环孢菌素A产生菌的分子鉴定及其原生质体制备

环孢菌素A高产菌株No.421502经形态学特征和分子标记鉴定,确认为镰孢菌属,命名为Fusariumsp.No.421502.收集Fusarium sp.No.421502孢子刚萌发的幼嫩菌丝体,以0.7 mol/L KCl为渗透压稳定剂,用质量浓度为20 mg/mL的蜗牛酶,30℃80 r/min处理5 h制备原生质体.原生质体为7×105/mL,原生质体形成率为62.8%.制备的原生质体稀释后接入再生培养基,再生率为29.6%.     

泡桐遗传转化系统的建立

通过农杆菌Ｔｉ质粒介导，将模式基因（新霉素磷酸转移酶＋β－葡萄糖酸苷酶基因）导入泡桐，并对影响转化及选择再生的一系列因子进行优化，创建了泡桐的遗传转化系统。优化后的系统为：用泡桐完整叶片作外植体，侵染转化的菌液浓度ＯＤ６００值控制在０．１～０．２，经２０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｃａ＾２＋处理，共培养６ｄ；在１０ｍｇ／Ｌ卡那霉素＋２５０ｍｇ／Ｌ羧苄青霉素的选择压下培养数天，随后在仅含Ｋａｎ的选择压下继续培养，     

变构菌素产生菌 S.griseochromogenes 接合转移体系建立与优化

以整合型质粒pSET152为出发质粒,建立并优化了变构菌素产生菌Streptomyces griseochromogenes(S.griseochromogenes)与Escherichia coli(E.coli)的属间接合转移体系,确定了适用于变构菌素产生菌灰产色链霉菌的最佳接合转移条件.研究发现Ca2+和甘氨酸都能够提高接合转移的效率,尤其是甘氨酸的效果非常显著.这一工作对于S.griseochromogenes的基因操作、小分子药物生物合成机制的研究以及具有自主知识产权的药物衍生物的开发具有普遍的应用价值.     

泡桐遗传转化系统的建立

通过农杆菌 Ｔｉ 质粒介导,将模式基因（ 新霉素磷酸转移酶＋ β葡萄糖酸苷酶基因） 导入泡桐,并对影响转化及选择再生的一系列因子进行优化,创建了泡桐的遗传转化系统．优化后的系统为：用泡桐完整叶片作外植体,侵染转化的菌液浓度 Ｏ Ｄ６００ 值控制在０ ．１ ～０ ．２ ,经２０ ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ Ｃａ２ ＋ 处理,共培养６ｄ ;在１０ｍ ｇ／ Ｌ 卡那霉素＋ ２５０ ｍ ｇ／ Ｌ 羧苄青霉素的选择压下培养数天,随后在仅含 Ｋａｎ的选择压下继续培养,直至抗性芽的再生．通过此遗传转化系统,获得了抗 Ｋａｎ的泡桐芽,转化频率可达８４ ％ ．组织化学法检测表明, Ｇ Ｕ Ｓ 报告基因不仅在侵染的叶片中得到短暂表达,而且在抗性芽和抗性愈伤组织中得到稳定表达     

发根农杆菌A4对荞麦的遗传转化

用发根农杆菌Ａ４对荞麦的下胚轴和子叶进行离体转化,得到ＲｉＴ－ＤＮＡ表达的发状根。不同的培养环境对发状根的和生长有一定的影响,表现为发状根在液体培养基上比在固体培养基上生长更为迅速,且在培养基中含一定浓度的Ｃｕ＾２＋有助于发状根的形成。     

笋玉米原生质体培养及遗传转化的研究

以自花受粉的笋玉米幼胚为外植体建立了胚性细胞悬浮系,酶解游离原生质体通过液体浅层培养得到了再生植株;通过PEG法和电激法对原生质体进行了遗传转化,转化用外源基因是潮霉素抗性基因和BT基因,原生质体再生愈伤组织经潮霉素筛选后,PEG法和电激法获得抗性愈伤组织的频率分别为9 3%和8.9%,Southem-blotting证明外源基因已整合到玉米抗性愈伤组织细胞基因组中,转基因工程植株的分化工作在正在进行中.     

抗生素Bagremycin生产菌Streptomyces sp. Tü4128接合转移系统的建立

基于噬菌体φC31 att/int系统,采用属间接合将来自大肠杆菌的DNA有效地导入菌株Tü4128的孢子中。通过条件优化,当融合温度为37℃时,在含80mmol/L MgCl2的ISP4培养基上使每个受体细胞的接合频率显著提高到7.3×10-3。Southern blot分析显示在受体菌染色体上存在单一的染色体附着位点(attB位点)。整合位点的DNA序列测序显示为保守。采用优化的方法建立了大肠杆菌和菌株Tü4128间高效的属间接合系统。     

尾巨桉遗传转化系统建立的研究

以建立的尾巨桉(Eucalyptus urophylla×grandis)3226、3228无性系高频再生体系为基础,利用GUS染色组织分析法研究了预培养时间、侵染时间和共培养时间因素对尾巨桉茎段遗传转化的影响,探讨了适宜尾巨桉转化的卡那霉素与抑菌抗生素使用浓度.结果表明,较优的转化条件是:茎段外植体不需进行预培养而直接进行侵染（菌液浓度OD600值为0.5）3 min,共培养2 d,然后转移到含75 mg／L卡那霉素和300 mg／L头孢噻肟钠的筛选培养基上,进行转化植株的再生.3226、3228     

大白菜遗传转化体系的建立

系统研究了根癌农杆菌LBA4404介导的大白菜遗传转化的若干因素,成功地建立了大白菜快速有效的遗传转化体系,并获得了大白菜抗性植株。实验结果表明,大白菜的不同基因型、苗龄、外植体类型,菌液浓度、浸染时间,共培养和抗生素浓度对转化频率均有一定影响,其最高转化频率达4.0%。抗性植株经PCR和Southern blot检测表明,目的基因已整合进大白菜基因组中。     

无类囊体蓝藻Gloeobacter violaceus基于广宿主质粒的遗传转移系统

无类囊体蓝藻Gloeobacter violaceus的细胞有厚胶质鞘包裹并形成群体,难以进行遗传操作.用注射器反复吸打的方法将胶质鞘剥落,得到大量单个细胞,通过接合转移将外源广宿主质粒pKT210转入G.violaceus.用斑点杂交方法以及对质粒进行酶切图谱分析,均证实外源质粒pKT210确已导入G.violaceus并稳定复制,未发生结构上的变化.从G.violaceus提取的pKT210可转化mcr和mrr基因缺陷的大肠杆菌DH10B却不能转化mcr+mrr+菌株DH5a,表明G.vio-laceus中可能存在甲基化酶系统.     

Streptomyces albovinaceus DSM 40136中环二肽的盐胁迫发掘

该文选择陆生放线菌Streptomyces albovinaceus DSM 40136,结合菌株肽类次级代谢产物生物合成基因簇的分析,利用盐胁迫策略对其进行产物发掘,成功地利用添加海盐质量分数为3%的M-ISP4培养基激活菌株生产出具有多种生物学活性的环二肽Cyclo(L-Pro-L-Leu).该产物的发掘表明:利用海盐胁迫策略可有效应用于陆生放线菌次级代谢潜能的激活,且新产物的发掘也为环二肽生物合成研究及代谢工程改造提供了良好的出发菌株.     

嵌入式系统中USB Host功能的开发

采用自下向上的设计流程,在没有嵌入式操作系统支持的条件下,自主设计和实现了嵌入式USB Host功能．以ISP1362驱动USB海量存储类设备为例,描述了嵌入式USB Host系统的框架结构和底层驱动的设计方法．实验结果表明,遵从海量存储类子协议的USB设备,都能够被系统驱动,而且数据传输速度优于PC机驱动方式．     

农杆菌介导的唐菖蒲遗传转化体系的建立

在唐菖蒲‘Advanced Red’胚性愈伤组织受体系统的基础上,建立其遗传转化体系。采用根癌农杆菌（GV3101）介导法,研究了侵染液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮（AS）浓度、负压和筛选方式等因子对唐菖蒲遗传转化效率的影响。结果表明：在遗传转化过程中,不经预培养,负压处理下,农杆菌菌液OD600为0.6～0.8,侵染时间15～20min,添加100μmol/L AS,共培养3d,可获得较高的遗传转化效率。经过3～4个月选择培养,部分抗性植株经PCR和Southern杂交检测表明,目的基因gus已整合到唐菖蒲基因组中。     

基于SPCE61A的语音系统开发

介绍一种基于SPCE061A的语音系统的开发,包含录音语音播报等功能。完成作品为小型语音控制模组,可以通过程序的不同录入完成录音、复读、语音播报等功能。     

一个遗传拨动开关系统的全局稳定性

该文研究一个具有协同数为1的遗传拨动开关系统的全局定性性质. 首先证明该系统仅有一个平衡点且为稳定结点, 再利用Poincare-Bendixson 定理证明系统没有周期轨, 最后证明系统恰有两个无穷远平衡点且均为鞍结点, 从而获得系统的全局定性结构, 由此知系统是全局单稳的.     

锁相环实现取样式A／D转换的原理及电路

本文提出一种利用锁相环实现取样式Ａ／Ｄ转换的新方法，通过锁相环对输入信号进行频率变换，获得一等效延时△ｔ的采样信号；输入信号的等效采样次数及实际采样间隔根据其频率特性由微机编程控制。基于此原理设计出高频周期信号的数据采集系统。     

基于工控机数据高密度采集系统的开发

基于工控机的数据高速、高精度采集数字信号系统,包括一台工业控制计算机,数据缓存FIFO,本文详细说明了系统的设计方法及关键技术,并对PCL-818L数据采集板进行了介绍,以及VB6.0的数据库访问技术。     

基于DDS技术的chirp信号产生系统

线性调频信号(chirp)是一种具有良好的脉冲压缩性能及分辨能力、较为成熟和应用最广泛的一种脉冲压缩信号。本文介绍了基于DDS技术产生线性调频信号的硬件和软件方案。实际应用结果表明所产生的chirp信号稳定性好、分辨率高、抗干扰等一系列优点,能满足工程的要求。     

有穷自动机在车辆管理系统开发中的应用

利用有穷自动机理论对"企业车辆管理"的生命周期状态转化进行了形式化描述.通过分析车辆管理的流程,得到了车辆管理所涉及的各项业务流程,并对各项业务进行了说明,使得车辆管理的业务流程更加清晰.     

Establishment of a genetic transformation system for maize inbred P9-10

It was found that the supplement of 10 -4 mol/L AgNO3 in N6 medium enhanced the induction of type Ⅰ embryogenic calli from immature embryos of maize inbred P9-10. After high-osmotic treatment, the induced calli was taken as transformation recipient to be bombarded with plasmid pMG6 carrying synthetic Bt gene by PDS-1000/He genegun. A total of 14 resistant calli were obtained after screening subsequently on the mediums with gradually increasing selective pressure. 10 plants were regenerated from the resistant calli on 3 different induction media, and 8 out of the 10 regenerated plants were confirmed to be integrated with Bt gene by PCR and Southern blotting analysis. Results of ELISA showed that the Bt-protein content in the leaves of the transgenic plants varied between 20-200 ng/g fresh weight.