新型硫脲基磷酰胺酯类化合物对植物病毒的QSAR研究

我们首次合成了硫脲基氮芥磷酰胺及其衍生物,并发现它们具有良好的抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)活性。为进一步了解分子结构与活性关系,以寻找更高活性的抗植物病毒剂,我们采用回归分析方法研究了新合成的硫脲基磷酰胺酯类化合物的结构变化与抗烟草花叶病毒活性的关系。结果表明取代基的偶极矩参数DP对活性有重要影响,并对新设计的13种化合物的抗TMV活性进行了大致的预测。     

抗烟草和黄瓜花叶病毒的双价抗病毒工程烟草

利用植物基因工程方法培育表达病毒外壳蛋白(CP)基因的抗病毒转基因植物已在烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、苜蓿花叶病毒(AMV)、马铃薯病毒X(PVX)等多种植物病毒中获得成功,正成为植物抗病育种的新手段。我们前已培育成功表达TMV(中国流行株)CP基因的抗TMV侵染的烟草。在我国烟草生产     

从烟草上分离的中国番茄黄化曲叶病毒及其卫星DNA的全基因组结构特征

从我国云南省红河地区表现曲叶症状的烟草上分离到病毒分离物Y8, Y36和Y38. 用14种针对双生病毒粒子的单克隆抗体进行三抗体夹心ELISA测定, 结果表明, 病毒分离物Y8, Y36和Y38的抗原表位型与中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)相似. 对Y8, Y36和Y38基因组DNA-A全序列进行了分析, 其全长分别为2727, 2730和2730个核苷酸, 均编码6个ORFs, 其中病毒链编码AV₁(CP)和AV₂两个ORFs, 互补链编码AC₁~AC₄四个ORFs. DNA-A全序列、基因间隔区核苷酸序列及各ORF编码的氨基酸序列比较分析表明, Y8, Y36和Y38均属于TYLCCNV. 从病株Y8, Y36和Y38中还分离到一类卫星DNA分子(DNAb), 全长分别为1338, 1339和1338个核苷酸. 3个DNAb分子的核苷酸全序列的同源性为98%~99%, 且互补链上均含有编码126个氨基酸的C1 ORF.     

黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因的cDNA克隆和全序列测定及比较

近年来,植物基因工程技术的迅速发展为培育抗病毒植物提供了一条新的途径。Powelf等人将编码烟草花叶病毒(TMV)外壳蛋白的基因加上植物基因启动子,并导入烟草细胞中使之表达,首次获得了可以抵抗TMV的转基因烟草和番茄。随后,人们用类似的方法分别获得了可以抗黄瓜花叶病毒(CMV)、苜蓿花叶病毒、马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)的烟草、番茄、马铃薯等,成为目前培育抗病毒植物的一条很重要的途径。     

从云南分离的烟草曲顶病毒为菜豆金色花叶病毒属的一个新种

从我国云南省保山地区烟草上表现曲顶症状的植株上分离获得病毒分离物Y1,经粉虱传毒及粒子形态观察,证明为菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus）病毒,用14种单克隆抗体进行三抗体夹心ELISA测定,结果表明Y1与我国及巴基斯坦、印度等国报道的双生病毒的抗原表位型均不同,对Y1基因组DNA-A的全序列进行了分析,全长2746个核苷酸,其中病毒链含有两个ORF,互补链含有4个ORF,Y1与其他双生病毒基因组DNA-A全序列、基因间隔区序列及各ORF编码的氨基酸序列的比较分析表明,Y1是一种新的Begomovirus病毒,定名为烟草曲顶病毒,英文名为Tobacco curly top virus,简称TCTV,TCTV全基因组与印度报道的番茄曲叶病毒和番木瓜曲叶病毒的同源性最高,达85%,而其CP基因与巴基斯坦棉花曲叶病毒分离物72b高度同源,氨基酸水平的同源性达98%。     

长叶车前花叶病毒蛋白亚基不同聚集形态对抗原专化性的作用

植物病毒外壳蛋白,具有向病毒粒体或向相同蛋白形态部分聚合的性质。为研究烟草花叶病毒(Tobacco Mosaic Virus,TMV)蛋白亚基不同聚集形态的抗原专化性,Van Regenmortel用琥珀酰酐(Succinylation)处理病毒外壳蛋白从而使蛋白亚基保持单体状态的。后来,他又指出琥珀酰酐的处理,虽使蛋白亚基保持单体状态,但却改变蛋白质的抗原专化性,因而使实     

单克隆抗体制备的一种特异电融合方法研究

常规制备单克隆抗体(McAb),一般采用的都是非特异融合方法,这就导致(1)分泌特异性抗体的杂交瘤阳性率不高、筛选工作量大;(2)不易得到高亲和力的McAb。近年来,Lo等和Wojchowski等发展了生物素-抗生物素-抗体-抗原介导的特异电融合,克服了上述缺点。然而,该方法较繁琐,不宜推广应用。我们用双功能连接剂将抗原直接挂到骨髓瘤细     

抗CD20嵌合Fab′片段对B淋巴瘤细胞的生长抑制作用

利用PCR方法从抗CD20ScFv表达载体上扩增重链可变区(VH)、轻链可变区(VL)基因,然后将VH,VL基因重组到Fab′表达载体中,构建成抗CD20嵌合抗体Fab′片段表达载体pYZFcd20.用pYZFcd20转化大肠杆菌16C9,在16C9菌中分泌表达可溶性抗CD20Fab′片段,经分离纯化获得具有CD20抗原特异结合活性的嵌合抗CD20抗体Fab′片段.竞争性免疫荧光抑制实验表明,抗CD20Fab′片段能竞争性抑制亲本鼠源性抗CD20单克隆抗体HI47和Daudi细胞CD20结合.MTT法测定结果显示,抗CD20Fab′对Daudi细胞生长具有抑制作用.     

我国十省(市)十字花科蔬菜芜菁花叶病毒(TuMV)株系分化研究(Ⅱ)——新鉴别寄主筛选及株系划分

作者曾分别用Provvidenti和Green的芜菁花叶病毒(TuMV)株系鉴定谱,对我国十省(市)的TuMV主流分离物进行鉴定和归类,除确认C_1、C_4、C_5等3个株系外,尚有2类分离物不能按该标准归类。作者认为,我国十字花科蔬菜资源十分丰富,栽培地域广阔,生态地理差异显著,Provvidenti和Green鉴别寄主谱不能完全反映其实际差异,乃是合乎常理的。因此,根据我国的实际情况,寻求筛选新的鉴别寄主,并进行株系划分方法研究,甚属必要。本文是这方面研究工作的初步总结。     

芜青花叶病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及对7个株系抗原决定簇的分析

从50年代起,国内外对芜青花叶病毒(TuMV)的株系分化进行过许多研究,但大多是就局部地区的分离物进行鉴定,且是依据以鉴别寄主为主的生物学方法而确定株系的。李彦勇曾用ELISA方法对来自不同国家和地区的TuMV分离物(包括中国的2个)的血清学关系做了比较。国家蔬菜抗病育种攻关协作组在国内十个省市的十字花科蔬菜上采病样7982     

青蒿素衍生物的合成

青蒿素(Ⅰ)是我国科学工作者近年来从中药青蒿(菊科植物黄花蒿Artemisia annua L.)中分离得到的具有新型化学结构的抗疟药。几年来的临床试验证明,青蒿素对治疗各类型疟疾具有速效、低毒等优点,并对治疗抗氯喹疟原虫株病人有效;不少地区已将青蒿素作为抡救凶险型疟疾病人的首选药物。其主要缺点是近期复燃率较高,为了寻找疗效好、复燃率小的新化合物,我们对青蒿素进行了一系列的结构改造。     

东亚钳蝎毒中一个软瘫型抗昆虫神经毒素(BmK IT2)的初级结构研究

蝎抗昆虫神经毒素根据分子大小可分为长链(含约61或70个氨基酸残基)和短链(含约35个氨基酸残基)两大类,而前者又可根据作用效应的不同分为挛缩或软瘫两种类型.前文我们曾陆续报道了东亚钳蝎(Buthus martemsi Karsch)毒中一个挛缩型抗昆虫毒素(BmK IT)的分离及其初级结构以及一个alpha型(BmK αIT)和4个软瘫型抗昆虫毒素(BmKIT2至IT5)的纯化与鉴定.本文将进一步报道有关其中一个属软瘫型毒素(BmK IT2)氨基酸序列的测定分析结果.     

人参果中达玛烷型皂甙的研究——一对构型异构体的分离与鉴定

人参果为五加科植物人参(Panax,ginseng C.A.Meyer)的成熟果实。近年来的药理实验结果表明,人参果皂甙不但有一些和人参根皂甙相似的药理活性,如抗疲劳、抗缺氧等作用,而且还有其某些独特的药理活性,如抗高胆固醇引起的动脉粥样硬化等作用。因此,对人参果中达玛烷型皂甙进行了研究。从人参果中分离出8种单体皂甙,其中人参果甙-VI(GF-VI)和     

抗CD20嵌合Fab′片段对B淋巴瘤细胞的生长抑制作用

利用PCR方法从抗CD20ScFv表达载体上扩增重链可变区（VH）、轻链可变区（VL）基因,然后将VH,VL基因重组到Fab′表达载体中,构建成抗CD20嵌合抗体Fab′片段表达载体pYZFcd20。用pYZFcd20转化大肠杆菌16C9,在16C9菌中分泌表达可溶性抗CD20Fab′片段,经分离纯化获得具有CD20抗原特异结合活性的嵌合抗CD20抗体Fab′片段。竞争性免疫荧光抑制实验表明,抗CD20Fab′片段能竞争性抑制亲本鼠源性抗CD20单克隆抗体HI47和Daudi细胞CD20结合。MTT法测定结果显示,抗CD20Fab′对Daudi细胞生长具有抑制作用。     

心兴奋肽在文昌鱼神经系统中的分布:免疫组织化学的研究

心兴奋肽(cardioexcitatory neuropeptide,FMRFamide)是从一种蛤子(Maorocallista nimbosa)的神经节中分离得到的。它是由苯丙-甲硫-精-苯丙酰4种氨基酸所组成的神经肽,现已人工合成。它可影响软体动物的心脏节律和蜗牛触角的收缩,并对无脊椎动物的神经元有复杂的影响。新近有证据认为,FMRFamide可能作为一种内源性抗阿片样物     

华南沿海沙堤的年代学研究

华南沿海沙堤十分发育,从闽南至粤、琼、桂四省(区)的海岸多有分布。笔者对百余列沙堤进行了观察,采样,选择了64个样品作年代测定,并收集了前人的35个年代数据,进行了分析研究。试样包括下伏在沙堤之下及沙堤、泻湖内的泥炭、腐木、淤泥、贝壳、珊瑚、海滩岩、贝屑砂岩(作~(14)C测年)以及陶片、石英砂(作热释光测年)。现将该71列沙堤的66个样品年代列如表1,其分布绘成图1。     

人和猪SRBC受体的比较研究

以兔抗猪SRBC受体抗血清IgG为配基制备的亲和层析柱分离人血清受体(样品1)和猪血清受体(样品2)以及以兔抗人SRBC受体抗血清IgG为配基制备的亲和层析柱分离人血清受体(样品3)和猪血清受体(样品4)四种样品,它们都能提高因45℃     

小麦抗条锈病基因Yr10的AFLP标记

以抗条锈病基因Yr10的供体亲本Moro作参照,用6个Pst I端引物和10个Taq 1端引物对抗条锈病基因Yr10的近等基因系和轮回亲本Avocet S进行了AFLP分析,共扩增出约4200条可分辨的带,其中5条为稳定的差异带,用Yr10基因的供体亲本Moro和感病品种铭贤169要交产生的F2代分离群体,对5个特异条带与目的基因的遗传连锁性进行了初步分析,发现特异条带TP0502与Yr10基因连锁,将该片段进行克隆,测序,根据其序列设计了PCR特异扩增用专化引物,经用195株F2代分离株进行遗传连锁性分析表明,用所设计的引物进行PCR,其主要产物SC200片段与抗条锈病基因Yr10的连锁距离为0．5cM,可用于该基因的快速,有效,准确检测。     

一个水稻P450 CYP72A基因簇受病原菌诱导和发育及组织特异性表达

细胞色素P450超基因家族广泛参与植物的各类生命活动,包括植物对病原菌的防卫反应.我们在植物病原菌诱导基因的DD-PCR分析时,分离到一个受病原菌侵染诱导的水稻cDNA片段.水稻基因组公布后,发现该片段位于1个包含7个P450 CYP72A基因(CYP72A17～23)的基因簇的保守部分.以此片段搜索水稻数据库发现,水稻CYP72A家族有14个成员,这14个蛋白质之间的差异主要在N端,C端则同源性很高.我们分别对该基因簇的7个成员进行了表达特性分析,发现其中CYP72A18,19,22和23的表达受稻瘟病菌侵染的调节,而且在抗、感植株中的表达存在明显差异.除CYP72A20外,其余6个CYP72A基因均具有发育和组织特异性表达的特征.CYP72A20在所有研究中均检测不到信号,可能为一个假基因.这些发现为水稻P450基因功能的研究提供了新的资料.     

红细胞天然免疫主干道理论与现代系统免疫学

系统生物学理论指导现代免疫学向系统免疫学方向发展,而红细胞免疫学发展所形成的红细胞天然免疫主干道理论,即血液免疫反应路线图理论所认为的血液免疫反应有4个要素:抗原、血浆、红细胞、白细胞,又符合系统论思想,为开展系统免疫学研究提供了理论依据。研究发现,抗原性细胞(如灭活的酵母菌和S180癌细胞)可激活一系列血液免疫反应,发生各种免疫指标和相关其他生化指标有规律性的变化,在此基础上构建了符合整体论的抗原、血浆、红细胞、白细胞4个要素的自然实验体系和符合还原论的分离的缺血浆或红细胞要素的分离体系,统称“自然与分离体系”,该体系符合系统生物学对仿真实验体系的整体性、有序性、动态性和目的性的要求。通过还原论与整体论相结合原则构建的“自然与分离体系”,可对海量数据进行横向与纵向综合分析研究。