淫羊藿中有效成分淫羊藿甙分离纯化的研究

在Tween80-(NH4)2SO4液-固萃取体系中,试验了淫羊藿甙在两相的分配行为.选择Tween80浓度为9%,(NH4)2SO4浓度为1.667mol/L,萃取pH4.20,淫羊藿甙的一次萃取率可达95.2%.选择(NH4)2SO4浓度为2.121mol/L,反萃pH10.30,经一次反萃,可使94.2%的淫羊藿甙与Tween80分离.用HPLC对分离效果作了评价,结果表明,该萃取体系对淫羊藿粗提液有明显的分离纯化作用.     

高效液相色谱化学发光法测定淫羊藿甙

在碱性条件下,研究了淫羊藿甙与Co(Ⅱ)形成的1∶1配合物催化鲁米诺-H2O2体系产生化学发光.在此基础上建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离柱后化学发光检测淫羊藿甙的新方法,并成功应用于安神补脑液中淫羊藿甙的测定.方法在0.5~20μg/mL范围内与化学发光强度呈良好的线性关系,相关系数为0.9986,检出限为2×10-7g/mL(3σ).对2×10-6g/mL淫羊藿甙平行测定11次,其相对标准偏差为4.5%.     

淫羊藿保健露酒的研制及其功能评价

用热水浸提法制备淫羊藿提取液,以发酵的葡萄酒为酒基,辅以适量白砂糖和柠檬酸,研制出一种淫羊藿保健露酒.结果表明:当固液比为1∶30,浸泡1.5h,于80℃水浴4h时,淫羊藿总黄酮提取率最高;在葡萄酒中添加25.0%淫羊藿提取液、20.0%白砂糖和0.1%柠檬酸时,淫羊藿保健露酒的感官品质最好;淫羊藿保健露酒中总黄酮、淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C质量浓度分别为297.08、16.64、18.57、25.23、7.89mg/L;与普通葡萄酒相比,淫羊藿保健露酒的抗氧化活性更强.该生产工艺所得淫羊藿保健露酒兼具优良的感官品质及较好的保健功能.     

淫羊藿总黄酮提取工艺对总黄酮和淫羊藿苷含量的影响

目的:研究不同提取方法对淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷含量的影响.方法:以紫外分光光度法测定淫羊藿总黄酮的含量,HPLC法测淫羊藿苷的含量,通过对提取分离过程中淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷的含量的检测,来确定提取工艺.结果:淫羊藿总黄酮的最佳提取工艺为20倍量(V/W),70%乙醇提取3次,每次0.5 h.聚酰胺对淫羊藿总黄酮的富集能力明显优于大孔树脂DHP-100,DHP-600和D101.结论:聚酰胺分离纯化工艺具有转移率高,成本低的优点,适宜用于产业化生产.     

HPLC法测定朝鲜淫羊藿中淫羊藿苷的质量分数

采用HPLC法对不同采收期、不同产地、不同海拔、不同药用部位的淫羊藿中淫羊藿苷的质量分数进行了测定.结果表明:淫羊藿苷在0.1~1.4 g/L范围呈良好的线性关系;不同采收期的淫羊藿叶中淫羊藿苷的质量分数为0.314 46%~3.680 99%;临江产淫羊藿中淫羊藿苷质量分数最高;海拔629 m的淫羊藿中淫羊藿苷质量分数最高;同一植株不同部位中淫羊藿苷的质量分数分布为叶地上部分茎.     

高效液相色谱法和薄层—紫外法测定淫羊藿中淫羊藿甙质量分数的研究

应用HPLC法测定淫羊藿中淫羊藿甙的质量分数,测得结果显示提取淫羊藿甙的质量分数与提取液关系密切,以50％乙醇提取的质量分数为最高,对同一淫羊藿药材进行质量分数测定,HPLC法操作简单,省时,分离效果好,准确度和再现性也明显优于药典的TLC－UV法。当提取方法相同时,两种方法测得的淫羊藿甙质量分数基本一致。因此,使用HPLC法也可按照药典的质量分数限度进行药材有效成分的检测工作。     

淫羊藿甙对高浓度葡萄糖抑制MC3T3-E1细胞成骨分化的保护作用*

为了探讨淫羊藿甙对高浓度葡萄糖抑制MC3T3-E1细胞成骨分化是否具有保护左右,采用含10 mmol/Lβ-磷酸甘油、50 mg/L维生素C以及10~(-8)mol/L地塞米松的α-MEM培养基诱导MC3T3-E1细胞成骨分化。根据培养基葡糖糖含量不同分别设置对照组(5. 5 mol/L葡萄糖)、高糖组(22 mol/L葡萄糖)和药物干预组(22 mol/L葡萄糖)。药物干预组各组细胞换液时分别加入0. 1μmol/L、1. 0μmol/L和10μmol/L的淫羊藿甙。通过茜素红染色、钙含量检测方法检测诱导培养25 d后细胞外钙含量,使用Real time PCR检测诱导培养7 d后成骨标志分子表达,观察各组MC3T3-E1细胞的成骨分化情况。使用活性氧检测试剂盒检测诱导培养7 d后的各组MC3T3-E1细胞内自由氧(reactive oxygen species,ROS)生成水平。结果表明:22mmol/L葡萄糖组细胞钙含量最低,成骨标志分子ALP、Osteorix及Runx2表达降低,细胞内自由氧生成水平升高,MC3T3-E1细胞成骨分化受到抑制。使用不同浓度淫羊藿甙干预后,细胞钙含量升高,成骨标志分子ALP、Osteorix及Runx2表达升高,细胞内自由氧生成水平降低,MC3T3-E1细胞成骨分化抑制作用呈现浓度依赖性的减弱。可见淫羊藿甙能够通过降低细胞内自由氧水平,减弱高浓度葡萄糖对成骨细胞分化的抑制作用。     

淫羊藿甙及其与铁离子配合物的电喷雾质谱研究

本文利用多级串联电喷雾质谱 (ESI-MSn)研究了淫羊藿甙及其与铁离子形成的配合物 ,得到了淫羊藿甙的质谱碎裂规律 ;并对淫羊藿甙与铁离子形成的配合物结构进行了初步确定。结果表明 :淫羊藿甙与铁离子可形成比较稳定的 2 :1的配合物     

淫羊藿苷分子印迹聚合物吸附性能研究

以沉淀聚合法制备了淫羊藿苷分子印迹聚合物(MIPs).并用动态吸附、静态吸附和选择性吸附实验研究了制备的分子印迹聚合物对模板分子淫羊藿苷的吸附性能.结果表明制备的淫羊藿苷分子印迹聚合物对模板分子淫羊藿苷具有较好的吸附能力和识别能力,可以作为固相萃取材料来分离提取中草药淫羊藿中的淫羊藿苷.     

微波法提取淫羊藿中淫羊藿苷工艺研究

采用微波辅助提取淫羊藿中淫羊藿苷,以淫羊藿苷为考察目标,系统考察了提取溶剂、微波功率、提取时间、料液比四个因素对提取效果的影响.采用正交实验对提取工艺进行初步研究,确定最佳工艺条件为70%乙醇,微波功率400W,提取时间40分钟,料液比1:40.     

淫羊藿甙及其与铁离子配合物的电喷雾质谱研究

本利用多级串联电喷雾质谱(ESI-MS^n)研究了淫羊藿甙及其与铁离子形成的配合物，得到了淫羊藿甙的质谱碎裂规律，并对淫羊藿甙与铁离子形成的配合物结构进行了初步确定．结果表明；淫羊藿甙与铁离子可形成比较稳定的2:1的配合物．     

施肥对巫山淫羊藿和柔毛淫羊藿产量的影响

采用氮(N)、磷(P)、钾(K)三因素五水平L25(53)的正交实验设计,研究不同的施肥处理对移栽的巫山淫羊藿(Epimedium wushanense)及柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens)产量的影响,以期为淫羊藿属植物的栽培提供理论依据.结果表明:施有机肥(猪粪)能极显著提高巫山淫羊藿和柔毛淫羊藿的产量,且效能优于N、P、K最优组合;适宜的N、P、K组合(巫山淫羊藿的叶产量在A5B4C3处理下最高,茎产量在A5B5C4处理下最高;柔毛淫羊藿的叶和茎产量均在A5B5C4处理下最高)能显著提高两种淫羊藿的产量,但过量的N、P、K则抑制了其生长,使其减产;N、P对两种淫羊藿产量的作用最大,K对其的产量有一定的影响.因此,在巫山淫羊藿和柔毛淫羊藿的栽培过程中,建议合理地使用有机肥或适宜比例的N、P、K将有助于提高产量.     

反胶团萃取分离螺旋藻藻蓝蛋白

研究了CTAB/正戊醇-正辛烷反胶团溶液萃取分离螺旋藻藻蓝蛋白的性能.考察了水相离子强度和种类,有机相中表面活性剂浓度和助溶剂浓度等因素对萃取行为的影响,并从反胶团的微观结构予以解释.结果表明:0.04mol/L CTAB/正戊醇-正辛烷(体积比1:4)的反胶团体系用于萃取pH7.0,包含0.1 m01/L KCl的螺旋藻细胞破碎液,藻蓝蛋白萃取率可达96.3%,分配系数达到26.0;采用pH5.0,包含2 mol/L KBr的反萃液反萃藻蓝蛋白,反萃取率可迭90.6%.     

N235协同萃取碱性氰化浸金溶液中的金(Ⅰ)

由N235与路易斯碱三辛基氧膦(TOPO)组成协同萃取体系,对碱性氰化浸金贵液中金(Ⅰ)协同萃取和反萃进行了研究.研究了有机相中N235含量、水相平衡pH、相比等因素对金(Ⅰ)萃取率的影响,考察了反萃液中氢氧化钠液浓度对负载金有机相的反萃效果.结果表明,采用有机相为10% 10%协萃剂TOPO 80%煤油的协萃体系,对pH=9～10和初始金(Ⅰ)质量浓度ρo=10.87 mg/L碱性氰化浸金贵液进行萃取时,经一级萃取后,萃取率可高达98%左右;同时,采用0.05～0.1 mol/L的氢氧化钠溶液可对负载有机相进行反萃,反萃率达到91%以上.     

N235协同萃取碱性氰化浸金溶液中的金(I)

由N235与路易斯碱三辛基氧膦(TOPO)组成协同萃取体系,对碱性氰化浸金贵液中金(I)协同萃取和反萃进行了研究.研究了有机相中N235含量、水相平衡pH、相比等因素对金(I)萃取率的影响,考察了反萃液中氢氧化钠液浓度对负载金有机相的反萃效果.结果表明,采用有机相为10%+10%协萃剂TOPO+80%煤油的协萃体系,对pH=9~10和初始金(I)质量浓度ρO=10.87 mg/L碱性氰化浸金贵液进行萃取时,经一级萃取后,萃取率可高达98%左右;同时,采用0.05~0.1 mol/L的氢氧化钠溶液可对负载有机相进行反萃,反萃率达到91%以上.     

P204/4PC新协萃体系萃取分离镍与锰镁钙

采用一种新的二元协萃体系P204/4PC对萃取分离镍与锰、镁、钙进行了研究.考察了有机相配比、平衡pH、平衡时间等因素对萃取分离的影响,并绘制了镍萃取与反萃等温线.结果表明,采用1.25mol/L 4PC(L)+0.25mol/L P204(HA)组成的有机相,经过5级模拟逆流萃取,镍的萃取率达到98.7%,其他杂质金属的萃取率基本都在5%以下.负载有机相经过三级逆流反萃,镍的反萃率达到98.2%,反萃后有机相中镍的质量浓度小于0.1g/L.     

铜转炉烟灰酸浸净化液中锌的萃取分离

以p204为萃取剂,260号磺化煤油为稀释剂,从铜转炉烟灰酸浸净化液中萃取分离锌.考察萃取振荡时间、p204的体积分数、相比率(O/A)以及料液初始pH值对锌萃取率的影响.通过正交实验和单因素分析确定p204从铜转炉烟灰酸浸净化液中萃取分离锌的主要影响因素和最佳工艺条件.研究表明:室温条件下,当萃取平衡时间为6 min,p204的体积分数为30%,相比率(O/A)为2∶1,料液初始pH值为3.0时,锌的一级萃取率达到57.32%.经4级错流萃取可以将料液中锌的质量浓度降低到0.027 g/L,锌萃取率达到97.26%.负载有机相经2 mol/L的H2SO4反萃,锌可完全反萃.     

淫羊藿生物碱对大肠杆菌的抑菌作用

以模式菌大肠杆菌为供试菌,研究淫羊藿生物碱的抑菌作用。采用二倍稀释法测定淫羊藿生物碱对大肠杆菌的最小抑菌浓度,采用牛津杯法测量抑菌圈直径。通过分析淫羊藿生物碱对大肠杆菌生长曲线、胞外和胞内可溶性蛋白量、胞外核酸量、金属离子量、菌体培养液电导率以及菌体超微结构的影响,探讨淫羊藿生物碱的抑菌机理。结果表明,淫羊藿生物碱对大肠杆菌具有较强的抑制作用,主要抑制大肠杆菌对数期的生长,最小抑菌浓度为60 mg/mL。淫羊藿生物碱处理后,大肠杆菌的胞外、胞内可溶性蛋白量显著增加,胞外K~+、Mg~(2+)离子和核酸相对量也显著升高,菌体培养液的电导率显著改变。扫描电子显微镜观察发现,淫羊藿生物碱能使大肠杆菌菌体之间相互粘连、聚团,菌体表面出现孔洞和凹陷,细胞表面严重破损。淫羊藿生物碱对大肠杆菌的抑制作用很可能与其对细胞结构的破坏有关。     

硫脲反萃取季铵盐负载有机相中金、银、铜

硫脲对金、银、铜的反萃取能力和体系的酸度有关。利用此特点,通过调节体系酸度并采用分段反萃取可达到金与银、铜的基本分离。反萃取过程的适宜工艺条件为:温度60℃;反应时间大于5min;流比1/3;硫脲浓度1.2mol/L;酸度0.5mol/L HCl(反萃液Ⅰ)和1.5mol/L HCl和(反萃液Ⅱ)。负载有机相经两段共五级逆流反萃取后,金、银、铜的反萃率均达99.8%以上。将反萃体系在高流比混合澄清器中进行小规模生产性试验,结果与模拟平衡值相近,级效率达95%。用电沉积法将硫脲液中金和银、铜按不同的槽电压进行分离,所得硫脲贫液经调整后可返回反萃体系,反萃能力不受影响。     

淫羊藿大孔树脂吸附工艺和树脂寿命的研究

在实验条件下,使用大孔树脂对淫羊藿吸附、洗脱后,对树脂进行简单处理,继续上样。分别利用高效液相法和紫外分光光度法,以朝藿定C,淫羊藿苷,总黄酮为指标成分,考察树脂的使用寿命。大孔树脂对淫羊藿上样液重复吸附、洗脱七次,收率变化不大;树脂吸附能力没有下降。洗脱第八次时,转移率有开始明显下降。实验证明大孔吸附树脂可连续多次对淫羊藿有效成分分离纯化,树脂处理方法容易(不必每批用酸碱再生)。