科技新讯

呈味核苷酸双酶法生产肌苷酸+鸟苷酸(简称I+G)工艺技术,最近在奉化通过国家级技术鉴定。该项研究所获得的新产品填补了国内空白,很有可能在我国形成一个新兴产业。用直接发酵法生产肌苷酸、酶解法生产鸟苷酸在六十年代已有研究,但未能推广形     

香菇多糖提取方法研究进展

通过对当前常用的热水浸提法、酶解法、微波提取法和深层发酵培养法等6种香菇多糖的提取方法进行概述,阐述了影响多糖得率的主要因素及应采取的相应措施;同时对其中主要的方法进行了比较分析,认为实际生产中应尽量综合运用各种方法进行复合提取,才能取得良好效果。     

固定化脲酶的制备及其在废水处理上的应用

固定化酶和固定化细胞近年来获得迅速发展,虽然早在1916年已有固定化酶的研究报导,但作为工业上的生产应用是在七十年代才开始的,目前较大量生产应用的固定化酶主要有葡萄糖异构酶,氨基酸酸化酶,蛋白质水解酶和脲酶等.目前固定化脲酶主要应用于医疗和制备脲酶膜电极.应用于含尿素废水处理报导极少,主要有荷兰的报导,是关于用砂子作为载体的固定化脲酶的逆流多层床应用于已解吸氨的含尿素废水处理.目前国际上应用于化肥厂尿素废水处理的方法主要是高温高压水解法,我国也进口了一套这种装置,但至今尚未正常运行,主要原因是消耗能源较多.所以化肥厂的含尿素废水处理问题至今仍未基本解决.本文主要介绍固定化脲酶性质与载体结构关系及其应用于含尿素废水处理的部分结果.     

生物柴油的合成技术

综述了生物柴油生产的原料、催化剂、合成方法和生产工艺等相关研究进展.目前生物柴油工业化生产主要采用的均相酸、碱催化酯交换反应,很多都是在常压、低温下进行,其优点是反应转化率高,但是废催化剂会带来环境问题;非均相催化剂和酶催化剂则是目前研究的热点,固体碱、固定化酶等催化剂可以很容易实现与反应产物的分离;高温高压技术、超临界技术等也被用于酯交换反应过程.综合分析了国内外生物柴油的发展现状,提出生物柴油是一种极具发展前景的清洁燃料以及我国发展生物柴油的几点建议.     

苯乙酸合成研究进展

介绍了苯乙酸的合成方法并综述了各种方法的特点，指出了目前国内的苯乙酸生产方法上存的问题和需作的改进，提出了用羰基法代替现有的氰苄水解法和苯乙酰胺水解法合成苯乙酸，以改变苯乙酸生产的落后局面。     

多核苷酸磷酸化酶的分离提纯及某些多聚核苷酸的酶促合成

医疗实践提出了人工合成多聚核苷酸的任务,这是由于某些多聚核苷酸具有防治病毒病的效果。本文的第一部分报导了从大肠桿菌中分离多核苷酸砱酸化酶的工作。菌体经细菌磨研磨后,用缓冲液抽提;利用硫酸链霉素除去杂质;加入硫酸铵粉末除去杂蛋白;经过纤维素柱层析后,得到酶蛋白,酶活力提高68倍,而三种杂酶含量降低到3％或4％。本文的第二部分报导了利用此酶,从一些核糖核苷二砱酸(IDP、CDP、ADP)合成多聚核苷酸的工作,合成的多聚核苷酸,用凝胶电泳法测得的分子量相当于4—16S。     

黄酮类化合物的提取工艺研究进展

黄酮类化合物是一类活性物质,具有特殊的保健功能.综述了黄酮类化合物的提取方法,包括水提法,碱性水或碱性稀醇提取法、有机溶剂提取法、微波法、超声波法、酶解法、超临界萃取法、大孔树脂吸附法、半仿生提取法.旨在为黄酮类化合物的研究、开发、应用提供一定的参考.     

5′-磷酸二酯酶强化香菇风味基料中鲜味成分

研究了5'-磷酸二酯酶强化香菇鲜味成分的工艺条件及其作用.在香菇打浆料中添加5'-磷酸二酯酶及酵母粉,研究各因素对5'-核苷酸产量的影响.结果表明,酵母粉用量、5'-磷酸二酯酶用量、酶解体系pH值、酶解温度及时间等因素对鲜味核苷酸生成有重要影响,正交试验优化的酶解工艺条件为:酵母粉用量5%,5'-磷酸二酯酶用量5%,pH值4.0,酶解温度60℃,酶解时间60min.在此条件下制备的香菇风味基料中鲜味核苷酸(5'-IMP、5'-GMP)产量达到30.01 mg/g,较未经5'-磷酸二酯酶处理基料的鲜味核苷酸产量提高了3倍.     

Cyclobacterium qasimii脱乙酰酶的异源表达及酶学性质

氨基葡萄糖因具有丰富的生物活性而被广泛应用,但目前其工业化生产均需利用浓酸在高温条件下进行脱乙酰反应;因此,需要寻找一种环境友好的生物催化法来取代酸水解法脱乙酰基。筛选并得到了来源于卡西氏菌Cyclobacterium qasimii的脱乙酰酶(CqCBDA),并将其成功地在大肠杆菌表达系统中进行了异源表达,且其具有较高水平的可溶性蛋白表达量。纯化后重组的CqCBDA具有N-乙酰氨基葡萄糖脱乙酰酶活性,比酶活力为11.5U/mg,最适温度为40℃,最适pH值为7.6,在低于40℃的条件下展现出较高的热稳定性。CqCBDA在酶解法生产氨基葡萄糖过程中具有较大的应用潜力,研究结果可为酶法绿色制备氨基葡萄糖提供理论参考。     

云母钛珠光颜料的制备及应用

综述了云母钛珠光颜料的各种制备技术 ,包括四氯化钛加碱法、热水解法、缓冲法和其他方法 ;并且分折了各种方法的优缺点 ,重点介绍了四氯化钛加碱法及热水解法的制备技术 ,综述了此种颜料在汽车闪光面漆、粉末涂料及建筑涂料中的应用及前景     

二硫键影响GH11木聚糖酶稳定性研究进展

低聚木糖具有改善肠道微生态的益生作用,在降血糖、降血压、防止便秘等方面表现出良好的保健效果。近年来,利用生物酶技术制备功能性低聚木糖的相关研究受到广泛关注。糖苷水解酶(glycoside hydrolase, GH)11家族木聚糖酶具有底物特异性强和催化效率高的特点,在低聚木糖生产应用中表现出显著优势；然而,大多数天然GH11木聚糖酶存在稳定性较差的问题,无法满足工业生产中高温、酸、碱等极端条件的要求。利用酶工程技术对天然木聚糖酶进行分子改造,以适应高温、酸、碱等生产条件,使底物特异性强、催化效率高的酶相对稳定地发挥作用,对于制备功能性低聚木糖的工业生产具有重要的实际意义。根据GH11木聚糖酶的分子结构及其特点,通过比较其分子内相互作用力对酶热稳定性的影响,发现二硫键在改善酶的稳定性方面具有十分显著的优势。基于对GH11木聚糖酶结构的分析,总结了引入二硫键的常规策略,比较了酶在不同区域引入不同数量二硫键对GH11木聚糖酶稳定性的改善效果,对引入二硫键后酶稳定性显著变化的几个区域进行定位,并指出多个二硫键对改善酶稳定性的作用方式,希望为提高酶稳定性的酶分子改造研究提供基础数据,为拓宽GH11木聚糖酶工业应用范围提供科学参考。     

杀虫防菌Bt工程菌的构建

N-乙酰高丝氨酸内酯（N-acyl-homoserine lactones,AHLs）是革兰氏阴性细菌胞间通讯的信号分子,能够调控许多植物病原菌的致病基因的表达,但如果内酯酶将其水解,则会影响病原菌的致病活性,植物就不会染病。苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）,作为生物杀虫剂已有多年使用的历史,本研究通过生物技术手段成功地构建了携带信号分子AHL水解酶基因的穿梭载体pHTss10304,并转入到具有Bt中,构建成工程菌Bt24、工程菌Bt33、工程菌Bt34和工程菌Bt36。通过设计,实现了Bt工程菌的多功能改造,为BT工程菌的应用提供了更为广阔的空间,为生物防治菌的开发现有菌剂提供了新的思路。     

异育彭泽鲫及其双亲消化酶活性的比较研究

对异育彭泽鲫及其双亲肝胰脏和前、中、后肠消化酶活性进行比较研究．结果表明:异育彭泽鲫肝胰脏及前、中、后肠的蛋白酶活性分别为367.69、101.16、297.06、25.97g/g#8226;min,均介于其双亲之间;异育彭泽鲫肝胰脏及前、中、后肠的淀粉酶活性分别为300.60、425.45、272.58、312.28g/g#8226;min,均大于双亲;异育彭泽鲫肝胰脏及前、中、后肠的脂肪酶活性分别为1.76、2.42、1.23、1.04g/g#8226;min,前肠和中肠脂肪酶活性大于双亲,后肠和肝胰脏脂肪酶活性介于双亲之间,且三种消化酶活性都比母本高.差异性分析结果表明,其与母本之间的差异显著低于其与父本的差异.研究结果符合雌核发育子代表型与母本一致的特性,并显示异源精子对雌核发育子代肝胰脏及肠管道消化酶活性有一定影响,为异育彭泽鲫的生长效应提供了一定的证据.     

WO3 纳米材料气敏性能研究进展

作为n型半导体的WO3是一种优良的气敏材料,对NOX、H2S、H2、CH4、C2H5OH、CO、NH3等气体都有良好的敏感性。目前WO3气敏材料已经基本满足社会应用的要求,但有些指标还有待改善。本文综述了WO3纳米材料气敏性能的研究进展,介绍了n型半导体WO3纳米材料的气敏传感机制,以及通过形貌控制等手段提高气敏性能、掺杂WO3纳米材料气敏性能及其复合气敏材料气敏性能的研究进展情况。作者认为WO3纳米材料在提高灵敏度、降低工作温度,特别是提高选择性和稳定性上还有很大的研究空间,并且还需克服制备的高成本,探索简易而且重复性强的制备工艺,以便更早地应用于商业化生产,为社会生产生活服务。     

嗜热糖苷酶与酶催化糖化合物合成研究进展

本文对近年来关于嗜热糖苷酶的研究进行了全面的论述,包括嗜热糖苷酶基因的克隆与表达的现状以及在酶法合成糖苷类化合物方面的应用,对比分析了目前提高转糖苷效率的方法,如定点突变、合理设计溶液体系、微波辐射等。在糖苷类化合物的水解与合成的工业生产中,嗜热糖苷酶以其良好的热稳定性可望成为一类高效、稳定的工具酶。     

硬质合金模压工艺成型剂的研究

总结介绍了目前国内外硬质合金生产中主要使用的几种成型剂:橡胶成型剂、石蜡成型剂、PEG、SBS高分子成型剂等。具体阐明了各种成型剂的不同性能,硬质合金生产对成型剂的具体要求和目前国内外成型剂的研究现状,最后展望了未来国内外硬质合金成型剂的发展趋势。     

耐热α-淀粉酶的筛选、基因克隆和酶学性质分析

【目的】筛选耐热α-淀粉酶并实现异源表达,同时分析其酶学性质特征。【方法】以M9培养基加上可溶性淀粉作为选择性分离培养基,从腾冲火山温泉土壤中筛选到产淀粉酶的菌株Anoxybacillus sp.GXS-3。根据淀粉酶氨基酸保守序列,设计引物进行PCR扩增,然后对目标序列进行步移扩增,获得淀粉酶基因AmyGX。将AmyGX与表达载体pQE30连接,导入大肠杆菌M15中表达,对重组酶进行分离纯化和酶学性质分析。【结果】AmyGX基因长1 515 bp,编码505个氨基酸残基,前23个氨基酸残基为信号肽序列;重组质粒pQE30-AmyGX编码的蛋白分子量为58.04kDa,对可溶性淀粉催化水解反应的最适温度为60℃,最适pH值为8.0,V_(max)、K_m值分别为0.19U/mg、3.14mg/mL,热半失活温度T_(50)~(30)值为65.2℃;Zn~(2+)、Cu~(2+)、Co~(2+)、Fe~(3+)、Ba~(2+)对该酶具有明显的抑制作用,Na~+、K~+对该酶有激活作用,Mg~(2+)、Ca~(2+)的影响则不明显。【结论】AmyGX是一种中等耐温碱性酶,在造纸、洗涤剂生产和有毒废弃物去除等方面具有潜在的应用前景。     

甜味剂卤代糖

本文首先比较了营养性甜味剂蔗糖、果糖、蛋白糖、木糖醇和非营养性甜味剂糖精、甜菊甙、甘草甙的特性和优缺点、然后重点介绍了新型甜味剂卤代糖的历史及其优点,介绍了合成4,1',6'——三氯——4,1',6'——三去氧半乳蔗糖(TGS)的不同方法并比较了它们各自的优点、展望了这种新型甜味剂的研制、生产及应用前景.     

Copper ions inactivate S-adenosylhomocysteine hydrolase

S-adenosylhomocysteine (AdoHcy) hydrolase isan enzyme that regulates biomethylation and some otherphysiological processes. Recombinant AdoHcy hydrolase wasoverexpressed in E. coli JM109 and purified with ion ex-change and gel filtration chromatographies. The effects ofcopper ions (Cu2+) on the activity of AdoHcy hydrolase wereinvestigated and the results showed that Cu2+ inhibited theenzyme's activity by a concentration and time-dependentprocess. The inhibition constant (Ki) and the apparent rateconstant (kapp) were calculated to be (14 + 4) nmol @ L-1 and(1.08 + 0.15) min-1, respectively. The existence of the naturalsubstrate Ado could to some extent prevent Cu2+ from inac-tivating the enzyme, suggesting that copper ions possiblycould compete with the natural substrate on enzyme's sub-strate binding site. Further studies on the mechanism of in-hibition are being carried out.     

环糊精水解酶cds1-3底物通道氨基酸的定点突变研究

本研究对具有大分子水解能力的环糊精水解酶cds1-3的蛋白结构进行分析,选取底物通道相关氨基酸进行定点突变。通过比较突变酶和野生酶的功能差异,定位决定cds1-3特殊功能的氨基酸。采用sybyl 1.2进行蛋白质底物结合分析,选取和多聚体形成、底物结合以及底物通道相关的氨基酸Glu66、Pro48、Phe289为突变位点,反向PCR构建pSE380/E66G、pSE380/P48H、pSE380/F289A表达质粒并进行表达,获得酶活突变体并与原始酶进行底物特异性比较分析。其结果显示,突变酶E66G降解大分子底物木薯淀粉和支链淀粉的相对酶活力分别提高26.96%和23.15%,而对小分子底物普鲁兰糖的水解能力下降13.14%。因此,cds1-3是一个能水解大分子底物的特殊环糊精水解酶,氨基酸Glu66是cds1-3水解大分子支链淀粉的关键氨基酸之一。