苹果叶片不定芽的高频诱导及植株再生的研究

体外建立并扩繁了苹果品种“乔纳金”、“新世界”、“王林”,“北斗”的无性系,在ＭＳ附加ＢＡ０．５￣２．０ｍｇ／Ｌ、ＩＢＡ０．１￣０．５ｍｇ／Ｌ的培养基中,２个月内芽的数量可增至５倍,在ＭＳ培养基附加ＢＡ５．０ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ的下,４个品种的叶片再生率可达９０％以上,其中以“乔纳金”最高,可达１００％,当ＴＤＺ为３ｍｇ／Ｌ,ＩＡＡ０．２为０．５ｍｇ／Ｌ时,其再生频率明显高于ＢＡ。     

茉莉直接不定芽途径高效再生体系的建立

以茉莉的下胚轴为外植体,研究了茉莉直接不定芽器官发生途径的再生体系.结果表明:以MS为基本培养基,附加0.5 mg/L BAP和0.01 mg/LNAA的诱导效果最佳,其不定芽再生率高达92%,外植体平均不定芽数目为4.2.适宜不定芽增殖的最佳培养体系为MS+1.0 mg/L BAP+0.1 mg/L NAA.1/2MS+0.5 mg/L IBA+0.5 mg/LIAA+100mg/L适于再生幼茎的生根,生根率达91%,生根后经移栽成活.     

荣莉直接不定芽途径高效再生体系的建立

以茉莉的下胚轴为外植体,研究了茉莉直接不定芽器官发生途径的再生体系．结果表明：以MS为基本培养基,附加0．5mg／L BAP和0．01mg／L NAA的诱导效果最佳,其不定芽再生率高达92％,外植体平均不定芽数目为4．2．适宜不定芽增殖的最佳培养体系为MS＋1．0mg／L BAP＋0．1mg／L NAA．1／2MS＋0．5mg／LIBA＋0．5mg／L IAA＋100mg／L适于再生幼茎的生根,生根率达91％,生根后经移栽成活．     

旱柳体外培养与直接分化再生系统的建立

给出了旱柳体外培养的方法:9月份至12月份采集1~2 a生枝条上带腋芽的茎段,经过筛选确定MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基,平均每个芽点产生的不定芽数量为3.5个,20 d后苗高为1.8 cm;不定芽在MS+0.1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA培养基中继代增殖及生长较好,为适宜的增殖培养基;在形成的不定芽中有些不定芽起源于单株苗的切口基部,因此,初步建立了旱柳的直接分化再生系统,可为旱柳的遗传转化等研究奠定基础.经过壮苗处理的幼苗在MS+0.2 mg/L NAA培养基上的生根率达100%,且生根量多,幼苗生长健壮.生根苗移栽至V(草炭土)V(河沙)为3 1的混合基质中,60 d后成活率为90%左右.     

白术胚轴和胚根直接分化不定芽的再生体系

为了建立白术Atractylodes macrocephala Koidz.通过胚轴、胚根外植体直接分化不定芽的高效离体再生体系,研究了外植体类型、植物生长调节剂种类及质量浓度对不定芽直接分化的影响.研究结果表明,以白术无菌苗的胚轴、胚根为外植体,在分化培养基上可直接诱导不定芽分化,其中胚轴不定芽分化率最高可达91.18%,每个外植体产生芽的数量最高可达13个;诱导不定芽分化的最佳培养基为MS(Murashige and Skoog)+ TDZ(thidiazuron)1.5 mg/L+ NAA(naphthylacetic acid)0.2 mg/L.将分化的不定芽培养于附加IBA(indol 3-butiric acid)0.5 mg/L的1/2 MS培养基中诱导生根,生根率达66.66%以上.本研究为药用植物白术的工厂化育苗和脱病毒以及利用植物基因工程技术进行品质改良提供了有效的再生途径.     

福建山樱花不定芽诱导和植株再生规模化繁殖试验

取长约4 cm的3年生福建山樱花中选树的春梢为外植体,接种于添加6-BA和IBA的MS培养基中,诱导产生不定芽。结果表明:当培养基为1/4 MS时,能有效地防止外植体的褐化死亡;添加1.0 mg/L 6-BA和0.01 mg/L IBA的培养基上,外植体能快速生长,且无玻璃化苗发生。增殖阶段以添加1.0 mg/L 6-BA 0.3 mg/L GA3的MS培养基最好,1个周期的增殖率可达600%。当外殖体高约4 cm时,即转入1/2MS 1.0 mg/L NAA 0.2 mg/L IBA培养基进行生根诱导培养,25 d后即可陆续生根并长成完整植株,35 d生根率可达92.1%。以1/3份珍珠岩 2/3份泥炭混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达94%。该试验中各项指标已达到快速繁育苗木的要求,其技术措施可直接应用于规模化生产。     

番茄花药培养愈伤组织诱导及不定芽形成的研究

为了建立番茄花药愈伤组织诱导及分化的实验体系,通过花药离体培养并设计不同的试验处理,以6个番茄品种的花药为试材,研究了植物生长调节剂、蔗糖浓度、硝酸银浓度、基因型和培养基对番茄花药培养愈伤组织诱导率及不定芽形成的影响.结果表明:培养基中添加1.0mg/L的2,4-D和0.5mg/L的KT,里格尔87-5和石番9号愈伤组织诱导率都达最高;培养基中加入30g/L的蔗糖,里格尔87-5的愈伤组织诱导率达20.24%;培养基中加入10μmol/L的硝酸银,花药组织褐化率较对照降低了70.59%,当浓度超过50μmol/L,褐化率增高,出愈率略有降低;不同基因型愈伤组织发生率明显不同,相同培养条件下,里格尔87-5的诱导率高达21.43%,而粉B二号的诱导率仅有0.46%;培养基中加入175g/L的马铃薯汁、0.1%的活性炭,6个材料的愈伤组织平均诱导率较对照分别降低了35.14%、95.48%.番茄花药愈伤组织在MS+6-BA 2mg/L+ZT 0.5mg/L+IAA 0.1mg/L培养基上可再分化成不定芽,不定芽诱导率达15.15%.     

藏红花球茎诱导丛生芽及球茎再生

以藏红花（Crocus sativus L.)当年新生小球茎为试验材料，在含1mg/L 2,4-D,0.5mg/L BA和7％CM（椰乳）的MS培养基上培养1－2月，再转入含5mg/L NAA和5mg/L BA的MS培养基上，黑暗条件下继代1－2次，可定向诱导大量丛生芽，诱导频率达74％，丛生芽可于黑暗条件下继续增殖，也可在光照条件下于含0.5mg/L NAA和3mg/L BA的MS培养基上分化出小球茎，长出完整植株。     

TDZ促进花生外植体分化及基因转化

以花生成熟胚的上胚轴和胚叶为外植体，通过农杆菌介导转化Bt和CpTI双基因，在共培养基和诱导培养基中加入TDZ诱导不定芽和体细胞胚，实验证明，TDZ有明显促进花生外植体分化的作用，当诱导培养基组成为TDZ0．3mg/L NAA 0.4mg/L，诱导时间为28d，分化培养基为MS时采用TDZ发胚培养基萌发的轴外植体分化率最高，可达73％，GUS基因阳性率3．5％，当诱导培养基组成的TDZ0．2mg/L NAA0.4mg/L，诱导时间为21d，分化培养基为MS时水萌发种胚叶外植体分化率最高，达56％，GUS基因阳性率2．5％。     

番茄高效再生体系的建立

比较了不同基本培养基,不同激素及其不同浓度组合对番茄愈伤组织的增殖、不定芽分化及其生根的效果.结果表明:MS+NAA0.02～0.10mg·L-1+6-BA3.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1(pH=5.8)均可诱导愈伤组织的增殖,但以MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+蔗糖30g·L-1最佳;MS+IAA0.1mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1培养基对愈伤组织分化不定芽的效果最佳;MS+IAA0.1mg·L-1+蔗糖20g·L-1培养基对生根较好.     

抗生素敏感型番茄转化及再生体系的建立

研究了诱导不定芽分化及根发生的最佳激素配比,并进行了抗生素的敏感实验,确定了所试番茄品种为卡那霉素敏感型,6.5 mg/L的卡那霉素即可抑制外植体的再生.在工程农杆菌的侵染中,优化了预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间以及筛选方式等相关转化条件,以期对此番茄品种建立起高效稳定的遗传转化及组织再生体系.     

草地早熟禾胚性愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立

使用MS附加2,4-D作基本培养基,对草地早熟禾进行愈伤组织的诱导和愈伤组织分化成苗试验,建立了最佳的早熟禾胚性愈伤诱导和植株再生体系.早熟禾的成熟种子经过灭菌后,接种到愈伤组织诱导培养基上,置于25±2℃,黑暗条件培养约8周~9周,有胚性愈伤组织产生.然后将愈伤组织转至分化培养基上,黑暗培养一周后,再进行光照培养,约20天后开始分化出根和芽,继续培养则长成粗壮的绿色植株.2,4-D是影响愈伤形成和植株再生的关键物质.本实验结果证明,3.0mg.L-1和0.1mg.L-12,4-D是最佳浓度组合,其诱导频率和分化频率分别为67.82%和48.81%;0.5mg.L-16-BA对根和芽的分化具有促进作用.     

大叶饲料槐高频再生体系建立及试管苗工厂化生产

通过叶片外植体愈伤组织诱导和直接不定芽再生途径,建立了大叶饲料槐的高频再生系统,采用正交试验筛选出愈伤组织最适诱导培养基为;MS附加0．5mg／L 6-BA和1．0mg／L NAA;愈伤组织分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．2mg／L NAA。叶片外植体直接分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．1mg／L NAA;试管苗在1／2MS附加0．2mg／L IBA、0．1mg／L NAA和2g／L AC的培养基上生根率高达100％,移栽成活率达90％,从而实现了大叶饲料槐的工厂化生产．     

洋桔梗叶片再生体系的建立

利用正交等实验,对洋桔梗叶片再生体系进行了系统的研究,确定了洋桔梗叶片不定芽诱导培养基最佳激素配比为MS+ZT0.5mg/L+NAA0.01mg/L,pH值为6.3,光照强度60μmol·m-2·s-1.不定芽诱导生根最佳培养基及激素配比为1/2MS+IBA1mg/L.该实验结果为通过叶盘法开展农杆菌介导的洋桔梗遗传转化奠定了良好的基础.     

84K杨叶片再生系统的建立

选用84K杨的叶片作为外植体,MS作为基本培养基,采用不同浓度组合的BA和NAA对84K杨再生系统进行了研究.结果表明,在MS培养基中单独添加2.0mg/L BA时,不定芽分化率为90%,单独添加0.3mg/L NAA时,不定根产生率最高(90%),但无不定芽生成.采用1.5mg/LBA 0.3mg/LNAA组合搭配时,不定芽分化率最高(95%).在此基础上,采用M1(MS 1.5mg/L BA 0.3mg/L NAA)培养基,研究了不同着生位置的叶片、同一着生位置叶片的不同切段以及叶片在培养基上的放置方式对84K杨叶片再生的影响,结果表明带有叶柄的下切段比其余叶片切段不定芽再生率高,幼嫩叶片比老化叶片再生率高,叶片近轴端向下接触培养基比远轴端向下接触培养基再生率高.叶片再生系统的建立为开展84K杨的工厂化育苗和遗传转化奠定了基础.     

741杨离体快繁和叶片再生体系的建立

选用741杨的茎段和生根组培苗叶片为外植体,采用不同浓度组合的BA和NAA对741杨的离体快繁和叶片再生体系进行了研究。结果表明：741杨芽增值的最佳培养基为MS＋6-BA 0．5mg／L＋NAA 0．1mg／L;最佳生根培养基为MS＋IBA 0．3mg／L;741杨叶片不定芽诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1．0mg／L＋NAA 0．1mg/L。试验还研究了不同着生位置的叶片以及叶片在培养基上的放置方式对741杨叶片再生的影响。