发酵法生产番茄红素培养方法的改进及优化

研究了应用三孢布拉氏霉菌生产番茄红素的发酵工艺。针对菌种生长能力的降低,首次采用了孢子悬液直接接种的方式,并对菌种孢子的生长条件进行了优化。另外,提出了直接发酵培养的一级培养工艺,该工艺稳定、简便,不仅提高了番茄红素的产量,而且缩短了发酵培养时间。     

三孢布拉霉菌中辅酶Q9的分离与鉴定

从三孢布拉霉菌菌丝体中分离提取辅酶Q,经硅胶柱和制备色谱纯化后纯度达98%。样品在Craven反应中显蓝色,紫外光谱扫描在275?nm处有最大吸收,高效液相分析显示样品保留时间比辅酶Q10的略小。红外光谱谱图表明样品具有辅酶Q9的特征化学键和分子结构,电喷雾质谱（ESI/MS）确定了所分离的辅酶Q分子量［M+H］为795.8,以上结果表明,本实验室所保存的三孢布拉霉菌菌丝体内的泛醌存在形态是辅酶Q9,这为后续的发酵生产和药物合成研究奠定了重要的工作基础。     

烟草和MPTA对三孢布拉氏霉合成番茄红素的影响

在三孢布拉氏霉发酵48 h添加3.6 mmol/L 2-(4-甲基苯氧)-三乙基胺(MPTA)可有效抑制96% β-胡萝卜素的合成;添加15g/L烟草可促进总类胡萝卜素的产量(170mg/L),但其对β-胡萝卜素的合成抑制作用低于MPTA。L27（3 13）正交实验从抑制剂添加时间、添加量以及两种抑制剂的交互作用等方面考察了同时添加MPTA和烟草对番茄红素产量的影响。发酵48?h同时添加烟草10g/L与MPTA 2.2mmol/L,番茄红素的产量可达205mg/L（占总类胡萝卜素产量的94%）。     

三孢布拉霉发酵生产β—胡萝卜素

论述了几种不同型式的搅拌对三孢布拉霉发酵生产胡萝卜的影响，在最佳搅拌型式下获得了较高的发酵水平；经发酵培养的可获得胡萝卜素１５４７ｍｇ／Ｌ，菌体湿重３５４ｇ／Ｌ。     

三孢酸结构类似物对发酵生产番茄红素的影响

考察了三孢酸结构类似物α-紫罗酮、β-紫罗酮和脱落酸对番茄红素生产菌Blakeslea trispora的生长和番茄红素合成的影响。结果表明α-紫罗酮、β-紫罗酮和脱落酸对Blakeslea trispora菌体生长影响不大,但都能明显刺激番茄红素的合成。在发酵培养2d后加入α-紫罗酮、β-紫罗酮和脱落酸,番茄红素的产量最高。其中脱落酸的添加对番茄红素产量影响最为显著,在发酵2d后添加脱落酸9.36×10^-3mmol/L,番茄红素产量达到549mg/L,比对照（382mg/L）提高了44%。     

三种替代冬虫夏草发酵菌粉的营养成分和活性成分的比较研究

为评价三种替代冬虫夏草发酵菌粉的应用价值,对虫草头孢菌粉、蝙蝠蛾拟青霉菌粉及虫草被孢菌粉的主要活性成分和营养成分进行了比较分析.结果表明:蝙蝠蛾拟青霉菌粉总蛋白和粗纤维含量最高,虫草被孢菌粉碳水化合物含量最高;虫草头孢菌粉胞苷含量最高,3个发酵菌粉中均未检出虫草素和肌苷;虫草被孢菌粉多糖中葡萄糖含量明显低于其他菌粉,虫草头孢菌粉多糖分子量最高,虫草被孢菌粉和蝙蝠蛾拟青霉菌粉多糖的分子量差异不大.与文献报道的天然冬虫夏草的活性成分和营养成分进行比较,发现三种替代冬虫夏草发酵菌粉在腺苷、胞苷含量上均高于天然冬虫夏草.这些结果揭示三种替代冬虫夏草发酵菌粉在功效上有差异,并且三种菌粉在某些功效上要高于天然冬虫夏草.     

链霉菌酯酶研究进展

酯酶是一类催化酯键水解和形成的酶类,主要包括脂肪酶和羧酸酯酶.作为生物催化剂,酯酶具有重要的应用价值并被广泛应用于工业领域.链霉菌富含丰富的、生物学特性多样的酯酶.本文对链霉菌酯酶的表达及分泌调节、酶学性质及晶体结构、筛选及发酵生产三个方面进行了综述,以期引起人们对于链霉菌酯酶研究的兴趣.     

ACLY抑制剂脱氢弯孢霉菌素肝微粒体代谢

该文主要研究了潜在抗肿瘤候选化合物脱氢弯孢霉菌素的体外肝微粒体代谢特点.建立了脱氢弯孢霉菌素含量的HPLC测定方法,考察了脱氢弯孢霉菌素在不同种属来源的肝微粒体中的代谢速率差异.依据UPLC-MS结果推测脱氢弯孢霉菌素中α、β不饱和双键经环氧化反应,亲和反应和分子内脱水反应,生成epoxycurvularin、 10,11-邻二羟基弯孢霉菌素和curvulopyran,且脱氢弯孢霉菌素在溶液中可能发生非酶催化的化学转化.考虑到脱氢弯孢霉菌素结构中的α,β不饱和双键既是重要的活性结构又是主要的代谢位点,合理的前药设计可能是提高该化合物可药性的有效方法.     

西双版纳橡胶,胡椒和咖啡根际土壤放线菌区系研究

不论干雨季，橡胶、胡椒和咖啡根际土壤放线菌中，链霉菌的分离频率最高，占总分离频率的４０％以上．其中，三作物根际土壤的链霉菌、链轮丝菌、马杜拉放线菌和孢囊放线菌等属的分离频率干季高于雨季、而小单孢菌、诺卡氏菌、游动放线菌、间孢囊菌和钦氏菌等属的分离频率雨季高于干季     

钼对红霉素生物合成的影响

在利用糖多孢红色链霉菌HB发酵生产红霉素的过程中,于48 h向发酵液中加入钼酸钠,通过对代谢途径关键调控酶活力的测定以及运用高效液相色谱法对发酵液中相关有机酸含量的测定,结论显示:当发酵液中钼酸钠的加入量为0.056 g/100 mL时,部分代谢流向有利于红霉素生物合成的方向迁移,在一定程度上提高了红霉素的生产速率和产量.     

冀东地区小麦种子内寄生真菌的种类及致病性的研究

分离冀东地区小麦 3 0个品种 (系 ) 4 5 0 0粒种子 ,得到种子内寄生真菌 4 0 0个菌株。除 4 2 5 %的菌落在供试条件下未产孢外 ,其余分属于 6个属 10个种。其中链格孢菌出现频率最高 ,仅细链格孢即占 4 5 .0 % ,其次为离蠕孢菌 ,仅麦根腐离蠕孢即占 13 .5 %。致病性测定结果表明 :小麦链格孢菌、细链格孢菌、麦根腐离蠕孢菌、禾谷镰刀菌、小麦德氏霉菌、勒韦茎点霉菌等 6种真菌对小麦的种子、幼苗和幼根都有一定的致病性     

噬夏孢欧文氏菌类crtB基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

噬夏孢欧文氏菌类胡萝卜素合成相关基因crtB,编码八氢番茄红素合成酶。利用PCR技术扩增出crtB基因,克隆进表达载体,构建表达质粒pET-15bcrtB。重组质粒转化大肠杆菌,构建工程菌株。经IPTG诱导,工程菌高效表达了重组八氢番茄红素合成酶,表达量占菌体总蛋白的40%。重组蛋白以包含体形式存在,包含体经洗涤、尿素溶解、复性并经镍离子树脂亲和层析、Superdex 75凝胶层析柱纯化,得到了电泳纯的重组八氢番茄红素合成酶,带有His-tag的该蛋白分子量为35 kDa,pI值为7.3。     

广东连县红土型金矿中的微生物及对重金属元素的浸出作用

对广东省连县观头垌红土型金矿中的微生物进行培养、分离和鉴定,获得的主要微生物类型有芽孢杆菌属、肠杆菌属、假单孢杆菌属、乳杆菌属、不动杆菌属、气单孢杆菌属、利斯特氏菌属、土壤杆菌属、棒状杆菌属、莫拉氏菌属等细菌,青霉菌属、交链孢霉属、芽枝霉菌属、酵母菌属和毛霉属等真菌以及化能自养菌(硫杆菌属).浸出实验表明,微生物可以加速Cu、Cd、Zn的浸出,G菌对Cu、Zn的浸出效果明显,而G 菌对Cd的浸出效果较好.     

昆明地区土壤放线菌组成的初步研究

从昆明黑龙潭森林的同一地段在雨季和旱季各采集五份森林土,旱季从大观楼采集湖底土五份。用五种培养基分离了土样中的放线菌。经分类学研究,其放线菌组成如下: 1,旱季森林土:游动放线菌12株,小瓶菌2株,孢囊链霉菌2株,间孢囊菌1株,小耳孢囊菌2株,小单孢菌7株,诺卡氏菌18株,链霉菌1461株。 2,雨季森林土:游动放线菌2株,孢囊链霉菌3株,小耳孢囊菌2株,小单孢菌4株,诺卡氏菌23株,链霉菌1290株。 3,湖底土:游动放线菌5株,小耳孢囊菌1株,小单孢菌4株,双歧放线菌1株,诺卡氏菌14株,链霉菌243株。     

褐黄孢链霉菌生产纳他霉素工艺条件研究

目前,国内纳他霉素产量低,为提高其产量,实现其工业化生产,主要对褐黄孢链霉菌ATCC 13326发酵生产纳他霉素的培养条件及前体添加策略进行研究.得出最佳培养条件为:培养温度28℃,种龄40～44 h,接种量10%,装液量10%,初始pH 7.3,发酵24 h时加入O.6%的前体丙酸钠.在此条件下摇瓶分批发酵生产纳他霉素的产量可达到6.87g/L,比未添加前体的纳他霉素产量(3.72 g/L)提高了84.7%.利用10 L发酵罐进行纳他霉素的发酵研究,在最优培养条件下,发酵罐中的纳他霉素产量可达到8.34 g/L,比摇瓶分批发酵生产纳他霉素产量(6.87 g/L)提高了21.4%.     

用霉菌生物量生产壳聚糖研究进展

综述了用生物量生产壳聚糖霉菌的种类、培养基质组成、发酵参数及相关制取方法的研究进展,并展望了用霉菌生物量生产壳聚糖的发展前景.     

三杨庄汉代遗址霉菌污染种类鉴定与分析

结合内黄县三杨庄汉代遗址表面的霉菌形态特征、利用显微观察与DNA分子鉴定方法,对其11份表面土样中分离到的霉菌进行了数量分析和种类鉴定,确定镰刀菌(Fusarium)、根毛霉(Rhizomucor)和链格孢菌(Alternaria)等14种真菌为遗址现场的主要污染霉菌,为进一步的防霉技术研发和遗址的现场保护研究提供了科学依据.     

娄彻氏链霉菌发酵改善水稻秸秆加工性能的研究

【目的】应用正交试验,研究了娄彻氏链霉菌发酵对水稻秸秆加工性能的影响。【方法】在30℃、含水率为65%的条件下,探究了发酵时间、接种量、碳氮比3因素对水稻秸秆质量损失率,纤维素、半纤维素和木质素的降解率,以及最大压应力和黏度(加工性能)的影响,并利用SPSS 19.0软件分析了降解条件与水稻秸秆理化性能的相关性。【结果】娄彻氏链霉菌发酵条件对水稻秸秆的降解性与加工性能的影响顺序为:发酵时间碳氮比接种量;通过相关性分析可得,发酵时间与纤维素、半纤维素和木质素的降解率以及质量损失率极显著正相关,与秸秆的最大压应力和黏度显著负相关。发酵的最优条件为:碳氮比为25,接种量为0.8%,发酵时间为20 d。此时水稻秸秆的最大压应力为5.62 MPa,较原秸秆降低了10.74%;黏度为415.8 m Pa"s,较原秸秆提高了29.7%;平衡扭矩则降低了18.2%。微观结构(SEM)显示发酵后水稻秸秆表面粗糙、凹凸不平,内部结构发生了变化。【结论】娄彻氏链霉菌发酵改变了水稻秸秆的物理化学结构,改善了水稻秸秆的加工性能。     

有机杀菌剂与苦皮藤素对玉米弯孢霉的联合毒力研究

采用生长速率法,测定了生产上常用防治玉米弯孢霉叶斑病的7种有机杀菌剂和1种植物源农药--苦皮藤素对玉米弯孢霉的毒力,得到8个毒力回归方程及相应EC50值.结果表明:供试有机杀菌剂中烯唑醇和扑海因对玉米弯孢霉属极强毒力杀菌剂,其抑制中浓度分别为1.4048E 1和2.2172E 1.苦皮藤素对玉米弯孢霉菌丝生长的抑中浓度为5.8235E 5.所筛选出的两种对玉米弯孢霉菌丝生长具极强抑制作用的有机杀菌剂分别与苦皮藤素的混配,试验结果表明:苦皮藤素与烯唑醇3∶ 7的混配比例对玉米弯孢霉菌丝生长的实际相对抑制率最大,达74.29%,且为增效作用组合,增效比为1.87.     

三孢布拉霉菌发酵番茄红素提取工艺的优化

番茄红素作为一种类胡萝卜素,具有提高免疫力、延缓衰老等多种功能。利用发酵法生产番茄红素是满足市场需求的重要途径。为了更好地提升番茄红素的提取收率,降低发酵过程中各种杂质的含量。研究了不同的溶媒及处理方法对湿菌体进行直接高效萃取的新方法。将番茄红素发酵液经过抽滤、洗涤处理得到湿菌丝体,采用有机溶剂和超声波破碎结合的处理方法,考察了菌丝体状态、皂化条件、脱水剂、提取溶剂、菌丝量与提取溶剂的料液比例、提取时间和提取温度对番茄红素提取率的影响。实验结果表明,利用湿菌体直接提取番茄红素的方法是可行的,并确定了湿菌体直接提取的最优条件:用0.6mol/L NaOH溶液皂化,乙醇脱水处理10min,乙酸乙酯作为提取剂,菌丝体质量(g)与提取溶剂体积(mL)之比为1∶75,在45℃超声处理20min,可获得最高的番茄红素提取率。