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相似文献
 共查询到20条相似文献,搜索用时 46 毫秒
1.
人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)cDNA重组在表达质粒pDR720中。在E.coliC600中获得了表达,表达水平为2%。以醋酸锌显色PAGE凝胶回收t-PA表达条带,进行复性处理。复性产物经Benzamidine-Sepharose4B,Lysine-Sepharose4B亲和层析,纯化得到SDS-PAGE银染一条带纯度,比活为4,000mol/s·g的人t-PA。  相似文献   

2.
将插入pBluescribe的人红细胞生成素受体cDNA,用EcoRI和BamHI酶解,分离得到的基因片段,插入到经EcoRI和RamHI消解的表达载体pGEX-3X中,得到重组表达质粒pGEX-3X/hEPOR。重组质粒pGEX-3X/hEPOR含有tac启动子,EPOR膜外结构域基因5端与谷胱甘肽转移酶(GST)编码基因融合,阳性重组子在大肠杆菌中经IPTG诱导表达GST-hEPOR,重组表达菌裂解上清液经GSH-Sepharose4B亲和柱一步纯化,能除去绝大部分杂蛋白,基本达到纯化的效果。SDS-PAGE和免疫杂交分析显示,重组表达产物确系人红细胞生成素受体  相似文献   

3.
花椰菜凝集素由花蕊组织经生理盐水抽提、硫酸铵沉淀和SephadexG-100、Sepharose-4B凝胶层析纯化获得.PAGE鉴定和高碘酸-Schiff试剂反应均显单一条带,说明该凝集素为纯化的糖蛋白.经SephadexG-200柱过滤分析,其相对分子质量约为94000.SDS-PAGE分析表明该凝集素含有4个亚基,其相对分子质量分别约为28000、25000、22000和20000.花椰菜凝集素经50℃处理5分钟仍保持高的凝集活性,该凝集素对酸处理较碱处理稳定.  相似文献   

4.
含抗人尿激酶单克隆抗本的腹水经ProteinA-SepharoseCL4B纯化得到IgG纯品,分子量为150KD,与CNBr-Sepharose4B偶联制成抗人尿激酶单克隆抗体-Sepharose4B亲和层析介质。  相似文献   

5.
含抗人尿激酶单克隆抗体的腹水经ProteinA-SepharoseCL4B柱纯化得到IgG纯品,分子量为150kD(重链55kD,轻链20kD),与CNBr-Sepharose4B偶联制成抗人尿激酶单克隆抗-体-Sepharose4B亲和层析介质。尿激酶粗品经单抗-Sepharose4B亲和层析柱纯化后,所得尿激酶制品比活为9×10-4~1.7×10-3mol/s·mg-1,纯化倍数为15~30倍,酶活性回收率在50%以上。  相似文献   

6.
用PCR方法获得大肠杆菌二硫键异构酶DsbA的编码基因dsbA和大肠杆菌脯氨酸异构酶PPIaseA的编码基因rot,并将DsbA和rot以双顺反子形式克隆至含有Ptac启动子的表达载体pKK233-2中。在IPTG的诱导下,DsbA和PPIaseA获得了表达。SDS-PAGE和薄层扫描分析表明:DsbA、PPIaseA的表达水平分别为占菌体裂解上清液总蛋白质的4.32%和4.06%。  相似文献   

7.
利用聚合酶链式反应(PCR)方法,以IGF-IcDNA为模板,扩增IGF-I的基因。在序列测定确证后,将其定向克隆到载体pExSecI上,构建了IGF-I融合表达载体pExIGF,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明:含有重组表达质粒的菌株可表达出约32.58%的26KD融合蛋白,且主要以可溶性形式存在。经IgG-Sepharose亲和层析一步纯化后,可获得纯度约90%的融合蛋白,经Western-Blot分析,免疫学活性呈阳性反应。  相似文献   

8.
采用DEAE,S-SepharoseF·F离子交换层析,ConA-Sepharose,HeparinSegharose亲和层析,从110例妊娠3~8周早孕妇女混合静脉血清中提取,纯化早孕因子(EPF)。以玖瑰花结抑制试验(Ea-RIT)检测孕血清及各阶段提取物的EPF活性,盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其纯度.结果表明提取,纯化的EPF达电泳纯,在国内尚未见报导。  相似文献   

9.
利用聚合酶链式反应(PCR)方法,以IGF-IcDNA为模板,扩增IGF-I的基因,在序更测定确证后,将其定向克隆到载体pExSecl上,构建了IGF-I融合表达载体pExIGF,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明:含有重组表达质粒的菌株可表达出约32.58%的6KD融合蛋白,且主要以可溶性形式存在。经IgG-Sepharose亲和层析一步纯化后,可获得纯度的90%的融合蛋白,经Wes  相似文献   

10.
将人肿瘤坏死因子受体Ⅰ(hTNFRI)死亡域基因克隆在氯霉素乙酰转移酶(CAT)的后面,构建成重组表达质粒pLT10 CATLDd.该融合蛋白基因转化大肠杆菌后发酵,IPTG诱导2 h,SDS-PAGE测定CATLDd 蛋白质的分子质量为39 ku.Western 印迹实验进一步作了鉴定.表达产物为包涵体.CATLDd 蛋白质经Q-Sepharose 柱层析后纯度大于95% .  相似文献   

11.
本文应用硬软酸碱原理,对有机硼和有机硅的反应选择性进行了园满的解释和预测。  相似文献   

12.
乙醛酸及其钠盐、钙盐的制备和分离   总被引:9,自引:0,他引:9  
本文介绍了在少量浓盐酸及亚硝酸钠存在下,用硝酸氧化20%乙二醛制备乙醛酸及其钠盐、钙盐的方法。乙醛酸产率为75—80%。用氢氧化钙粉末将反应混合液调节在不同的pH范围内,草酸钙(pH1.0~1.5)和乙醛酸钙(pH2.5~3.0)便接近定量析出。再先后用氫型和钠型离子交换树脂处理乙醛酸钙,可分别制得较纯的乙醛酸溶液和乙醛酸钠固体。该制备和分离方法具有简便、经济和得率较高的优点。  相似文献   

13.
本文对单纯形和单位正方形上的两种二元算子进行了推广,同时又引进了二元Mever-Konig-Zeller型算子及其推广形式,关讨论了它们的性质。  相似文献   

14.
论述了对雷电现象观测和研究的方法、手段,分析了观测和研究的结果,指出了对雷电研究的重要性及光辉前景.  相似文献   

15.
建立了最佳多项式逼近和Meyer—Konig—Zeller算子之间的弱型不等式,并由此刻划一种新型的Besov空间.  相似文献   

16.
介绍了一种新型声 -振动测量分析系统的研制方法 .设计虚拟式结构 ,精简硬件 ,开发多功能软件 ,整个系统精度高 ,实时性好 ,声学测量最低限达 1 6 d B(A) .特别适用于声压级、声功率级等声学测量以及声学和振动的各种谱分析 ,具有广阔的应用前景  相似文献   

17.
逆冲断层或滑脱构造和上盘岩层的褶皱、断层构成有规律的组合和配置,提供了运用浅表构造揭示隐伏断层的可能性。本文利用浅表构造对隐伏断层进行三方面的预测:通过特征性构造推测隐伏逆冲断层和滑脱构造的存在;据不同类型的构造及其空间分布规律预测隐伏断层的产出状态;借助皱褶构造推算隐伏断层的埋藏深度。这种构造综合分析法无疑是研究隐伏断层的重要手段。  相似文献   

18.
记A#_σH是由代数A和Hopf代数H构成的交叉积.我们的主要目的是探索左A-模范畴与左A#_σH-模范畴之间的Gorenstein投射(平坦)预盖和Gorenstein内射预包络的稳定性.进而,我们可以研究Gorenstein维数.  相似文献   

19.
The homopolymerization and copolymerization of glycolide (GA) and lactide (LA) are des-cribed. The resulting polymers are characterized by differential scanning calorimetry (DSC),thermogravimetric analysis (TGA), 300 MHz proton nuclear magnetic resonance spectroscopy(NMR), infrared spectroscopy, and X-ray diffraction. The rheological properties of PGA andPGLA 910 are evaluated by shear experiments. The biodegradation has been studied in vivo. Theresults show that the polyesters can be absorbed by the muscles of rabbits after 60 days.  相似文献   

20.
按照卟啉及金属卟啉化合物合成方法不断改进的发展过程,介绍了有代表性的四种合成方法,详细地论述了它们在生物体内氧化模型研究、抗癌、光电化电池,环境保护方面的应用.  相似文献   

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