血清TEST与E2放射免疫测定

报道黔金丝猴血清睾酮（TEST）与血清雌二醇（E2）放射免疫测定。采用贵州梵净山自然保护区管理局野生动物救护中心饲养3年的5只黔金丝猴，取下肢静脉血，采用中美合资九鼎医学生物工程有限公司生产的血清睾酮免疫测定试剂盒、血清雌二醇免疫测定试剂盒，对黔金丝猴及藏酋猴分别进行体外双抗体放射免疫测定（RIA）。结合野生动物救护中心野外调查资料和饲养资料，分析其TEST和E2浓度与龄阶、性别、在种群中所处等级、和发育状况的关系。     

非抗体结合蛋白-抗体组合的GPC3双夹心化学发光法在临床的初步应用

目的:探讨非抗体结合蛋白-抗体双夹心化学发光免疫诊断试剂检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)在肝细胞癌(HCC)血清学的临床诊断价值和鉴别诊断价值.方法:应用本课题前期研制的非抗体结合蛋白-抗体GPC3夹心化学发光法诊断试剂检测HCC、肝内胆管癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、正常人群等患者血清GPC3水平,同时用GPC3免疫组织化学(IHC)检测上述疾病患者的肿瘤组织,同时分析甲胎蛋白(AFP)和本实验方法对HCC的诊断效能,进一步分析GPC3表达于不同细胞结构部位与血清水平关系.结果:非抗体结合蛋白-抗体GPC3双夹心化学发光试剂盒检测HCC组GPC3血清水平明显高于其他组(21倍,P值均小于0.01),与GPC3 IHC结果相一致.联合GPC3和AFP的曲线下面积(AUC)为0.922,明显高于单一标志物(GPC3和AFP的AUC分别为0.899和0.821,P值均小于0.05)的诊断价值.GPC3主要表达于胞膜和混合表达(胞膜和胞质),且所有胞膜和混合表达阳性患者血清样本的GPC3均高水平表达.结论:非抗体结合蛋白-抗体GPC3双夹心化学发光试剂盒具有良好的诊断特异性及准确性,有可能用于HCC的鉴别诊断,且对分析GPC3胞膜型HCC的诊断、疗效评价及预后提供更多诊断价值信息.     

猴免疫缺陷病毒(SIV)双抗原夹心ELISA诊断试剂盒的研制及应用

目的研制灵敏、特异的检测血清中猴免疫缺陷病毒(Simian Immunodeficiency Virus,SIV)的双抗原夹心ELISA(dsELISA)诊断试剂盒并进行初步应用。方法采用原核表达系统表达并纯化的人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)包膜蛋白(gp41)作为包被用抗原,建立dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂,研制ELISA诊断试剂盒,经敏感性、特异性和重复性试验考核试剂盒的质量,并与美国BIORELIANCE公司试剂盒进行比较,将结果经美国VRL验证,判断本试剂盒与美国BIORELIANCE公司试剂盒两者之间的符合率。结果该试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和准确性。4℃条件下能保存8个月,与其他血清无交叉反应,与美国BIORELIANCE公司试剂盒检测结果的符合率为96%。结论研制成功的实验猴SIV ELISA检测试剂盒可用于临床检测。     

恶性疟原虫/间日疟原虫胶体金法快速检测试剂盒稳定性及特异性评估方法研究

为评价自制恶性疟原虫/间日疟原虫胶体金法快速检测试剂盒的稳定性及特异性,采用自制试剂盒与市售试剂盒对全血参考品进行分析性能评估、交叉干扰物的影响评估、稳定性评估及临床应用效果评估实验。结果显示,自制试剂盒具有较好的检测性能、对不同干扰物的检测未出现交叉反应影响,自制试剂盒具有较好的实时稳定性,自制试剂盒与市售试剂盒具有同样的临床效果。     

禽流感病毒通用型荧光定量PCR检测试剂盒比对结果分析

对6种禽流感病毒通用型荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction),PCR检测试剂盒进行比对与科学评价,为实验室采购提供依据。利用禽流感病毒H5、H7、H9亚型标准品,鸡新城疫活疫苗与传染性支气管炎活疫苗对市售的6种品牌(分别记为A、B、C、D、E、F)禽流感病毒通用型荧光定量PCR检测试剂盒灵敏性与特异性进行了比对,并对97份临床样品进行了检测,筛选出禽流感病毒通用型最佳检测试剂盒。结果表明:A厂家试剂盒最低可检出1:100倍稀释的H7亚型标准品浓度,B厂家试剂盒最低可检出1:1倍稀释的H7亚型标准品浓度,C厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,D厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,E厂家试剂盒最低可检出1:1 000倍稀释的H7亚型标准品浓度, F厂家试剂盒最低可检出1:10倍稀释的H7亚型标准品浓度,6种试剂盒特异性均良好。综上,E厂家试剂盒优于其他厂家试剂盒,可以作为动物疫病检测实验室在实施监测任务中的首要选择。     

免疫学与生化方法检测C反应蛋白相关性分析

为比较酶联免疫双抗体夹心法与生化免疫比浊法在检测C反应蛋白方面的差异,并进行相关性分析,分别利用4个厂家酶免方法的超敏C反应蛋白试剂盒(HS-CRP)和1种生化方法的普通C反应蛋白(CRP)作为考核试剂盒,选择21例低中高值样本,采用双盲法与参比试剂盒做临床平行比对并进行相关性分析.结果表明,与参比产品相比,免疫学方法检测HS-CRP具有高度相关性,并且有较好的检测低限.得出免疫学与免疫比浊法试剂盒有较好的临床相关性,能较好的满足国际上心血管事件风险评估新标准规定的1 mg/L以下为低风险区的检测需要的结论.     

C-肽化学发光免疫测定法的建立

目的建立化学发光免疫法,测定C-肽及临床糖尿病患者胰岛素治疗跟踪与稳定性的可行性评估.方法 LEIA抗原竞争法.结果 CLIA测定C-肽的批内与批间变异系数分别为4.2%和5.0%.结论 CLIA法测定C-肽能及时有效地满足糖尿病患者的临床需要.     

基于RIA的富媒体播放组件的设计与实现

多媒体在网络中的应用越来越广,然而现有的技术很难达到视频、音频、图片与文字的完美结合.该文采用RIA设计模式,使用FLASH结合XML,JSP,数据库等技术,设计并实现了一个通用的B/S架构下的富媒体播放组件(RM-Player),用于解决上述问题.经实际应用,取得了良好的效果,证明是一种可行的办法.     

RIA技术特性及发展趋势

对RIA（丰富互联网应用程序）的定义、产生背景和主要特性进行了介绍，RIA具有Web应用程序和具有桌面应用程序的特点，并对目前出现的几种比较有实力的RIA客户端开发技术进行了论述，最后阐述了RIA的发展趋势。     

基于AJAX的富客户端应用内存泄漏研究

在基于AJAX技术的富客户端应用中,闭包循环引用是一种非常隐蔽的循环引用。而由于IE浏览器对DOM对象和JavaScript对象在内存管理上的缺陷,造成在实际应用中很容易出现严重的内存泄漏问题。结合担保业务处理系统中的"档案提交/退档"模块核心代码,深入分析了造成IE浏览器内存泄漏的原因,提出了有效解决这种内存泄漏问题的方案,这对基于AJAX技术的富客户端应用开发,有很好的借鉴作用。     

采用RIA技术构建的应急GIS系统

GIS是应急管理软件中一个重要的支撑平台,并渗透到应急管理的全过程。分析了传统GIS领域存在的主要问题,探讨了RIA(富互联网应用)技术和主流RIA技术Flex。提出了基于RIA技术构建应急GIS系统的思路。在此基础上开发了基于Flex的应急GIS原型系统。系统运行结果证明,基于RIA技术的应急GIS系统具有功能强大的前端处理能力、高度的互操作性,提高了空间数据的分析与处理性能、改善了用户体验。     

Met-enkephalin circulates in human plasma

The physiological roles of Met-enkephalin and Leu-enkephalin are still unknown. They may act as neurotransmitters in the central and peripheral nervous systems. Met-enkephalin has been detected in several species in a variety of tissues including brain, spinal cord and gut using bioassays, opiate receptor assays and radioimmunoassays (RIA). It has also been detected in human gut immunocytochemically and in human brain and cerebrospinal fluid by opiate receptor assay and RIA. However, all reported assays show some degree of cross-reaction with Leu-enkephalin and unequivocal differentiation between the two enkephalins and the larger endorphins has not always been possible. Thus the existence of Met-enkephalin in human tissues and fluids remains in doubt. Using a highly specific RIA, we have now obtained evidence that Met-enkephalin-like material circulates in the plasma of normal subjects and may be secreted by the adrenal gland. Chromatographically the material exists in plasma mainly as the intact pentapeptide and not as the biologically inactive degradation product Gly-Gly-Phe-Met as would be expected from metabolic studies.     

水产品中环境雌激素特性及检测技术研究进展

环境雌激素会干扰生物体内雌激素的正常分泌,使生物体的生殖功能或免疫功能出现异常。环境雌激素可以分为合成雌激素、生物源雌激素和环境化学污染物,检测方法主要有气相色谱（GC）法、高效液相色谱（HPLC）法、气相色谱-质谱联用（GC-MS）法、化学发光免疫分析（CLIA）法、分子印迹（MIT）法。目前,我国对环境雌激素的研究...     

Compartmentalized calcium dynamics in a C. elegans interneuron encode head movement

The confinement of neuronal activity to specific subcellular regions is a mechanism for expanding the computational properties of neurons. Although the circuit organization underlying compartmentalized activity has been studied in several systems, its cellular basis is still unknown. Here we characterize compartmentalized activity in Caenorhabditis elegans RIA interneurons, which have multiple reciprocal connections to head motor neurons and receive input from sensory pathways. We show that RIA spatially encodes head movement on a subcellular scale through axonal compartmentalization. This subcellular axonal activity is dependent on acetylcholine release from head motor neurons and is simultaneously present and additive with glutamate-dependent globally synchronized activity evoked by sensory inputs. Postsynaptically, the muscarinic acetylcholine receptor GAR-3 acts in RIA to compartmentalize axonal activity through the mobilization of intracellular calcium stores. The compartmentalized activity functions independently of the synchronized activity to modulate locomotory behaviour.     

RIA及其基于Flex的应用开发模型

介绍了RIA的产生、发展及优点,阐述了基于Macromedia Flash/Flex开发RIA应用的框架与方法,对RIA的应用前景作了展望。     

基于FLV流媒体技术的视频会议系统设计

为了探讨新的计算机技术在教学中的应用,提高教学质量,采用开源的Red5流媒体服务器,结合Flex RIA(Rich Internet Applications）技术,Spring2框架和Cairngorm微架构技术工具,设计了J2EE（Java 2 Platform Enterprise Edition）架构下的基于FLV（Flash Viedo）流媒体技术的视频会议系统,并在应用中取得了较好的效果。